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| 1 | 应用多聚酶链式反应(PCR)技术检测和定量分析柑桔黄龙病病原显示文摘应用多聚酶链式反应(PCR)技术对柑桔黄龙病病原进行检测和定量分析。研究结果表明:PCR技术能准确、快速地检测出田间和温室内罹病的柑桔、长春花以及带菌柑桔木虱样本中的柑桔黄龙病病原(BLO),而健康植株和柑桔木虱样本则呈阴性反应。采用的PCR引物(Primers)是根据柑桔黄龙病病原亚洲株系的DNA序列(In-2.6,基因库号码:M9491)设计的。应用竞争性定量多聚酶链式反应(Q-PCR)方法能测定病原在不同样品中的含量。该技术关键在于:病原DNA和浓度系列稀释后的竞争物DNA,在同一试管中进行DNA扩增反应时,共用相同的引物。由于彼此互相竞争反应引物的结果,病原的PCR产物和竞争物的PCR产物在数量上呈反向线性相关。因竞争物的浓度为已知,便可从线性关系中推算出病原的含量。 | 田亚南 柯穗 柯冲 | 1996 | 植物病理学报1996，26，3： | 92 |
| 2 | 中国柑橘黄龙病研究30年显示文摘综述了我国自1978年以来有关柑橘黄龙病的研究概况,包括柑橘黄龙病在我国的分布与危害、黄龙病寄主、病原研究、病害诊断与检测、传播途径与病害流行、防控技术等。 | 范国成 刘波 吴如健 李韬 蔡子坚 柯冲 | 2009 | 福建农业学报2009，24，2： | 112 |
| 3 | 应用Nested PCR技术检测柑桔木虱及其寄主九里香的柑桔黄龙病带菌率显示文摘应用PCR及Nested PCR技术检测柑桔木虱及其寄主九里香的结果表明:PCR只可检测最低2头带菌木虱,Nested PCR可检测到单个带菌木虱。100头带菌木虱中,单虫检出率为96%。检测田间重、中等、轻病的柑桔园内的木虱,其带菌率依次为87%、53%和21%。在病芦柑上饲菌不同天数的木虱均能检测出带菌,其饲菌时间最短为1d。城市九里香叶片及在其叶上取食的木虱单虫,均能用Nested PCR检测出病原。饲菌木虱接种九里香及芦柑健苗,在植株尚未表现症状时,常规PCR难检测出病原,但用Nested PCR则能检测到病原,说明九里香不仅是木虱的寄主,而且是黄龙病病原的隐症寄主。 | 李韬 柯冲 | 2002 | 植物保护学报2002，29，1： | 70 |
| 4 | 柑桔木虱生物学特性及防治研究显示文摘柑桔木虱雌成虫必须选择寄主嫩梢产卵的特性与年发生代数关系密切。其嗜好寄生九里香,九里香年抽梢次数比柑桔多,在九里香上1年可能发生9—11代,在柑桔上可能发生6—7代(福州地区)。春夏秋季(旬严均气温分别为19.6℃、28℃和24℃)最长与平均成虫寿命及世代历期分别为98天、40天和52—59天;59天、32天和18—22天;65天、30天和25—30天。越冬成虫寿命长达260天。若虫和成虫的致死“温/时”分别为—3℃/小时和—10℃/小时。40%氧化乐果的800—1000倍液对木虱有特效,专性杀螨剂托尔克和普特丹对木虱无兼治作用。 | 许长藩 夏雨华 柯冲 | 1994 | 植物保护学报1994，21，1： | 38 |
| 5 | 应用电镜与PCR技术检测琯溪蜜柚黄龙病病原显示文摘福建省产区发生琯溪蜜柚叶片斑驳、果实变小及全株矮化的病树是柑桔黄龙病引起的。采用电镜技术与 PCR技术研究 ,证明其病原 BL O在形态、大小与构造上和柑桔黄龙病病原 (BL O)相同 ,其病原 DNA、PCR扩增及 Southern Blot分子杂交的结果 ,证明它与柑桔黄龙病病原 PCR的产物具有很高的同源性。本病具有传染性 ,能通过病梢嫁接传染给琯溪蜜柚的健苗。 | 田亚南 柯穗 李韬 徐平东 柯冲 | 2000 | 植物病理学报2000，30，1： | 27 |
| 6 | 柑桔黄龙病诊断法的研究进展显示文摘研究柑桔黄龙病的困难,在于它的病原无法人工培养。因此,长期以来对黄龙病的诊断,主要依据典型的黄梢和叶片斑驳症状。在柑桔园管理不良,缺乏营养或其它病虫混合为害时,便难依据症状作出正确的诊断。这是造成对黄龙病认识上种种混淆的主要原因。70年代应用电镜观察到黄龙病病原(BLO)之后,电镜便成为诊断黄龙病的重要手段。但因病原在病树体内的浓度较低,分布又不均匀,致电镜的检出率偏低。80年代,应用兔丝子将黄龙病BLO转到长春花上增殖、提纯,作为抗原,制备了多抗和单抗的血清,由于多抗血清的效价很低和单抗血清的专化性太狭,均难用于诊断。最近,在病原DNA序列测定的基础上,合成了引物P1及P2,并在引物P1及P2之间合成另一段DNA片段P3作为探针。使PCR(多聚酶链式反应)及Southern杂交技术可能用于黄龙病的诊断。研究结果证明PCR技术比其他方法具有更大优点,能快速而准确地检测出病原;而Q-PCR(竞争性定量多聚酶链式反应)方法则能测定病原在不同样品中的含量,进行定量分析。 | 田亚南 柯穗 柯冲 | 1998 | 福建农业学报1998，13，1： | 26 |
| 7 | 福建西番莲病毒病的发生及其病原黄瓜花叶病毒亚组鉴定显示文摘1988~1995年对福建西番莲病毒病的发生为害进行调查,发现在西番莲栽培区病毒病普遍发生,发病率通常在30%~40%,严重的达90%以上。田间症状主要表现为叶片环斑、皱缩、花叶、环斑花叶,死顶和果实木质化等。从田间病株采集40份样本,经电镜观察和采用A蛋白夹心ELISA(PAS-ELISA),用西番莲木质化病毒(PWV)、西番莲黄花叶病毒(PFYMV)、紫果西番莲花叶病毒(GMV)、烟草花叶病毒(TMV)及黄瓜花叶病毒(CMV)的抗血清进行测定,其中36个样本检测出CMV,表明福建西番莲病毒病的主要病原为CMV。与此同时,对西番莲上CMV进行亚组鉴定,采用鉴别寄主和单、多克隆抗体双夹心ELISA(DAS-ELISA)对36个CMV阳性样本进行测定,结果35个属CMV亚组Ⅰ,1个属CMV亚组Ⅱ,表明田间以CMV亚组Ⅰ分离物占绝对优势。 | 徐平东 李梅 柯冲 | 1999 | 植物保护学报1999，26，1： | 22 |
| 8 | 国内外柑桔黄龙病研究与防治概况显示文摘 | 柯冲 | 1996 | 广西柑桔1996，16，1： | 19 |
| 9 | 茎尖嫁接脱除柑桔主要病原的研究显示文摘应用茎尖嫁接及热处理与茎尖嫁接相结合的技术,对我国柑桔的主要病毒类病害(黄龙病、衰退病、裂皮病、碎叶病)进行脱除病原研究。结果表明:黄龙病、衰退病、裂皮病平均脱除率分别为100% 、80.6% 和54.1% 。单用茎尖嫁接对碎叶病脱除无效,但用热处理与茎尖嫁接相结合的方法进行脱除,可以收到理想效果。同时,研究了嫁接前切口处加激素、茎尖大小、适宜砧木苗龄、砧木带与不带子叶、再嫁接等对提高茎尖嫁接成活率的影响。 | 宋瑞琳 吴如健 柯冲 | 1999 | 植物病理学报1999，29，3： | 18 |
| 10 | 柑桔黄龙病的病原在木虱体内循回期的研究显示文摘本研究应用生物测定和电镜检验的方法,探讨黄龙病病原在其介体昆虫(柑桔木虱)体内的循回期。前者的结果表明,其循回期长短不一,短的为3天或少于3天,长的达26—27天。木虱成虫能终身携带病原。获“毒”饲育若虫新羽化的成虫也能传病。其中,羽化后1天和2—5天便能传病的单虫分别占供试虫(组)数的3%和5%。电镜检验结果,在获“毒”饲育后3天的成虫唾液腺细胞内能观察到病原体,有力支持了采用生物测定循回期的可靠性。根据由获“毒”饲育若虫新羽化的成虫就能传病的新认识,建议治虫防病的重点应放在治卵和若虫上。 | 许长藩 夏雨华 李开本 柯冲 | 1990 | 植物病理学报1990，20，1： | 14 |
| 11 | 柑桔黄龙病病原物提纯方法和血清学的初步研究显示文摘从感染柑桔黄龙病的长春花中,用0.1mol/L MgCl_2—0.5mol/L甘露醇-0.6mol/L甘氨酸的混合溶液作黄龙病病原物(YSO yellow sbootO rgancism)分离溶液(pH7.4),然后用纤维素酶酶解法和差速离心相结合的提纯程序,反复试验结果表明该提纯方法重复性稳定,黄龙病病原物(YSO)的提纯产量较高,完整性较好,内外结构清晰。用提纯液备制小鼠腹水抗体,得到微量沉淀反应效价为1:640,环状界凝集反应效性为1:8,免疫电镜效价1:320,琼脂双扩散反应阴性,对照为阴性反应,从而认为YSO具有特异抗原性。 | 柯穗 唐伟文 高乔婉 范怀忠 柯冲 | 1989 | 华南农业大学学报1989，10，1： | 14 |
| 12 | 柑桔黄龙病治理试验及综合防治措施显示文摘简述了柑桔黄龙病在我国的分布及毁灭性的危害,分析了福建省5个柑桔示范园的黄龙病发生情况,提出了综合防治措施,确保柑桔产业健康持续发展。 | 吴如健 柯冲 | 2007 | 江西农业学报2007，19，9： | 13 |
| 13 | 柑桔黄龙病综合防治研究显示文摘实施以采用无病种苗和田间防疫为中心的柑桔黄龙病综合防治技术,在新区两项措施并举,现树龄已9~14年生,仍然健康高产,每hm^2产量达32600kg,田间保持既无黄龙病株,亦无柑桔木虱。对病区仅施行“田间防疫”,也能压低田间病株率和控制田间传染,维持果园效益。 | 许长藩 林先沾 韦晓霞 柯冲 | 1998 | 植物保护学报1998，25，2： | 9 |
| 14 | 若干生态因素对柑桔木虱种群消长的影响显示文摘柑桔木虱在寄主植物上种群数量的大小依次为九里香、幼年柑桔树和成年柑桔树。夏季高温(旬均气温28℃以上、极端高温37℃以上)、秋季干旱(相对湿度70%左右)和9月以后柑桔木虱姬小蜂数量上升,对柑桔木虱的种群有抑制作用。但5月下旬到6月,当寄主树冠上有茂盛的嫩梢、旬均气温在25℃左右和相对湿度在80%上下时,田间有可能暴发柑桔木虱。这时应特别注意保梢治虫,以控制柑桔黄龙病的流行。 | 许长藩 夏雨华 柯冲 | 1992 | 福建农业学报1992，12，2： | 8 |
| 15 | 龙眼茎尖培养研究初报显示文摘利用龙眼茎尖离体培养技术进行脱毒和快繁无病(鬼帚病)苗木,是目前发展龙眼生产行之有效的方法。周丽侬等以无菌实生苗和自然环境生长的刚抽出3—5厘米长的嫩枝为外植体,通过诱导愈伤组织或诱芽来繁殖试管苗,并进行了生根试验。但外植体过大,不利于外植体消毒,不能达到脱毒的目的。我们从1988年下半年开始,探索龙眼茎尖培养和脱除龙眼鬼帚病毒的可能性。经过2年多的试验,茎尖培养直接成苗获得成功,为今后进一步利用茎尖培养进行脱毒和培育无病苗提供了可能。 | 陈菁瑛 陈景耀 柯冲 宋瑞琳 | 1991 | 福建果树1991，，1： | 8 |
| 16 | 荔枝鬼帚病的初步调查及传病试验显示文摘荔枝鬼帚病是福建荔枝上新近发现的病害,它与由病毒引起的龙眼鬼帚病状相似。近几年曾对本病进行了初步调查和传病试验,结果简报如下: (一) 病情调查:1983—1988年调查了福州、莆田、漳州、诏安等荔枝产区的成年树、老年树和实生幼苗,其平均病株率分别为1.40%(2209株成年老年树)与1.31%(2055株幼苗)。“乌叶”、“陈紫”。 | 陈景耀 柯冲 陈菁瑛 | 1992 | 植物病理学报1992，22，1： | 8 |
| 17 | 柑桔黄龙病病原形态与性质的研究显示文摘柑桔黄龙病病原体为多形态的,圆形的直径为50—500nm,杆状的大小为40—170×200—2500nm,其外界包被的平均厚度为25nm,外层为电子密度浓的暗色层,相似于细胞壁构造,厚度为7—10nm;内层为电子密度浓的暗色层,相似于细胞膜构造,厚度为3—8nm;中间层为电子密度稀的透明层,相似于周质空间,厚度为7—15nm.不论外层细胞壁或内层细胞膜,均由二层质膜构成.经木瓜蛋白酶处理后,在病原体包被的外壁与内膜间的透明层中,可以观察到一层电子密度浓的暗色层,厚度为5—8nm,十分相似于大肠杆菌的细胞壁的外膜与质膜间的肽聚糖层.因此,柑桔黄龙病病原很可能是一种革兰氏阴性的细菌.各种柑桔栽培品种筛管细胞内病原菌体的含量与它们感病性间可能有一定联系. | 柯冲 柯穗 李开本 | 1991 | 福建农业学报1991，11，2： | 7 |
| 18 | 龙眼鬼帚病的研究 Ⅱ.传病途径显示文摘龙眼鬼帚病可经种子、接穗、昆虫和菟丝子传播,花粉可能带毒,但不能通过汁液摩擦传染。1985—1989年的多次虫传试验结果证明,荔枝蝽和龙眼角颊木虱均能传播鬼帚病,这一发现为揭示本病在果园内的传播蔓延和确立治虫防病的原则提供有力的证据。种子和接穗均有不同程度带毒,对生产危害很大,不仅可直接引起实生苗和嫁接苗发病,而且还会导致本病随带毒的种子、接穗和苗木的调运而向无病区或新区传开。应实行检疫、培育和种植无病苗以及防治介体昆虫媒等措施,以防止龙眼鬼帚病的扩展蔓延。 | 陈景耀 柯冲 许长藩 宋瑞琳 陈菁瑛 | 1990 | 福建农业学报1990，10，2： | 7 |
| 19 | 枳和枳橙的茎尖培养与增殖研究显示文摘采用枳(实生树)和枳橙(嫁接树)的茎央在MS+Kt2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蛋白胨300 mg/L+GA_30.2mg/L培养基上具有良好的分化效果,可诱导大量丛生芽,分化出根、茎、叶俱全的完整植株.Kt能克服顶端优势,促进腋芽萌发,对于茎尖繁殖的最适浓度为2.0mg/L.适量的蛋白陈可促进茎尖抽枝成苗.用100ppmIBA浸泡新梢基部4—6h,有利于试管内生根.200ppm ABT生根粉和100 ppmIBA处理无根试管苗,成功地在试管外诱导生根,简化了试管苗繁殖的步骤. | 陈菁瑛 宋瑞琳 陈景耀 柯冲 | 1991 | 福建农业学报1991，11，1： | 7 |
| 20 | 对福建省柑桔健康栽培示范园的初步评估显示文摘80年代 ,福建省在 5个地区建立柑桔示范园 (曾称为无病母本园 )。按照健康栽培的观点严格实施 ,在隔离的地区建园 ,种植无病毒的苗木 ,对黄龙病、病毒病及其虫媒定期检测 ,及时铲除病株和防治虫媒 ,加强土壤、肥、水的管理措施。这样的柑桔健康栽培示范园 ,与对照柑桔园相比 ,前者的植株生长强壮而抽梢整齐 ,结果优质而高产 ,经济效益延长 5 a以上。在 1982~ 1999年间 ,对示范园的观察与调研中发现 ,黄龙病和病毒病的发生 ,完全取决于能否阻止其虫媒的侵入。 | 柯冲 | 2001 | 福建农业学报2001，16，1： | 7 |
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