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| 1 | 水稻幼苗SAGE文库的构建和测序显示文摘基因表达系列分析(Serial analysis of gene expression,SAGE)是功能基因组学研究中的一项功能强大的工具.对水稻幼苗SAGE文库的构建进行了探索试验,其主要操作步骤为:以磁珠法提取PolyA mRNA用于合成双链cDNA,再经过一系列的酶切、加接头序列、连接、PCR扩增,获得到26-bp的水稻双标签体,再将26-bp Ditag连接成标签链接体,并将其克隆进pZero-1载体中用于测序.DNA测序结果证明获得了水稻的SAGE标签.试验的各个中间步骤的结果均经过PCR验证. | 孙亮先 | 2006 | 泉州师范学院学报2006，24，2： | 0 |
| 2 | 蜜蜂遗传标记研究进展显示文摘 | 孙亮先 | 2004 | 山东畜牧兽医2004，25，2： | 0 |
| 3 | 发育中水稻种子淀粉合成分子机制的研究显示文摘对GenBank中9215条来源于水稻(OryzasativaL.ssp.Indica)胚乳cDNA文库的3'EST进行了分析,获得20个淀粉合成相关基因的表达丰度信息.研究发现淀粉合成的5个关键酶的编码基因,ADPG焦磷酸化酶基因、ADP-葡萄糖淀粉合成酶、淀粉分支酶、淀粉去分支酶、蜡质基因的表达丰度极高,表明该时期水稻胚乳内淀粉合成反应非常强烈.研究发现在淀粉合成途径中存在功能相关的基因协同表达的现象.文章结合所获得的基因表达信息对淀粉合成的分子机理进行了探讨. | 孙亮先 | 2004 | 泉州师范学院学报2004，22，2： | 0 |
| 4 | 四个意大利蜜蜂品系RAPD遗传标记的分析显示文摘前期研究中筛选到可在平湖浆蜂 (Ep)、美意 (Em)、澳意 (Eo)和苏意 (Es)中扩增出多态性条带的RAPD -PCR随机引物W18(5’ -CGGACGGCGG - 3’)和W2 3(5’ -GTACCGCCCG - 3’)。本文以群体遗传学方法对这 4个意蜂品系的RAPD多态性扩增条带进行分析。分析结果表明 ,在引物W18扩增出的多态性条带中 ,2 35 2bp和 36 4bp条带仅在美意中检测到 ,其基因频率分别为 0 .0 5 5 9和 0 .0 4 2 0 ;6 32bp条带在平湖浆蜂中出现的基因频率 (0 .90 86 )远高于美意 (0 .0 36 3)、澳意 (0 .0 190 )和苏意 (0 .0 0 0 0 ) ;2 0 92bp条带在美意与澳意中出现的基因频率分别为 0 .0 2 2 3和 0 .0 6 6 7,而在苏意和平湖浆蜂未检测到该条带。在W2 3引物扩增条带中 ,仅在澳意中检测到 6 5 1bp条带 ,其基因频率为 0 .0 348。RAPD多态性扩增条带基因频率的聚类分析结果表明 ,平湖浆蜂与苏意的亲缘关系最近 ,其遗传相关系数为 0 .982 0 ;平湖浆蜂、苏意与美意的遗传系数均为 0 .970 0 ,而与澳意的遗传相关系数均为 0 .96 90 ,表明这两个地方蜂种与美意的亲缘关系略高于澳意。美意与澳意的亲缘关系相对较远 ,其遗传相关系数为 0 .96 90。本研究结果在鉴定意蜂地理亚种下的各品系中具有实际应用价值。 | 孙亮先 胥保华 | 2004 | 山东农业大学学报(自然科学版)2004，35，3： | 4 |
| 5 | EST技术在植物基因克隆和基因表达谱研究中的应用显示文摘表达序列标签是cDNA的部分序列 ,是通过对cDNA文库进行大规模一次性测序而获得 .对于植物研究而言 ,该技术已成为一种高效、经济的克隆重要植物基因的工具 .而且 ,通过分析来自特定组织的EST库可以定量地估计该组织中各类基因的表达丰度 .这种组织基因表达谱可用于阐明植物的代谢调控网络或植物对生物、非生物胁迫反应的信号转导途径 .文章以几个典型的实例阐释如何利用EST技术来克隆重要的植物经济性状基因及以此技术进行表达谱研究 . | 孙亮先 袁建军 | 2003 | 泉州师范学院学报2003，21，4： | 2 |
| 6 | 羽速性状对番鸭生活力和繁殖性能的影响显示文摘快、慢羽番鸭育雏率和产蛋期存活率差异不显著 (p>0 .0 5) ,但慢羽公番鸭育成率 (1 0 0 % )显著 (p<0 .0 5)高于快羽公番鸭 (83.33% ) .快慢羽母番鸭性成熟日龄分别为1 67和 1 64日 ;快、慢羽组 1 2产蛋周平均日产蛋率分别为 33.2 3%和 46.93% ,二者差异显著 (p<0 .0 5) ;两种羽型番鸭种蛋受精率、孵化率均无显著性差异 (p>0 .0 5) | 孙亮先 黄周英 | 2000 | 泉州师范学院学报2000，18，4： | 0 |
| 7 | 家禽羽速伴性基因的研究进展显示文摘本文介绍家禽羽速伴性基因(K、k+ ) 的研究进展;分述了鸡、鸭羽速伴性基因对生产性能的影响,并进行雏禽自别雌雄的研究和应用, 阐明该领域今后研究方向。 | 王光瑛 陈瑞清 孙亮先 | 1999 | 福建畜牧兽医1999，21，5： | 5 |
| 8 | 蜜蜂精子介导GFP基因转移研究显示文摘将pGFP-2质粒线性化,利用精子介导,通过人工授精技术导入意大利蜜蜂处女王,然后将授精王介绍到无王群繁殖后代。结果:试验群产生了一群绿色荧光阳性蜜蜂;对阳性蜂群后代分析发现,1-2日龄幼虫能检测到荧光,提取蜜蜂DNA进行PCR扩增得到预想的片断,通过RT-PC分析,从转录水平上证实转导的外源基因获得表达。结论:以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因,通过精子介导法能够生产克隆转基因蜜蜂。 | 郭冬生 张巧利 孙亮先 | 2007 | 江西农业大学学报2007，29，1： | 4 |
| 9 | cDNA微阵列检测萌发期水稻重要代谢基因表达模式显示文摘使用含 2 2 0 0条水稻表达序列标签的 c DNA微阵列检测了萌发期水稻胚芽、胚轴 (含糊粉层和盾片 )、胚根的基因表达模式 ,得到 10 32个有效的基因表达数据。其中 ,在胚芽、胚根、胚轴中特异表达的基因数分别为 5 5、10 6和 36个。以胚轴为参比 ,70个基因在胚芽、胚根中均表达上调 ,包括延伸因子 1和多个核糖体蛋白基因 ,这些基因与顶端生长点的细胞分化和生长有关。胚轴特异表达的基因有 36个 ,大部分参与胚乳贮藏物质的代谢 ,如聚泛蛋白基因。 | 孙亮先 董海涛 李德葆 | 2002 | 中国水稻科学2002，16，4： | 3 |
| 10 | 蜂王浆介导外源基因转移的初步研究显示文摘采用DNA延滞实验研究蜂王浆与DNA的结合能力,然后通过蜂群哺育和人工培育两种方式,对1日龄工蜂幼虫进行短期饲喂,初步研究蜂王浆介导绿色荧光蛋白基因的方法和转移情况。结果表明:在蜂群环境下,蜂王浆中的外源DNA短期内不会完全被分解;但用蜂王浆作媒介并未实现蜜蜂基因转染,蜜蜂能否通过蜂王浆介导实现基因转移,还需进一步探讨。 | 郭冬生 孙亮先 张巧利 | 2008 | 江西农业大学学报2008，30，4： | 2 |
| 11 | 电穿孔作用将外源基因导入中华蜜蜂卵的研究显示文摘将中华蜜蜂卵与带有绿色荧光蛋白基因的质粒DNA混合,经电穿孔作用后,人工孵化蜜蜂卵,并对孵化的幼虫进行检测。结果筛选出一组较理想的中华蜜蜂卵电穿孔参数(750V.cm-1,100μs,1);通过荧光检测,电击卵孵化的幼虫体内可以表达EGFP基因,阳性表达率最高可达1.05%,且外源DNA转染早期卵的效率显著高于晚期卵。结果表明电穿孔作用成功地将外源基因引入中华蜜蜂卵内,质粒DNA转染中华蜜蜂卵的效率与卵的生长时期有关。 | 郭冬生 曾志将 孙亮先 | 2009 | 安徽农业大学学报2009，36，2： | 2 |
| 12 | 不同日粮对快慢羽母番鸭的影响显示文摘不同日粮条件下快慢羽母番鸭的生长速度不同;快慢羽母番鸭性成熟日龄分别为167日龄和164日龄;快、慢羽组12产蛋周平均日产蛋率分别为33.23%和46.93%,二者差异显著(P<0.05)。 | 谢进金 孙亮先 | 2001 | 四川畜牧兽医2001，28，2： | 2 |
| 13 | 龙竹和麻竹FT同源序列的扩增与序列分析显示文摘根据拟南芥Flowering Locus T(FT)基因和水稻Heading date 3a(Hd3a)基因的序列设计引物,通过PCR扩增的方法分别从麻竹和龙竹基因组DNA中各得到长为334bp的DNA片段.经BLAST检索、基因结构分析和编码蛋白功能域预测等分析,初步确定所得DNA片段可能是麻竹和龙竹中的FT同源基因的部分序列. | 桑庆亮 黄周英 孙亮先 | 2012 | 泉州师范学院学报2012，30，2： | 2 |
| 14 | 城镇养蜂:一个能提升都市生活质量的潜在产业显示文摘城镇养蜂因能提升都市居民生活质量而在发达国家流行。从关节炎防治、城市生态、食品与健康、城镇养蜂技术要点等方面阐述了在我国推广城镇化养蜂的意义,并提出城镇养蜂可发展为一个新产业的设想。 | 张以宏 葛清秀 孙亮先 | 2014 | 中国蜂业2014，65，13： | 1 |
| 15 | 意大利蜜蜂4品系形态标记比较分析显示文摘利用几个蜜蜂形态标记对意大利蜜蜂种 4品系进行比较研究。结果表明意大利蜜蜂 4品系成年工蜂吻长及右翅前翅面积上均存在显著差异 (P <0 0 5 ) ,其中澳意工蜂吻最长 ( EO=6 74 7± 0 0 0 11mm) ,本意工蜂吻最短 ( Es=6 5 5 6± 0 0 0 10mm) ;平湖浆蜂工蜂的右翅前翅面积最大( EP=15 84 6 7± 0 0 0 0 9mm2 ) ,本意工蜂的右翅前翅面积最小 ( Es=14 7134± 0 0 0 0 2mm2 )。意大利蜜蜂 4品系初生工蜂头重之间不存在显著差异 (P >0 0 5 ) ,这一结果与 4品系对应的生产性能结果不同 ,说明蜜蜂群体中工蜂个体形态标记可能不完全反映该群体生产性能。 | 吉挺 孙亮先 周斌 陈国宏 | 2003 | 蜜蜂杂志2003，23，10： | 1 |
| 16 | 利用egfp基因对中华蜜蜂卵进行显微注射的初步研究显示文摘利用显微注射法对中华蜜蜂0~12h卵注射绿色荧光蛋白基因,注射后的卵采取人工繁殖和蜂群自然培养两种方式饲养,结果蜜蜂卵注射后存活率低,绿色荧光蛋白基因表达不理想;实验探讨了中华蜜蜂卵显微注射转基因技术,为今后蜜蜂显微注射转基因研究和改进提供了一定参考价值。 | 郭冬生 孙亮先 陈碧强 | 2008 | 中国蜂业2008，59，7： | 1 |
| 17 | 紫色糯质玉米杂交种烟紫糯3号的选育显示文摘 | 于维忠 周先学 孙亮 | 2005 | 山东农业科学2005，37，3： | 0 |
| 18 | 西文蜜蜂LOC724521基因座的cDNA序列克隆及TSS的分析显示文摘5’LongSAGE标签得自于全长mRNA分子的5’末端的前19 nt.该研究利用定位在西方蜜蜂基因组中的一个预测基因座LOC724521的2条5’LongSAGE标签序列作为5’引物,通过RT-PCR克隆了该预测基因座的2条长335 bp和337 bp的cDNA序列(GenBank登录号:GU358205,GU358204).此cDNA编码一条长88个氨基酸残基的多肽.用所克隆的cDNA序列对基因座LOC724521进行功能注释发现,该基因含有3个外显子和2个'GT-AG'型内含子.5’LongSAGE标签序列的基因组定位结果显示:基因座LOC724521在雄蜂的头部中表达丰度很高,RNA PolⅡ可从5个转录起始位点(TSS)上以不同效率起始转录,该基因的59%和31%的转录是从2个优势TSS上起始.有趣的是,有一条5’LongSAGE标签序列被定位在内含子区,暗示该基因存在外显子的可变性选择现象.该研究结果不仅在转录水平上证实了软件预测的基因座LOC724521确实存在,同时揭示了该基因存在可变性转录起始位点和可变性外显子选择等转录调控机制. | 孙亮先 黄周英 郑华军 | 2010 | 泉州师范学院学报2010，28，4： | 0 |
| 19 | 中华蜜蜂精子介导egfp基因转移显示文摘中华蜜蜂Apis cerana cerana是一种真社会性昆虫,也是我国重要的经济昆虫。本实验目的是为了检测精子是否可以作为载体将外源egfp基因介导转入中华蜜蜂。首先将雄蜂精子与线性化的质粒DNA共浴,然后通过人工授精技术将精子导入处女王,再对实验蜂群后代进行分析。结果显示EGFP蛋白在一群实验组蜂的1~2日龄小幼虫中表达较强,能检测到0.01%~0.02%荧光阳性小幼虫个体;通过PCR和RT—PCR技术分析,证实转入的外源egfp基因获得表达。实验结果表明精子载体法能够用于中华蜜蜂外源基因的转移和表达。 | 郭冬生 孙亮先 曾志将 张巧利 | 2007 | 昆虫学报2007，50，9： | 13 |
| 20 | 一种高质量蜜蜂核酸的快速提取方法显示文摘基因组DNA的提取是蜜蜂分子生物学研究的一项基本而重要的技术.但由于蜜蜂样品具有脂肪、蛋白、几丁质含量很高的特点,所以用常规方法无法获得较高质量的DNA.文章研究对蜜蜂基因组DNA的提取方法作了重要改进,可以从不同发育时期的蜜蜂中快速、大量提取高质量的蜜蜂基因组DNA.此外,对蜜蜂总RNA的提取方法也进行了探索. | 郭冬生 孙亮先 张巧利 曾志将 | 2005 | 泉州师范学院学报2005，23，4： | 9 |
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