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| 1 | 蛋白激酶C在支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的信号转导机制研究显示文摘目的 探讨蛋白激酶C(PKC)信号转导途径在支气管哮喘 (简称哮喘 )大鼠气道平滑肌细胞 (ASMC)增殖中的作用。方法 (1) 4 8只Wistar大鼠分为哮喘组 (A组 )及对照组 (B组 ) ,根据激发时间 (2、4、8周 )又分别分为A1、A2 、A3 组和B1、B2 、B3 组 ,其中A、B组大鼠各 12只 ,A2 、A3 、B2 及B3 组各 6只。用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐 (MTT)法、增殖细胞核抗原 (PCNA)染色等方法观察每组ASMC增殖 ;(2 )用PKC激活剂 12 肉蔻酰 13 乙酸佛波酯 (PMA)及抑制剂Ro 31 82 2 0分别干预A1、B1组ASMC ,观察ASMC增殖的变化 ;(3)用逆转录 聚合酶链测定 (RT PCR)和免疫细胞化学法检测A1、A2 、A3 组和B1组ASMCPKC α的表达。结果 (1)A组ASMCS期比例、吸光度 (A)值、PCNA表达增高 ,与B组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。 (2 )A1组ASMCS期比例、A值、PCNA阳性表达率在干预前分别为 (19± 3) %、0 4 5 9± 0 0 36、(80± 10 ) % ;10nmol/LPMA处理后分别为 (2 7± 4 ) %、0 5 99± 0 0 78、(95± 9) % ;5 0nmol/LPMA处理后为 (14± 3) %、0 346± 0 0 38、(5 3± 8) % ;Ro 31 82 2 0处理后为 (14± 3) %、0 343± 0 0 4 8、(4 9± 8) %。各干预剂处理后与处理前比较差异均有显著性 (P <0 0 1) ;5 0nmol/LPMA处? | 许淑云 徐永健 张珍祥 倪望 陈士新 | 2003 | 中华结核和呼吸杂志2003，26，12： | 29 |
| 2 | Contribution of protein kinase C to passively sensitized human airway smooth muscle cells proliferation显示文摘Background Airway smooth muscle proliferation plays an important role in airway remodeling in asthma. But little is known about the intracellular signal pathway in the airway smooth muscle cell proliferation in asthma. The objective of this paper is to investigate the contribution of protein kinase C (PKC) and its alpha isoform to passively sensitized human airway smooth muscle cells (HASMCs) proliferation. Methods HASMCs in culture were passively sensitized with 10% serum from asthmatic patients,with non-asthmatic human serum treated HASMCs used as the control. The proliferation of HASMCs was examined by cell cycle analysis,3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide (MTT) colorimetric assay and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunofluorescence staining. The effect of PKC agonist phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and PKC inhibitor Ro-31-8220 on the proliferation of HASMCs exposed to human asthmatic serum and non-asthmatic control serum was also examined by the same methods. The protein and mRNA expression of PKC-α in passively sensitized HASMCs were detected by immunofluorescence staining and reverse transcription-polymerase chain reaction. Results The percentage of S phase,absorbance (value A) and the positive percentage of PCNA protein expression in HASMCs passively sensitized with asthmatic serum were (16.30±2.68)%,0.430±0.060 and (63.4±7.4)% respectively,which were significantly increased compared with HASMCs treated with control serum [(10.01±1.38)%,0.328±0.034 and (37.2±4.8)%,respectively] ( P <0.05). After HASMCs were passively sensitized with asthmatic serum,they were treated with PMA,the percentage of S phase,value A and the positive percentage of PCNA protein expression were (20.33±3.39)%,0.542±0.065 and (76.0±8.7)% respectively,which were significantly increased compared with asthmatic serum sensitized HASMCs without PMA( P <0.05). After HASMCs passively sensitized with asthmatic serum were treated with Ro-31-8220,the percentage of S phase,value A and the positive percentage of PCNA protein expression were (11.21±1.56)%,0.331±0.047 and (38.8±6.0)% respectively,which were significantly decreased compared with asthmatic serum sensitized HASMCs without Ro-31-8220 ( P <0.05). The relative ratio of value A of PKC-α mRNA and the positive percentage of PKC-α protein expression in passively sensitized HASMCs were 1.23±0.10 and (61.1±9.4)% respectively, which were significantly increased compared with HASMCs treated with control serum [1.05±0.09 and (34.9±6.7)%,respectively] ( P <0.05). Conclusions The proliferation of HASMCs passively sensitized with human asthmatic serum is increased. PKC and its alpha isoform may contribute to this proliferation. | 许淑云 徐永健 张珍祥 倪望 陈士新 | 2004 | Chinese Medical Journal2004，，1： | 19 |
| 3 | 肺泡表面活性物质相关蛋白A基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的关系显示文摘目的探讨中国汉族人肺泡表面活性物质相关蛋白A(surfactantproteinA,SPA)基因多态性与慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease,COPD)易感性的关系。方法应用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性,检测SPA基因型在88例吸烟COPD患者和87名健康吸烟者中频率的分布。结果88例COPD患者+186位点AA、AG、GG3种基因型的分布频率分别为86.4%、12.5%和1.1%,而对照组为66.7%、27.6%和5.7%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。+655位点CC、CT、TT3种基因型的分布频率分别为65.9%、27.3%和6.8%,而对照组为52.9%、36.8%和10.3%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。+667位点AA、AC、CC3种基因型的分布频率分别为47.2%、43.2%和9.1%;而对照组这三个基因基因型的分布频率分别为35.6%、51.7%和12.6%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论SPA+186位点基因多态性可能与中国汉族人吸烟COPD患者的发病有关,但该位点的突变怎样影响SPA的表达和活性,还有待进一步的研究。 | 谢俊刚 徐永健 张珍祥 倪望 陈仕新 | 2005 | 中华医学遗传学杂志2005，22，1： | 18 |
| 4 | 细胞外信号调节激酶活化在慢性支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用(英文)显示文摘本文旨在探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)在慢性支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞(airwaysmooth muscle cells, ASMCs)增殖中的作用。建立慢性哮喘大鼠模型,用 ERK 激动剂表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和抑制剂 PD98059 干预慢性哮喘大鼠 ASMCs 的培养。采用流式细胞仪、四甲基偶氮唑盐(MTT)法、3H-thymidine (TdR)掺入法和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)免疫组织化学法检测ASMCs增殖情况,观察ERK信号通路对ASMCs 增殖的影响。RT-PCR 和 Western blot 检测 ERK mRNA 和 ERK1/2、磷酸化 ERK1/2 (p-ERK1/2)蛋白的表达。与正常对照组ASMCs 比较,慢性哮喘组ASMCs 的 G0/G1 期细胞所占比例明显减少,S+G2/M 期细胞所占比例增高;吸光度(A490)值、细胞DNA合成量和PCNA阳性表达量均明显增加,ERK mRNA、ERK1/2 蛋白、p-ERK1/2 蛋白的表达量以及ERK 活化率显著增高。经PD98059 干预之后,慢性哮喘组ASMCs 的 S+G2/M 期细胞所占比例、A490 值、细胞DNA合成量和PCNA阳性表达量明显降低,ERK mRNA、ERK1/2 蛋白、p-ERK1/2 蛋白的表达量以及ERK 活化率显著降低。经EGF 干预后,慢性哮喘组ASMCs 的 S+G2/M 期细胞所占比例、A490 值、细胞DNA合成量和PCNA阳性表达量进一步增高,而这一作用可以被PD98059 抑制。以上结果提示,慢性哮喘大鼠ASMCs 内源性增殖活性增加,ERK1/2 参与其增殖活性的调控,ERK 信号通路在哮喘气道重建的ASMCs 增殖调控中具有重要作用。 | 白晶 刘先胜 徐永健 张珍祥 谢敏 倪望 | 2007 | 生理学报2007，59，3： | 18 |
| 5 | 蛋白激酶C对大鼠支气管平滑肌K_V通道的影响显示文摘用全细胞膜片钳、Western印迹法和逆转录 PCR技术 ,观察蛋白激酶C ( proteinkinaseC ,PKC)对大鼠支气管平滑肌细胞 (bronchialsmoothmusclecells,BSMCs)电压依赖性延迟整流钾通道 (KV)活性及其亚型KV1 5表达的影响。结果为 :( 1)PKC激活剂豆蔻酰佛波醇乙酯 (phorbol 12 myristate 13 acetate ,PMA)显著抑制急性分离大鼠BSMCs的KV 通道电流 ,该效应被PKC阻断剂Ro3 1 82 2 0显著抑制 ;( 2 )PMA显著抑制体外培养大鼠BSMCs的KV1 5mRNA和蛋白质的表达 ,该效应被Ro3 1 82 2 0显著抑制。上述观察结果提示 ,PKC活化可抑制大鼠BSMCs的KV 通道电流活性 ,下调KV1 | 刘先胜 徐永健 张珍祥 倪望 陈仕新 | 2003 | 生理学报2003，55，2： | 17 |
| 6 | 支气管哮喘模型大鼠气道重建的特征及机制显示文摘目的探讨哮喘大鼠气道重建的特征及蛋白激酶C(PKC-α)、核因子κB(NF-κB)在哮喘重建气道中的表达。方法延长卵清蛋白(OVA)激发时间制备慢性哮喘模型。36只Wistar大鼠分为6组:哮喘2、4、8周组和对照2、4、8周组,每组6只。用组织学结合图像分析系统观察各组大鼠气道炎性细胞浸润、胶原面积、平滑肌面积及杯状细胞数目等,免疫组化法观察PKC-α、NF-κB在气道的表达。结果①哮喘2、4、8周组气道壁均可见炎性细胞浸润、黏膜杯状细胞增多,与对照各组同时间点比较差异有显著性意义(P<0.05)。哮喘4、8周组大气道胶原、平滑肌面积增多,与对照4、8周组比较差异有显著性意义(P<0.05)。哮喘各组小气道胶原面积虽有增加,但无统计学意义,但哮喘8周组小气道平滑肌面积增加,与对照8周组比较差异有显著性意义(P<0.05)。②哮喘各组气道上皮细胞PKC-α、NF-κB蛋白表达增加,与对照各组同时间点比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论通过延长OVA激发时间制备大鼠慢性哮喘模型,气道不仅存在慢性炎症,而且气道壁结构有改变,PKC-α、NF-κB可能参与哮喘的气道重建。 | 许淑云 徐永健 张珍祥 倪望 陈士新 | 2006 | 华中科技大学学报(医学版)2006，35，4： | 16 |
| 7 | 川芎嗪与尼群地平配伍对慢性阻塞性肺病患者血流动力学的影响显示文摘目的 :寻找降低慢性阻塞性肺病 (简称慢阻肺 )患者肺血管阻力而不增加药物副作用的药物。方法 :通过右心漂浮导管检测部分临床缓解期的慢阻肺患者 ( 15例 )在应用川芎嗪与尼群地平配伍的血流动力学参数变化。结果 :慢阻肺患者用药即刻、15、30、60min时 ,肺动脉平均压下降了 1 4 %、17 0 %、2 0 0 %、18 0 % ;肺循环阻力下降了 15 2 %、36 2 %、4 3 0 %、34 6% ;体循环阻力下降了 7 9%、19 2 %、17 8%、2 0 8% ;心输出量上升了 15 8%、2 2 6%、2 2 2 %、33 8%。体循环动脉压及心率差异无显著性。结论 :川芎嗪与尼群地平配伍能够有效地降低慢阻肺患者的肺血管阻力及肺动脉压 。 | 林春龙 张珍祥 徐永健 倪望 | 2001 | 中国中西医结合杂志2001，21，3： | 15 |
| 8 | 青心酮对慢性阻塞性肺病患者血流动力学及血浆心钠素和环磷酸苷类水平的影响显示文摘为了解青心酮对慢性阻塞性肺病(慢阻肺)患者血流动力学的影响,用右心漂浮导管检测了11例慢阻肺患者应用青心酮前、后血流动力学某些参数,同时采用放射免疫分析法测定了血浆心钠素及环磷酸苷类水平。结果:静脉注射青心酮后,肺动脉平均压及肺循环阻力、体循环阻力均下降(P<0.05).体动脉压及动脉血气指标无明显变化(P>0.05),心输出量在正常范围内增加。血浆心钠素、环磷酸鸟苷水平下降(P<0.01,P<0.05)。表明青心酮可能通过调节环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷的比值而达到扩血管目的,其心钠素降低可能是一种继发性反应。 | 林春龙 张珍祥 徐永健 倪望 | 1995 | 中国中西医结合杂志1995，15，3： | 14 |
| 9 | 慢性阻塞性肺疾病患者血维生素D水平及其维生素D结合蛋白基因多态性的相关性研究显示文摘目的 探讨湖北地区慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者维生素D水平及其维生素D结合蛋白(GC)基因多态性.方法 对250例受检者(116例吸烟COPD患者和134例健康吸烟者)进行问卷调查,收集相关资料(吸烟史、维生素D摄入、并发症等);ELISA法检测受试者血清25-羟基维生素D(25-OHD)水平,通过Taqman探针实时荧光定量PCR对GC基因(rs4588位点和rs7041位点)进行分型;并进行肺功能检测.结果 吸烟COPD者25-OHD水平较健康吸烟者低(36.58 nmol/L比43.80 nmol/L,P<0.001).25-OHD水平吸烟COPD者第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比≥80%者为39.43 nmol/L,FEV1占预计值百分比>50%~80%者为35.32 nmol/L,FEV1占预计值百分比>30%~50%者为32.21 nmol/L,FEV1占预计值百分比<30%者为26.25 nmol/L(P< 0.01).25-OHD水平与肺功能呈正相关(r2 =1.911,P<0.000 1).GC基因rs7041位点的TT型与25-OHD水平和COPD易感性存在关联(P<0.01;OR =2.140,95% CI1.157~3.959,P=0.015).结论 吸烟COPD者易患维生素D缺乏,且COPD气流受限程度与维生素D水平呈负相关.GC基因rs7041位点的TT型与25-OHD水平和COPD易感性密切相关,可能成为COPD易感性筛查的候选突变位点. | 李晓晨 刘先胜 徐永健 熊维宁 赵建平 倪望 陈士新 | 2014 | 中华内科杂志2014，53，4： | 14 |
| 10 | 蛋白激酶C-核因子κB信号转导通道对人肺动脉平滑肌细胞增殖和血管内皮生长因子表达的影响显示文摘目的 探讨蛋白激酶C(PKC) 核因子κB(NF κB)信号转导通道对人肺动脉平滑肌细胞 (HPASMCs)增殖和血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法 体外培养HPASMCs ,用工具药PKC激活剂 12 肉豆蔻酰 13 乙酸佛波酯 (PMA)和NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC) ,将HPASMCs分为对照组、PMA组和PMA +PDTC组在常氧和缺氧条件下培养。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测VEGFmRNA表达 ,Westernblot法检测VEGF和NF κB的抑制蛋白IκBα蛋白表达 ,免疫细胞化学法检测NF κBp6 5的表达和定位 ,流式细胞术检测细胞周期时相分布。结果 ( 1)NF κBp6 5胞核染色阳性率、IκBα蛋白相对表达量及细胞周期G2 /M % :常氧或缺氧PMA组与相应对照组、PMA +PDTC组比较差异均有显著性 (P均 <0 0 5 ) ;缺氧PMA组与常氧PMA组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。 ( 2 )VEGFmRNA和蛋白表达 :常氧对照组、PMA组、PMA +PDTC组组间差异均无显著性 (P均 >0 0 5 ) ;缺氧PMA组均高于缺氧对照组、缺氧PMA +PDTC组、常氧PMA组 ,差异均有显著性 (P均 <0 0 5 )。 ( 3)缺氧PMA组NF κB胞核染色阳性率、VEGF蛋白相对表达量、G2 /M %之间均呈正相关 (r =0 5 87~ 0 710 ,P均 <0 0 5 )。结论 常氧培养HPASMCs存在PKC NF κB信号转导通道 ; | 张焕萍 徐永健 张珍祥 倪望 陈士新 | 2004 | 中华结核和呼吸杂志2004，27，4： | 14 |
| 11 | 细胞外信号调节蛋白激酶对哮喘大鼠气道平滑肌细胞周期的影响显示文摘目的探讨细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通道调控支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖中的细胞周期机制。方法30只Wistar大鼠随机分为正常组和哮喘组,哮喘组采用卵清蛋白致敏和激发建立哮喘模型。取两组大鼠叶支气管ASMC进行原代培养,采用ERK激动剂表皮生长因子(EGF)和抑制剂PD98059干预哮喘组ASMC。用免疫组织化学法检测ASMC细胞周期蛋白CyclinD1和CDK2的表达;Western免疫印迹检测ERK1/2和磷酸化ERK1/2蛋白的表达,计算ERK活化率。结果哮喘组大鼠ASMC中CyclinD1、CDK2的表达和ERK活化率[76.15±4.88、92.30±7.95和(82.37±5.78)%]均较正常组[54.17±6.11、61.04±4.09和(49.91±3.26)%]显著升高(P均<0.05)。经EGF处理后上述指标进一步升高[119.28±8.14、134.77±9.26和(91.57±5.32)%,P均<0.05],经PD98059处理后显著降低[58.78±4.60、69.15±5.83和(54.01±4.12)%,P均<0.05]。结论哮喘大鼠ASMC增殖活性增强。ERK1/2可通过诱导ASMC中CyclinD1和CDK2蛋白高表达,使细胞从G1期向S期发展,促进细胞增殖。 | 白晶 刘先胜 徐永健 谢敏 倪望 | 2010 | 中国呼吸与危重监护杂志2010，9，1： | 12 |
| 12 | 茶碱抗气道炎症作用的临床研究显示文摘有试验发现,人肺组织内PDE总活性在茶碱治疗浓度范围内仅被抑制5%~10%。并且近来有研究发现,茶碱具有抑制炎症反应和免疫调节的作用[1]。由于气道炎症反应在COPD形成中具有较重要的作用,故推测茶碱对COPD的有效治疗部分源于其抗气道炎症作用,但尚... | 张宁 徐永健 张珍祥 刘谨 方慧娟 倪望 | 1999 | 中华结核和呼吸杂志1999，22，2： | 12 |
| 13 | 川芎嗪对人外周血淋巴细胞蛋白激酶C通道的影响显示文摘目的 :探讨川芎嗪 (LTZ)对正常人外周血淋巴细胞 (PBL)蛋白激酶C(PKC)通道在受到与哮喘有关的炎症介质刺激时所发生的功能变化是否有影响。方法 :取 6 3例健康人外周静脉血各 10mL ,分离PBL ,分 4批分别给予以下处理后 ,采用 [γ - 32 P]-ATP催化活性测定法检测细胞胞膜、胞浆及总PKC活性。( 1)分 3组即 5g/LLTZ处理组 ( 6例 )、5 μmol/LPKC阻断剂Ro31- 82 2 0处理组 ( 6例 )和对照组 ( 6例 ,以下各批均以此组为阴性对照组 ) ;( 2 )共 3组分别用 10 0nmol/L乙酰甲胆碱 (Mch ,5例 )、5g/LLTZ +10 0nmol/LMch( 5例 )或 5 μmol/LRo31- 82 2 0 +10 0nmol/LMch( 5例 )处理。 ( 3)共 3组分别采用 10 0nmol/L组胺、5g/LLTZ +10 0nmol/L组胺 ( 5例 )或 5 μmol/LRo31-82 2 0 +10 0nmol/L组胺 ( 5例 )处理。 ( 4)共 3组分别用 10 0nmol/LPMA( 5例 )、5g/LLTZ +10 0nmol/LPMA( 5例 )或 5μmol/LRo31- 82 2 0 +10 0nmol/LPMA( 5例 )。结果 ( 1)LTZ对正常人PBL胞膜、胞浆及总PKC活性均无明显影响 ;( 2 )乙酰甲胆碱及组胺均可促进正常人PBL胞膜PKC活性增加 ,LTZ对该作用有抑制效应 (P <0 0 5 )。 ( 3)LTZ对PMA诱发正常人PBL胞膜PKC活性增加的效应有抑制作用 (P <0 0 5 )。结论 | 刘先胜 徐永健 张珍祥 熊盛道 倪望 | 2003 | 中国病理生理杂志2003，19，4： | 11 |
| 14 | 转染IκBα基因抑制NF-κB活性对A549细胞侵袭行为的影响显示文摘背景与目的:近年来的研究显示核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的活化能够调节肿瘤细胞的侵袭和转移。本研究探讨抑制NF-κB的活性对A549细胞侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:构建表达NF-κB抑制物α同分异构体(inhibitor of NF-κB,α isoform,IκBα)的真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)/IκBα。体外培养A549细胞,分为未转染组(不转染质粒)、转染pcDNA3.1(+)组、转染pcDNA3.1(+)/IκBα组,分别转染相应的质粒。应用RT-PCR、Westernblot检测各组细胞IκBα的表达情况,应用凝胶电泳迁移率改变实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测各组细胞NF-κB的活性,应用Transwell侵袭小室检测各组细胞的侵袭能力,应用RT-PCR方法检测各组细胞MMP-2、MMP-9的mRNA水平,应用明胶酶谱法检测各组细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的活性。结果:酶切鉴定结果显示pcDNA3.1(+)/IκBα质粒构建成功。RT-PCR和Westernblot检测结果表明构建的pcDNA3.1(+)/IκBα质粒能够在A549细胞中表达IκBα。转染pcDNA3.1(+)/IκBα组A549细胞NF-κΒ活性、侵袭细胞数目、MMP-2活性及MMP-9活性均低于未转染组和转染pcDNA3.1(+)组(P值均<0.05),而转染pcDNA3.1(+)组与未转染组之间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论:转染IκBα基因能够抑制A549细胞中NF-κB的活性。NF-κB的活性下降能够抑制A549细胞的侵袭能力,其机制可能与MMP-2、MMP-9表达下调有关。 | 张建 徐永健 熊维宁 张珍祥 杜春玲 乔礼芬 倪望 陈士新 | 2008 | 癌症2008，27，7： | 11 |
| 15 | 青心酮对慢性阻塞性肺疾病的治疗机制探讨显示文摘在11例接受右心漂浮导管检查的慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)患者中,静脉注射青心酮(DHAP)后肺动脉平均压下降约15%,肺血管阻力下降39%,体循环阻力下降21%,而心输出量上升27%,体动脉血压及血气无改变。放射免疫测定也表明,用药后血浆内皮素1(ETI)及环磷酸鸟苷(cGMP)水平下降(P<0.01,P<0.05)。上述研究表明,青心酮能降低肺血管阻力,其药理机制可能与降低血浆ETI水平及调节环磷酸腺苷/环磷酸鸟苷(cAMP/cGMP)te值有关。 | 林春龙 张珍祥 徐永健 倪望 吴华 赖世英 叶笃筠 | 1995 | 中华结核和呼吸杂志1995，18，2： | 10 |
| 16 | 大鼠支气管哮喘模型γδT细胞Th1/Th2免疫应答模式的研究显示文摘目的 探讨γδT细胞在哮喘的免疫应答模式 ,认识γδT细胞亚群在哮喘发病机制中的作用。方法 Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为健康对照组与哮喘组 (用鸡卵清蛋白致敏和刺激大鼠 ,制作哮喘模型 ) ,每组 10只。收集外周血单个核细胞 (PBMC)和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,用补体攻击法结合洗淘法选择性培养扩增γδT细胞 ,并用流式细胞术鉴定培养体系中的γδT细胞及其纯度 ,用原位杂交法测γδT细胞白细胞介素 (IL) 4mRNA和干扰素 (IFN)γmRNA的表达 ,用ELISA检测培养上清液中IL 4和IFN γ的浓度。结果 哮喘组大鼠PBMC和BALF中 ,γδT细胞培养上清液中IL 4浓度显著高于健康对照组 (P <0 0 1) ,IFN γ浓度低于健康对照组 (P <0 0 1) ;γδT细胞IL 4mRNA表达阳性率高于健康对照组 (P <0 0 1) ,IFN γmRNA表达阳性率低于健康对照组 (P <0 0 1)。结论γδT细胞或者γδT细胞亚群存在Th1/Th2模式 ,在大鼠哮喘模型呈Th2优势应答 ,γδT细胞参与了哮喘的发病过程。 | 李超乾 徐永健 杨丹蕾 施焕中 刘先胜 熊维宁 陈仕新 倪望 张珍祥 | 2004 | 中华内科杂志2004，43，5： | 9 |
| 17 | ERK在慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用显示文摘目的:观察细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞的表达,以探讨ERK信号通路在气道平滑肌增殖中的作用。方法:病理图像分析慢性哮喘大鼠气道重塑,免疫组化法检测ERK和PC-NA在肺内表达,激光共聚焦显微镜分析ERK1/2、磷酸化ERK1/2和PCNA在气道平滑肌的共表达,免疫印迹和原位杂交检测气道平滑肌中ERK和PCNA蛋白以及mRNA的表达。结果:慢性哮喘大鼠有气道平滑肌层增厚,出现结构重塑。ERK和PCNA在肺内表达增强,同时在气道平滑肌上有ERK和PCNA蛋白与mRNA表达增加。结论:ERK可能是介导慢性哮喘气道重建中平滑肌增殖的重要信号通路之一。 | 白晶 刘先胜 徐永健 谢敏 倪望 陈士新 | 2008 | 中国病理生理杂志2008，24，3： | 9 |
| 18 | 术前肺功能评估在胸外科手术中的意义显示文摘目的通过探讨肺切除手术患者术前肺功能状况来评估手术的安全性,预测术后并发症的发生率并寻找可能的危险因素。方法102例肺部手术患者按手术方式不同分为三组:全肺手术组(13例),肺叶手术组(81例),肺段+右中肺手术组(8例)。前瞻性观察其术后并发症发生率、病死率、机械通气例数、纤维支气管镜(纤支镜)吸痰例数、术后住院天数及术后5、10d肺通气功能,并统计患者术前1周内肺通气功能[肺活量(VC)、用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气量占用力肺活量的比值(FEV1/FVC)、最大通气量(MVV)]、吸烟史、既往史、年龄等。结果(1)三组在术后并发症发生率、有无机械通气、术后住院天数和术后10dMW组间差异均有统计学意义(P均〈0.05)。(2)全肺手术组中发现术前预计术后FEV1≤1L患者,并发症发生率为100%。而肺叶手术组中,年龄≥60岁且术前FEV1/FVC≤70%患者,较其他肺叶手术患者并发症明显增加,并发症发生率为86.7%。结论全肺手术患者较其他手术患者更易出现术后并发症,住院天数也相应延长。行全肺手术者当术前预计术后FEV,≤1L时及肺叶(除外右中叶)手术者中年龄≥60岁且术前FEV1/FVC≤70%时,术后并发症明显增加,手术均需慎重。 | 赵建平 陈俊 倪望 陈仕新 潘铁成 汤应雄 付向宁 张珍祥 | 2007 | 中国医师进修杂志(外科版)2007，30，3： | 9 |
| 19 | 脉冲强迫振荡测定值在睡眠呼吸暂停综合征中的变化及其临床意义显示文摘目的 观察脉冲强迫振荡 (IOS)测定值在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征 (OSAS)患者中的变化 ,并探讨其临床意义。方法 用IOS技术检测 3 6例OSAS患者、14例慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者和 12名正常人呼吸阻抗 ,同时进行睡眠监测。结果 OSAS患者R2 0 明显高于COPD组和对照组 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1) ,R5~R2 0 虽低于COPD组 ,但仍高于对照组 ,差异亦有非常显著性 (P <0 .0 1)。将OSAS患者睡眠监测指标与IOS测定指标相关性进行研究 ,发现呼吸暂停低通气指数 (AHI)与R5和R2 0 呈正相关 ,相关系数 (r)分别为 0 .66和 0 .86(P <0 .0 1) ;最低SO2 与R5、R5~R2 0 呈负相关 ,r分别为 -0 .66和 -0 .79(P <0 .0 1) ;平均SO2 与R5、R5~R2 0 呈负相关 ,r分别为 -0 .81和 -0 .69(P <0 .0 1)。结论 IOS技术可作为用于检测OSAS患者上气道阻力的一种方法 ,并且有助于其病理机制的探讨。 | 刘辉国 倪望 赵建平 熊盛道 徐永健 张珍祥 | 2002 | 临床内科杂志2002，19，4： | 8 |
| 20 | Effect of passive sensitization by serum from allergic asthmatic patients on the activity and expression of voltage-dependent delayed rectifier potassium channel in human bronchial smooth muscle cells显示文摘Background Potassium (K +) channels are important in regulating cell membrane potential and excitability. Although bronchial myocytes from asthmatic rats show a significant reduction in voltage-dependent delayed rectifier potassium channel (Kv) current density and higher excitability, the activity and expression of Kv in human bronchial smooth muscle cells (HBSMCs) have never been studied. The ob jective of this study was to investigate the effect of passive sensitization by asthmatic serum on the activity of Kv and the expression of Kv isoform Kv1.5 in HBSMCs.Methods HBSMCs were randomly divided into two groups: control group (containing 10% serum from nonatopic individuals) and sensitized group (containing 10% asthmatic serum), then cultured for 24 hours. Whole-cell patch clamp, immunofluorescence staining, reverse transcription-polymerase chain reaction and Western blot techniques were used to study the effect of passive sensitization on the activity of Kv and the expression of Kv1.5 in HBSMCs.Results The membrane potential in passively sensitized HBSMCs was significantly depolarized to -(26.7±5.2) mV compared with -(41.3±6.4) mV in the cont rol group (P<0.01). Passive sensitization caused a significant inhibition of Kv currents in HBSMCs, resulting in a downward shift in the current-voltage (Ⅰ-Ⅴ) relationship curve. At +50mV, the peak Kv current density of passively sensitized HBSMCs was significantly decreased from (54.6±8.7) picoamperes per picofarad ( pA/pF) to (32.1±7.1) pA/pF (P<0.01). The expression level of Kv1.5 mRNA in passively sensitized HBSMCs was significantly lower than that in the control group (0.76±0.07 vs 1.04±0.13, P<0.05). The expression of Kv1.5 protein of passively sensitized HBSMCs was also significantly reduced compared to that from the control group (984±168 vs 2200±380, P<0.05).Conclusions The activity and expression of Kv were all decreased in HBSMCs passively sensitized by asthmatic serum compared with nonsensitized cells. These changes might be involved in the mechanisms of formation and development of asthma. | 赵丽敏 徐永健 张珍祥 倪望 陈士新 | 2004 | Chinese Medical Journal2004，，11： | 8 |
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