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| 1 | 信号肽疏水性的提高促进青霉素G酰化酶分泌显示文摘设计和合成了一段具有连续 10个亮氨酸强疏水核心的信号肽 (artificialsignalpeptide ,ASP) ,由EcoRI KpnI位点融合到青霉素G酰化酶 ( penicillinGacylase ,PAC)信号肽 (wildtypesignalpeptide,WTSP)的 - 4Pro位点 ,分别构建了PAC表达质粒 :pKKpacΔSP ,pKKpacWTSP ,pKKpacASP ,pETpacWTSP ,pETpacASP。ASP与WTSP均为 2 6个氨基酸 ,两者N端为MK ,C端均为PAVA。通过酶活性的测定及Western印迹分析 ,分别在tac,T7及氧调控表达系统中研究ASP和WTSP对PAC分泌的影响。结果表明 ,与WTSP相比 ,ASP对PAC酶活水平平均提高了约 63 % ,对PAC前体的分泌能力平均提高了约 4 1% ,通过提高信号肽疏水核心疏水性有效促进了青霉素G酰化酶的分泌。 | 杨运桂 徐京宁 胡泰山 钱友存 杨胜利 龚毅 | 2000 | 生物化学与生物物理学报2000,32,2: | 19 |
| 2 | 应用原生质体融合技术定向改造林可霉素产生菌的探索显示文摘金色链霉菌Streptomyces aureofaciens(LM^r,CTC^r,产金霉素)的原生质体经U.V.照射40min灭活后,与林可链霉菌林可变种Streptomyces lincolnensis var lincolnensis(LM^r,CTC^s,产林可霉素),在42%PEG(MW6000)诱导下进行种间原生质体融合,在含金霉素50μg/ml的再生平板上直接选择融合子,融合率达9.05×10^(-5)。从大量融合体中筛选到4株产生抗菌物质不同于亲株并较稳定的菌株。对其中一株所产的抗生素作了初步鉴别,推测其结构与林可霉素相近。另一株的薄层层析R_f^(?)值与氯林可霉素相近,尽管此等产物还有待于进一步鉴别,但这一育种途径值得探讨。 | 徐京宁 米贯东 唐孝宣 | 1992 | 生物工程学报1992,8,3: | 8 |
| 3 | 免疫电化学方法测定γ干扰素显示文摘利用溴化氰把马抗人γ干扰素抗体交联在醋酸纤维微孔膜上,37℃下经与γ干扰素样品液温育反应1h后,在免疫电极上测量了抗体膜膜电位,观察到膜电位与γ干扰素浓度对数呈正比,研究了膜电位与温育反应时间关系。 | 李凡超 徐京宁 何兵 张嗣良 | 1994 | 分析化学1994,22,1: | 7 |
| 4 | 浅谈如何加强公安派出所消防监督管理工作显示文摘结合江苏省南京市鼓楼区辖区公安派出所消防监督管理工作实际,分析了公安派出所开展消防监督管理工作的必要性,以及目前派出所消防监督管理工作中存在的问题,并对加强和改进现阶段公安派出所消防监督管理工作进行了探讨。 | 徐京宁 | 2016 | 消防技术与产品信息2016,29,9: | 3 |
| 5 | 链霉菌种间融合重组子产生的抗生素的分离和化学结构的确认显示文摘从金色链霉菌和林可链霉菌的原生质体融合重组子产生的代谢物中,分离到1个抗菌组份。其薄层层析的Rf值,碳、氢、氮、氯及硫元素含量,红外吸收光谱和核磁共振谱的信号分析,证实其化学结构与半合成抗生素克林霉素同质。 | 徐京宁 潘铁英 王伟 唐孝宣 | 1996 | 中国抗生素杂志1996,21,1: | 1 |
| 6 | 磷酸盐对洁霉素产生菌的生长及生物合成洁霉素的影响显示文摘 | 谢幸珠 徐京宁 奚建云 周月宝 | 1983 | 抗生素1983,,02: | 1 |
| 7 | 磷酸盐对洁霉素产生菌的生长及生物合成洁霉素的影响显示文摘 | 谢幸珠 徐京宁 奚建云 周月宝 | 1983 | 抗生素1983,,02: | 1 |
| 8 | 固定化金霉素产生菌原生质体使林可霉素转化的研究显示文摘用固定化金霉素产生菌(金霉素链霉菌,S.aureofaciens)的原生质体,在适当量的氯离子存在时,转化林可霉素生成抗菌活力比其本体高的产物。研究了反应时间、原生质体固定化浓度、填抖比、碳源、氮源、载体厚度、摇床转速和载体琼脂浓度等因素对转化反应的影响。经32h转化培养后,反应液抗菌活力最高可提高一倍以上。 | 徐京宁 米贯东 李凡超 唐孝宣 | 1996 | 中国医药工业杂志1996,27,10: | 1 |
| 9 | 林可链霉菌与委内瑞拉链霉菌种间原生质体融合的研究显示文摘本文报道氯霉素产生菌委内瑞拉链霉菌A-186株与林可霉素产生菌林可链霉菌林可变种78-11株种间原生质体融合的结果。首先,研究了委内瑞拉链霉菌A-186的原生质体制备和再生条件,再生率可达86%。然后,采用氯霉素产生菌S.venezuelae A-186的原生质体用紫外线灭活后,与具有耐药标记的S.lincolnensis var.lincolnensis78-11原生质体融合的方法,种间融合频率达到3.2×10^(-5) 。并筛选到一株遗传稳定的重组子,经初步鉴定它能同时产生两亲株所产的两种抗生素。 | 徐京宁 唐孝宣 | 1989 | 中国抗生素杂志1989,14,3: | 1 |
| 10 | 固定化酵母细胞连续生产转化糖反应动力学的研究显示文摘利用海藻酸钠固定化面包酵母细胞,在搅拌罐和填充柱反应器内连续反应由蔗糖生产转化糖,对该过程的反应动力学研究结果表明:内、外传质阻力,转化酶活力、料液流量,搅拌速率和媒体半径对转化率有影响,本文给出了它们之间相互关系的数学表达式,本文还定义了阻力因子,动力因子及返混因子,并讨论了它们对转化效率所起的作用,给出了串联反应器操作的有关计算公式,测定了有关动力学参数,给出了料液流量控制,搅拌转速控制,媒体半径选择和最大转化率操作条件的计算方法,并在搅拌罐反应器、填充柱反应器和串联搅拌罐反应器中进行了实验和计算,从实验上验证了动力学理论研究结果。 | 李凡超 徐京宁 张嗣良 俞俊棠 | 1992 | 生物工程学报1992,8,4: | 1 |
| 11 | D-核糖发酵过程中的pH控制及对产D-核糖关键酶的影响显示文摘在枯草芽孢杆菌突变株D-756发酵生产D-核糖过程中,采用葡萄糖和葡萄糖酸钙混合发酵,葡萄糖酸作为pH调节剂,能促进菌体的生长,显著地提高D-核糖的产量。经酶活测定,发现流加葡萄糖酸能提高单位发酵液中葡萄糖酸激酶的酶活。在5 L发酵罐中,利用葡萄糖酸维持发酵pH值在7.2,培养72 h后产核糖76.8 g/L。 | 杨兆娟 徐京宁 丁庆豹 欧伶 邱蔚然 | 2005 | 华东理工大学学报(自然科学版)2005,31,6: | 0 |
| 12 | γ干扰素免疫电极的研究显示文摘用溴化氰在醋酸纤维素膜上固定了马抗人γ干扰素抗体,该抗体膜在37℃下与样品液温育反应1h后,置于一碘离子选择电极端部而构成抗体电极,另一个碘离子选择电极与空白膜组装成参比电极.测量了电极在0.1mmol KI+4.4mmol H_2O_2+0.1mol磷酸盐缓冲液pH5.0中的响应,结果表明电极电位与样品中γ干扰素浓度呈曲线关系.抗体膜可重复使用6d以上.还介绍了过氧化物酶标记的γ干扰素制备方法和电极响应线性化方法. | 李凡超 陈俊 张嗣良 徐京宁 | 1992 | 传感技术学报1992,5,4: | 0 |
| 13 | 分子伴侣GroEL对青霉素G酰化酶亚基折叠的影响显示文摘采用 Tac启动子控制表达质粒 ,在不同的宿主细胞中表达了青霉素 G酰化酶 ( PAC)。检测这些菌株所表达的 PAC活性 ,分析细胞内分子伴侣 Gro EL含量、PAC翻译后加工为 α、β亚基的状况 ,以及它们之间的关系。结果表明 :质粒 p KK- SP在不同宿主中表达时 ,翻译后加工状况有明显差异 ,单位质量细胞所表达的 PAC活性与翻译后加工效率相关 ,且与细胞内分子伴侣 Gro EL在菌体总蛋白中含量正相关。同时也阐明了亚基的折叠成为翻译后加工过程的限制步骤 ,细胞内分子伴侣 Gro EL有助于 | 徐京宁 杨运桂 龚毅 杨胜利 俞俊棠 | 2002 | 华东理工大学学报(自然科学版)2002,28,2: | 0 |
| 14 | 青霉素G酰化酶调节基因定点诱变的研究显示文摘构建了大肠杆菌中青霉素 G酰化酶 ( PAC)的调节基因 ( pac R)翻译起始密码定点突变株。对突变后 PAC的表达调控特征进行了研究 ,结果表明 :突变株的 pac基因表达后能正常加工成2 4 ku、65 ku的 α亚基和 β亚基 ;突变后 ,虽然 PAC表达仍需要苯乙酸诱导 ,但是 ,可诱导性提高 ,形成低组成型表达 ,无葡萄糖及分解代谢物阻遏效应 ,因而 pac R对 PAC表达水平存在着影响 ,pac R基因是葡萄糖以及它的分解代谢物在分子水平上影响 PAC表达的另一作用因素。采用突变株进行发酵生产时 ,PAC产量较亲株提高 3倍 ,而且可以采用葡萄糖作为碳源 ,有利于改善 | 徐京宁 杨运桂 龚毅 杨胜利 俞俊棠 | 2002 | 华东理工大学学报(自然科学版)2002,28,3: | 0 |
| 15 | 固定化金霉素产生菌原生质体转化林可霉素反应模型的研究显示文摘建立了固定化金霉素产生菌金色链霉菌(Streptomyces aurofaciens)原生质体转化林可霉素反应动力学模型并模拟计算了反应过程,模型计算与实验结果有好的一致性。讨论了各反应参数对转化反应的影响,给出了转化率与反应时间的关系式和最大转化率计算式,还对转化反应动力学模型进一步应用进行了讨论。 | 徐京宁 李凡超 唐孝宣 俞俊棠 | 1996 | 生物工程学报1996,12,3: | 0 |
| 16 | 大肠杆菌中青霉素G酰化酶成熟的限制性因素显示文摘为了研究大肠杆菌中青霉素G酰化酶 (PenicillinGacylase ,PAC)成熟的限制性步骤 ,分别构建了PAC表达质粒pKKpacSP ,pETpacSP ,并将它们在大肠杆菌宿主中表达。通过酶活性的测定及Westernblotting分析 ,分别在PAC自身表达系统 ,Tac ,T7及氧调控表达系统中 ,研究PAC前体蛋白加工成α亚基、β亚基的效率及亚基折叠组装形成活性酶的能力。结果表明 :PAC成熟过程中的限制性步骤因宿主 载体系统而异 ;PAC本身表达系统中 ,前体肽加工成α亚基、β亚基的效率为 5 7 2 % ,亚基组装能力为 0 72 ;Tac启动子表达调控系统中α亚基的折叠和稳定成为限制性步骤 ;T7及氧调控表达系统中 ,PAC前体肽加工成α亚基、β亚基的效率达 90 %左右 ,亚基组装成活性酶的能力分别为 1 82 ,2 ;低氧调控系统表达PAC时 ,成熟的效率最高 ,PAC表达的单位重量活性提高 | 徐京宁 杨运桂 龚毅 杨胜利 俞俊棠 | 2001 | 生物工程学报2001,17,5: | 0 |
| 17 | 动力电池主动均衡离线设备的设计显示文摘针对新能源汽车动力电池出现的容量、电压不一致性导致的续航里程缩短和充电频繁问题,设计一种基于主动均衡控制的离线维护设备,采用双向直流-直流(DC-DC)变换器作为均衡模块的核心,以开路电压(OCV)作为均衡控制变量,均衡电流可根据压差阈值自动可调,实现单体电池之间的能量转移。离线均衡数据显示,该设备可以将均衡压差控制在50 mV以内,均衡电流可提高至20 A,有效降低了单体电池间的不一致性,提高了均衡效率。 | 刘琼琼 费孝涛 施海凤 史品佳 徐京宁 | 2023 | 汽车实用技术2023,48,1: | 0 |
| 18 | 如何利用平台推动效应,提升消防工作创新发展显示文摘以盐城市消防工作为标本,剖析总结了制约消防事业发展的瓶颈问题,以期全面准确地把握消防工作发展趋势,找寻突破瓶颈问题的思路和方法,推动消防工作创新发展,为经济社会发展和人民安居乐业创造良好的环境。 | 徐京宁 | 2015 | 消防技术与产品信息2015,28,8: | 0 |
| 19 | 干扰素基因工程菌产物表达数学模型的研究显示文摘根据阻遏蛋白,辅阻遏因子与启动基因之间的相互作用,建立了采用色氨酸启动子的基因工程重组微生物的产物表达数学模型。提出了mRNA最大转录速率常数和产物表达速率常数与比生长速率呈线性关系的假设,用干扰素基因工程菌培养过程中的实验数据估计了mRNA转录速率常数,干扰素表达速率常数和干扰素降解速率常数。推导出了发酵过程中干扰素表达量和细胞内干扰素比活计算公式。运用这些公式可以通过检测色氨酸浓度和细胞比生长速率来计算预测干扰素表达量。 | 徐京宁 李凡超 王二力 唐孝宣 俞俊棠 刘新垣 | 1997 | 生物工程学报1997,13,1: | 0 |
| 20 | 跨境电商APP用户使用意愿及满意度影响因素分析显示文摘综合运用技术接受模型和思辨可能模型,以有关APP质量的感知有用、感知易用、感知风险和APP互动性为中枢路径,有关APP信任程度的APP声望、APP推荐程度为边缘路径,构建跨境电商APP用户使用意愿及满意度“双路径”模型,对采集的302份调查数据进行实证分析,探究跨境电商APP用户使用意愿和满意度的影响因素。研究结果表明,感知有用性、感知易用性、APP互动性、APP声望、APP推荐程度、APP质量与APP信任程度均对用户使用意愿和满意度产生显著正向影响,其中APP信任程度的影响最大;感知风险性对使用意愿及满意度存在负向影响。跨境电商企业可以通过增强APP的互动性、感知易用性、声望和安全性提高用户使用意愿和满意度。 | 刘芸 姜红波 徐京宁 | 2021 | 厦门理工学院学报2021,29,2: | 0 |