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1基于恢复生态学的泰山地区“山水林田湖草”生态修复研究显示文摘目前大多地方生态修复工作往往是对各类生态系统分割式治理,不利于生态系统的整体修复。'山水林田湖草是生命共同体'理念要求各生态要素和生态系统之间的协同特征和有机联系,恢复生态学理论则关注受损生态系统的驱动因素、生态恢复的路径和干预措施,两者的结合能够为生态保护和修复提供坚实的理论和技术基础。基于恢复生态学理论,以泰山地区为研究对象,运用物能循环和转化的生态学原则对受损生态系统生态关键问题进行诊断,明确了'山水林田湖草'生命共同体中的各要素(子系统)在生态过程中的相互影响及相互制约关系,厘清了泰山地区矿山开采(地质受损)-植被破坏-水土流失-景观失调的生态受损与退化机制,在此基础上提出了'地貌重塑、植被重建、水体重构、景观重现'的生态恢复思路。并尝试构建包含生态风险、生态状况和生态恢复能力三重准则共13项指标的评价体系,以期通过生态恢复效果的评价与监测引导生态恢复目标的有效实现。叶艳妹 陈莎 边微 高世昌 丁庆龙 郝朋 2019生态学报2019,39,23:15
2环氧粉末涂层对金属基材附着力的影响因素显示文摘环氧粉末涂料具有附着力好、耐腐蚀性强、耐温性能好等优点,在金属防腐特别是重防腐领域应用非常广泛。在环氧粉末涂层的诸多性能中,涂层对基材的附着力是非常重要的一项技术指标,也是满足其他性能的基础,附着力的好坏直接影响着涂层对基材的保护寿命。本文主要从喷涂温度、基材表面处理的表面粗糙度以及粉末涂料原材料等方面讨论了环氧涂层对金属基材表面附着力的影响因素。研究表明:喷涂温度提高有利于涂层附着力的提高,表面粗糙度提高且锚纹深度相对均匀有利于涂层附着力的提高,填料以及助剂的种类对附着力具有一定的影响。郝朋 闫林森 东继莲 2020涂料工业2020,50,4:12
3CSAMT与土壤氡气测量在砂岩型铀矿勘查中的应用:以内蒙古巴音杭盖地区为例显示文摘砂岩型铀矿是我国目前铀矿勘查中最重要的类型之一,北方中新生代盆地有寻找砂岩型铀矿的广阔前景。由于其埋深大、上覆沉积泥岩层较厚,常规物化探方法在该类型铀矿的应用效果不佳。本文在二连盆地巴音杭盖地区开展了可控源音频大地电磁测量(CSAMT)和土壤氡气测量,在重点异常地段进行了CSAMT正反演和土壤氡气抽气试验,然后对推测的砂体和土壤氡气异常部位进行钻孔揭露,结果表明砂体厚度和位置与CSAMT推测较为一致,并发现了好的铀矿化线索。该方法为该地区下一步砂岩型铀矿地质勘查提供了有效的依据,对我国北方砂岩型铀矿开展地球物理工作有一定的借鉴和指示意义。王伟 黄玉龙 刘波 秦彦伟 颜小波 董续舒 郝朋 2019地质与勘探2019,55,5:12
43D打印导板改善人工全膝关节置换术中股骨旋转对线及髌骨轨迹的疗效研究显示文摘目的探讨人工全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)中采用3D打印导板辅助定位改善股骨旋转对线及髌骨轨迹的效果。方法选择2018年1月-10月60例(60膝)接受TKA治疗且符合选择标准的膝关节晚期骨关节炎患者作为研究对象,按照随机数字表法分为两组,每组30例。导板组行3D打印导板辅助下TKA,对照组行传统TKA。两组患者性别、年龄、病程、侧别以及术前髋-膝-踝角(hip-knee-ankle angle,HKA)、股骨后髁角(posterior condylar angle,PCA)、髌骨横轴-股骨通髁线角(patella transverse axis-femoral transepicondylar axis angle,PFA)、美国特种医院(HSS)评分、美国膝关节协会(AKS)评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果患者术后切口均Ⅰ期愈合,无手术相关并发症发生。两组患者均获随访,随访时间10~12个月,平均11个月。两组术后6个月HSS评分及AKS评分均较术前明显提高(P<0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后X线片复查示假体位置良好,随访期间无假体松动、下沉等发生。两组术后10个月HKA、PCA、PFA均较术前明显改善(P<0.05);两组HKA比较差异无统计学意义(t=1.031,P=0.307);导板组PCA、PFA均明显小于对照组(P<0.05)。结论3D打印导板辅助TKA不仅能矫正膝关节畸形及减轻疼痛症状,还能达到股骨旋转对线准确、恢复良好髌骨轨迹的目标。孙茂淋 杨柳 何锐 郝朋 孙加伟 2020中国修复重建外科杂志2020,34,3:12
5左甲状腺素钠片对妊娠中期亚临床甲状腺功能减退症患者维生素D及骨代谢指标的影响显示文摘目的:探讨左甲状腺素钠片对妊娠中期亚临床甲状腺功能减退症患者维生素D及骨代谢指标的影响。方法:回顾性选取2017年1月至2018年12月保定市第一中心医院收治的妊娠中期亚临床甲状腺功能减退症患者90例,根据是否应用左甲状腺素钠片分为治疗组和对照组,每组45例。治疗组患者采用左甲状腺素钠片治疗,且每隔4周行甲状腺功能复查;对照组患者未接受左甲状腺素钠片治疗,定期行甲状腺功能复查。比较两组患者治疗前后甲状腺功能,25-羟基维生素D[25-(OH)-D]、甲状旁腺素(PTH)、骨钙素(BGP)、Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)及骨密度水平的差异,观察两组患者的妊娠结局。结果:治疗8周后,治疗组患者促甲状腺激素水平较治疗前明显降低,25-(OH)-D、BGP、PⅠNP及骨密度较治疗前明显升高,差异均有统计学意义(P<0. 05);对照组患者上述指标水平较治疗前无明显变化,差异均无统计学意义(P>0. 05);治疗组患者上述指标水平明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0. 05)。治疗组患者的不良妊娠结局发生率为11. 11%(5/45),明显低于对照组的28. 89%(13/45),差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:左甲状腺素钠片能够有效降低妊娠中期亚临床甲状腺功能减退症患者促甲状腺激素水平,调节骨代谢、25-(OH)-D水平,从而改善妊娠结局。马静静 周雪 郭淑芹 李贲 宋茜茜 郝朋 李志红 2020中国医院用药评价与分析2020,20,1:11
6妊娠糖尿病伴亚临床甲减对孕妇骨密度及骨钙素、25-羟基维生素D的影响显示文摘目的:探讨妊娠糖尿病伴亚临床甲减对孕妇骨密度及骨钙素、25-羟基维生素D的影响。方法:以本院内分泌科确诊的妊娠期糖尿病伴亚临床甲减孕妇120例为观察组,同期产前检查健康孕妇120例为对照组,检测两组孕妇骨密度(BMD)及骨钙素(OC)、25-羟基维生素D3(25-OH-VD3),并观察母婴妊娠结局。结果:观察组骨量正常率(72.5%)低于对照组(85.0%),骨量减少发生率(20.0%)和OC(9.86±0.13μg/L)高于对照组(5.0%、7.21±0.15μg/L),25-OH-VD(16.09±5.34μg/L)和跟骨BMD水平(0.91±0.18 g/cm2)低于对照组(18.96±6.36μg/L、1.14±0.21g/cm2)(均P<0.05);观察组新生儿低出生体质量(20.0%)和新生儿窒息发生率(10.0%)高于对照组(5.0%、1.7%)。结论:妊娠糖尿病伴亚临床甲减可降低孕妇的骨密度,影响骨钙素、25-羟基维生素D表达水平,增加新生儿窒息、低体重风险,应引起临床重视。宋茜茜 李志红 郭淑芹 周雪 李贲 郝朋 舒民 王超 马静静 2020中国计划生育学杂志2020,28,1:10
7青光眼小梁切除术后功能性滤过泡形态与眼表改变相关性分析显示文摘目的分析青光眼小梁切除术后功能性滤过泡眼的眼表改变,以及滤过泡形态与眼表变化的相关性。方法20只眼青光眼小梁切除术后6个月以上的功能性滤过泡眼(滤过泡组)及20只正常眼(对照组)分别行眼表评估包括角膜荧光素染色、泪膜破裂时间(BUT)、Schirmer I检测及泪膜干涉成像仪检查,探究功能性滤过泡眼与正常对照眼的眼表改变及滤过泡形态与BUT、SchirmerI检测、角膜荧光素染色及泪膜干涉图像等级的关系。结果功能性滤过泡眼表现为BUT缩短(P〈0.01),角膜荧光素染色分级增加(P〈0.05),Schirmer I检测值高于对照组(P〈0.05)。滤过泡高度与BUT呈负相关(rs=-0.668,P〈0.01);而与角膜荧光素染色呈正相关(rs=0.585,P〈0.01)。结论青光眼小梁切除术后滤过泡可影响眼表的稳定性,引起轻微干眼样症状。李轩 郝朋 姜志昕 2013中国实用眼科杂志2013,31,9:9
8人工单髁关节置换术后步态及临床疗效分析显示文摘目的探讨人工单髁关节置换术(unicompartmental knee arthroplasty,UKA)后步态特点及临床疗效。方法选择2017年1月—2018年12月接受UKA治疗的30例(30膝)膝关节前内侧间室骨关节炎患者为研究对象(UKA组)。按照年龄、性别及侧别进行1∶1配对,选择接受人工全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)治疗的30例(30膝)膝关节骨关节炎患者为对照(TKA组)。两组患者除术前膝关节活动度(range of motion,ROM)比较差异有统计学意义(t=4.25,P=0.00)外,性别、年龄、病程、侧别、体质量指数及术前髋-膝-踝角(hip-knee-ankle angle,HKA)、美国西部Ontario与McMaster大学骨关节炎指数评分(WOMAC)等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。记录两组手术切口长度、术后24 h引流量、血红蛋白和白蛋白变化值;比较两组手术前后WOMAC评分、ROM及HKA。术后1年使用Vicon三维步态系统进行分析,比较两组各步态参数,并计算两组患者双下肢各步态参数的绝对对称指数(absolute symmetry index,ASI)。结果两组患者术后切口均Ⅰ期愈合,无手术相关并发症发生。UKA组手术切口长度、术后24 h引流量及血红蛋白、白蛋白变化值均明显小于TKA组(P<0.05)。患者均获完整随访,UKA组随访时间13~20个月,平均18个月;TKA组16~24个月,平均20个月。影像学复查示,两组下肢力线均恢复至中立位,假体位置良好。术后1年,两组WOMAC评分、ROM及HKA均较术前显著改善(P<0.05);其中UKA组WOMAC评分及ROM明显优于TKA组(P<0.05),HKA组间比较差异无统计学意义(t=1.54,P=0.13)。术后1年步态分析显示,UKA组步速、步幅、支撑相中期膝关节伸直角度及摆动相膝关节屈曲角度均优于TKA组(P<0.05);步频、初始着地膝关节屈曲角度、承重反应期膝关节屈曲角度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。UKA组初始着地与承重反应期膝关节屈曲角度ASI明显大于TKA组(P<0.05)。结论与TKA相比,UKA具有切口小、失血量少、功能恢复快的优势;UKA术后早期步态主要表现为步速、步幅、支撑相中期与摆动相膝关节屈伸角度的增加。从步态对称性分析,UKA后在初始着地及承重反应期术侧下肢较对侧下肢承担了更多震荡吸收以及维持关节稳定的功能。郝朋 杨柳 何锐 陈昊 孙茂淋 梁帅楠 2020中国修复重建外科杂志2020,34,11:7
9应用BIOMED-2引物检测眼附属器淋巴瘤Ig基因重排的初步研究显示文摘目的 初步评价BIOMED-2引物在辅助诊断眼附属器淋巴瘤的应用价值。方法收集63例眼附属器淋巴瘤,均为甲醛固定的石蜡包埋标本,提取基因组DNA并通过扩增管家基因β—actin检测其质量,应用BIOMED-2标准化基因重排检测系统中IgHB和IgKB两套多重PCR引物进行Ig基因的PCR扩增,并利用基因扫描技术对扩增产物进行克隆性分析。结果76.2%(48/63)淋巴瘤石蜡包埋标本的DNA可扩增出300bp大小的β—actin,适于基因重排检测。lgHB和IgKB多重PCR引物的淋巴瘤检出率分别为79.2%(38/48)和68.8%(33/48),二者联合的检出率为91.7%(44/48)。结论应用较少的BIOMED-2引物结合基因扫描技术能检测出大多数眼附属器淋巴瘤,对临床病理诊断具有较高的辅助价值。王玉川 王犁明 郝朋 应铭 韩瑞芳 林锦镛 2010中华病理学杂志2010,39,1:6
10胸腺素β4对体外培养的兔角膜上皮细胞氧化损伤的保护作用显示文摘目的探讨胸腺素B4(Tβ4)对体外培养的兔角膜上皮细胞氧化损伤的影响。方法实验研究。采用组织块培养法获得原代兔角膜上皮细胞并进行传代培养。采用形态学观察和逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测成熟角蛋白(keratin)12和缝隙连接蛋白(connexin)43的表达情况,对细胞进行鉴定。以H_20_2处理角膜上皮细胞制备体外细胞氧化损伤模型,并观测Tβ4对其保护作用。实验分为4组:正常对照组、Tβ4组、H20:组和H_2O_2+Tβ4组。采用MTF比色法检测角膜上皮细胞存活度;运用TUNEL染色观察角膜上皮细胞凋亡;利用DCFH—DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平;通过划痕实验观察角膜上皮细胞的迁移运动能力。组间均数比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD—t检验。结果培养的细胞呈圆形、卵圆形和多边形,铺路石样生长;RT—PCR法检测显示培养的细胞表达角膜上皮细胞特异性基因,keratin12和connexin43,呈现角膜上皮细胞的特征。经H_2O_2刺激后,角膜上皮细胞的存活率(67.20%±5.87%)较正常对照组显著下降(100.00%±9.99%)(4个组间比较F=18.61,P=0.001,两两比较P=0.000);H202+Tβ4组细胞存活率(83.42%±7.43%)与H202组(67.20%±5.87%)比较明显增高(P=0.023)。4个组间细胞划痕实验结果的差异具有统计学意义(F=36.38,P=0.000),在12hTβ4组划痕已基本消失,细胞迁移率为117.6%±2.22%,与正常对照组(100.00%±4.06%)相比显著增加(P=0.005);12h时H_20_2+Tβ4组与H202组相比,细胞迁移率为96.57%±8.22%,与H202组(64.38%±11.08%)相比明显增加(P=0.000)。H202刺激后细胞内ROS水平为234.42%±22.15%,较正常对照组(100.00%±5.28%)明显增加(P=0.000),H_20_2+Tβ4组细胞内ROS水平(163.26%±10.53%)虽然较正常对照组偏高,但与H_20_2组(234.42%±22.15%)比较显著降低(P=0.000)。TUNEL染色结果显示,H_2O_2组呈现较多凋亡细胞,H_2O_2+Tβ4组与H_20_2组相比,凋亡细胞明显减少。结论Tβ4通过抑制氧化损伤后细胞内ROS的产生对氧化应激损伤后的角膜上皮细胞具有减少细胞凋亡,增加细胞存活率并促进细胞迁移的作用,提示Tβ4对角膜上皮细胞氧化损伤具有保护作用。李轩 姜志昕 郝朋 汤欣 2013中华眼科杂志2013,49,8:4
11水汽含量对石英晶体性能影响及抑制方法研究显示文摘石英晶体是激光测距唯一的时间标尺,其稳定性直接影响着测距结果的准确性。石英晶体内部水汽含量对晶体性能有着很大的影响,分析了不同程度的内部水汽含量在不同温度下对晶体元器件的性能影响。研究表明,水汽含量越大,温度越接近极限,对石英晶体的影响越严重。提出了封装前在125℃±5℃的烘箱内烘烤0.5 h后取出,反复抽真空、充高纯氮气五个循环的方法,可以将水汽含量可控制在≤2 000 ppm以下,达到了降低内部水汽含量的目的。郝朋 王素焕 2019光电技术应用2019,34,2:4
12糖尿病肾病大鼠模型制备研究进展显示文摘糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者众多并发症中最严重的一个。终末期肾病是糖尿病患者的主要死亡原因,但是目前对DN的治疗还仍无有效的方法,所以研究防治DN的关键问题是建立与人类发病相似的动物模型。目前国内外文献报道的动物模型多为大鼠模型,该文对常用的DN大鼠模型制备方法进行对比分析,模型制备方法优缺点进行总结,目的在于完善DN的大鼠模型,为今后防治DN的药物研究提供良好的实验平台。郝朋 巴图德力根 2015中国民族医药杂志2015,21,11:4
13MicroRNA-29a-3p调控转化生长因子β1诱导的人角膜基质细胞的肌成纤维细胞转化显示文摘目的探讨MicroRNA-29a-3p对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人角膜基质细胞肌成纤维细胞转化的影响。方法本实验选用培养至2~4代的人角膜基质细胞,分别设置对照组、TGF-β1组、miR-29a过表达对照+TGF-β1组、miR-29a过表达+TGF-β1组、miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组及miR-29a抑制表达+TGF-β1组。采用TGF-β1体外诱导的人角膜基质细胞向肌成纤维细胞转化,细胞饥饿过夜之后,在无血清的条件下转染miR-29a 24 h;然后以浓度5 ng/mL加入TGF-β1,无血清培养48 h。采用CCK-8法检测细胞活力,采用细胞总RNA提取法提取细胞总RNA,逆转录成cDNA后采用实时荧光定量PCR法检测目的相应指标的表达情况,Western Blot法检测相应蛋白的表达。结果人角膜基质细胞呈多角形,树突状,排列规则。按实验设计处理完细胞之后,各组细胞活性差异无统计学意义(P>0.05),转染效果良好。与对照组比较,TGF-β1组平滑肌肌动蛋白α(αSMA)的mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与miR-29a过表达对照+TGF-β1组比较,miR-29a过表达+TGF-β1组αSMA mRNA表达有明显下降,差异有统计学意义(P=0.001);与miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组比较,miR-29a抑制表达+TGF-β1组αSMAmRNA表达有明显上升,差异有统计学意义(P=0.019)。同时,αSMA在蛋白水平的表达结果可得,对照组与TGF-β1组相比,αSMA的相对表达量显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);miR-29a过表达+TGF-β1组与miR-29a过表达对照+TGF-β1组相比αSMA的相对表达量明显降低,差异有统计学意义(P=0.007);而该指标在miR-29a抑制表达+TGF-β1组与miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组的比较中增高且差异有统计学意义(P=0.034)。结论MicroRNA-29a对TGF-β1诱导的人角膜基质细胞的肌成纤维细胞转化作用是负性的。李凌菡 郝朋 李轩 2020实用医学杂志2020,36,1:4
14人脐带间充质干细胞外泌体对蓝光损伤人视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子A表达的影响显示文摘目的 观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)外泌体对蓝光损伤后人视网膜色素上皮(RPE)细胞血管内皮生长因子A(VEGF-A)表达的影响.方法 培养hUCMSC,收集上清液,采取梯度超速离心法分离纯化外泌体.应用透射电子显微镜观察外泌体形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测hUCMSC外泌体表面特异性标志蛋白CD63及hUCMSC表面蛋白CD90的表达.取生长良好的人RPE细胞,随机分为正常对照组、光损伤组和hUCMSC外泌体处理组.光损伤组和hUCMSC外泌体处理组以蓝光(2000±500) Lux照射RPE细胞12h建立光损伤模型;hUCMSC外泌体处理组细胞培养液中分别加入25、50、75 μg/ml的hUCMSC外泌体,并以此分为低浓度、中浓度、高浓度3个亚组.各浓度亚组继续培养8、16、24 h结束培养.采用Western blot及免疫荧光检测各组RPE细胞VEGF-A蛋白表达,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组RPE细胞VEGF-A mRNA表达.结果 透射电子显微镜观察发现,hUCMSC外泌体为圆形或椭圆形膜性小囊泡,直径50~100 nm.Western blot检测结果显示,hUCMSC外泌体表达外泌体表面特异性标志蛋白CD63及hUCMSC表面蛋白CD90.Western blot及RT-PCR检测结果显示,光损伤组RPE细胞VEGF-A蛋白及mRNA表达较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(t=-16.553、-19.456,P<0.05).hUCMSC外泌体处理组RPE细胞培养8、16、24 h时,低浓度、中浓度、高浓度亚组RPE细胞与光损伤组RPE细胞相比,VEGF-A蛋白及mRNA表达均有下降,差异均有统计学意义(P<0.05).随hUCMSC外泌体作用时间延长及作用浓度增强,RPE细胞VEGF-A蛋白及mRNA下调作用越强(P<0.05).免疫荧光检测结果显示,相同作用时间随着hUCMSC外泌体作用浓度提高,VEGF-A蛋白表达不断下降.结论 hUCMSC外泌体能够有效降低蓝光损伤后人RPE细胞VEGF-A的表达,其效应与hUCMSC外泌体作用浓度、时间呈正相关.何广辉 陈松 马映雪 杨婧 王健 陈莉 王玉川 郝朋 2016中华眼底病杂志2016,32,6:3
15先天性无虹膜患者Pax6基因突变筛查显示文摘背景 先天性无虹膜是一种罕见的先天性常染色体显性遗传疾病,表现为双眼无虹膜,目前已知配对盒基因6(Pax6)突变与先天性无虹膜相关. 目的 对先天性无虹膜患者进行Pax6基因突变筛查.方法 纳入2012年8月至2015年10月在天津市眼科医院就诊的先天性无虹膜患者11例,包括来自3个先天性无虹膜家系的6例患者及5例散发病例,所有患者均接受常规眼科检查.采集所有患者的外周静脉血各3 ml,按照DNA分离试剂盒说明书描述的标准流程提取DNA,对Pax6和Elp4基因全部外显子、外显子5'和3'端与内含子拼接部序列、SIMO序列进行PCR扩增,采用Sanger直接测序法以及多重连接探针扩增技术(MLPA)对患者的Pax6基因进行序列分析,并与500例无眼前节异常的眼外伤患者的测序结果进行比对.结果 所有患者均虹膜缺如,视力为手动/眼前,1例患者存在晶状体脱位.直接测序结果发现,AN-01家系中的3例患者均携带Pax6基因c.688g>t(p.E230X)突变,5例散发病例中3例携有Pax6基因突变,分别为c.468g>a(p.W156X)、c.613c>t(p.Q205X)和c.141+2t>c突变,其中c.688g>t (pE230X)为新发现的突变.AN-02家系的1例患者、AN-03家系的2例患者及另2例散发病例经直接测序和MLPA验证,均未发现Pax6、Elp4基因以及SIMO片段的突变.500名正常个体均未发现上述突变.结论 先天性无虹膜可由Pax6基因突变引起,c.688g>t(p.E230X)为新发现的Pax6突变体,扩大了Pax6基因突变谱.郝朋 应铭 韩瑞芳 王犁明 李宁东 2016中华实验眼科杂志2016,34,10:3
16当代中国排球运动的发展现状及趋势分析显示文摘中国排球的发展是一个艰辛的历程,经过近一个世纪的历程,排球运动在中国才达到一个较高水准,并促进了我国排球事业的普及。但随着国家队成绩的下滑,排球运动也逐渐受到人们的冷落。发展至今,我国排球的发展依然面临着许多问题,以至于在社会体育发展如此迅速的浪潮之下,中国的排球事业依然处于无人问津的状态。该文主要从排球运动特点和我国排球运动现阶段发展状况作为出发点进行分析,找出相应问题与不足,并对我国未来排球的发展趋势与方向提出建议。郝朋 2015当代体育科技2015,5,30:3
17非病毒载体聚乙烯亚胺介导DNA转染的研究显示文摘目的研究新型非病毒类载体聚乙烯亚胺(PEI)的最适转染条件。方法分析各种因素对25 ku线性PEI转染效率的影响,优化实验条件。结果PEI与DNA的质量比≥2能保证DNA与PEI完全结合,最佳混合时间为10 min,但血清的存在将降低其结合效率。在一定范围内提高PEI与DNA的质量比有利于提高转染效率。293T细胞最适转染密度为培养面积的80%。结论确定了PEI转染细胞的最优条件。谈娟 郝朋 张喜慧 马跃 陈启民 耿运琪 乔文涛 2007医学分子生物学杂志2007,4,3:3
18核前体mRNA的剪接与视网膜色素变性显示文摘视网膜色素变性(RP)是一组常见的遗传性视网膜变性疾病,具有高度的遗传异质性。在超过40个不同种类的RP致病基因中包括一部分全身广泛表达的基因,最具代表性的为5个核前体mRNA(pre—mRNA)的剪接相关基因。在RP基因的最新研究中,人们认识到核前体mRNA剪切缺陷在常染色体显性遗传RP(adRP)病因学中占有非常重要地位,同时也使人们对核前体mRNA剪切这一基本的生物学过程有了更清楚的认识。目前,人们在此领域的研究主要集中在两个方面:(1)adRP相关的核前体mRNA剪切基因(adRP-剪接因子)突变如何影响核前体mRNA剪切功能。(2)这些全身表达的基因变异为何特异性地引起视网膜病变。这两个研究主题也恰恰吻合了此类疾病发病机制中的前后两个重要环节。近年来,人们已经在第一个研究主题中取得了显著的进步,第5个adRP-剪接因子SNRNP200基因的克隆及其相关功能研究是此研究方向的重要进步之一。在第二个研究主题中人们也进行了大量的工作,各种生物模型的建立使得人们对疾病的病理过程有了更清晰的描述,然而在关键的发病机制问题上依然面临着许多令人迷惑的问题。总结adRP-剪接因子的最新研究成果,重点阐述核前体mRNA的剪接缺陷引发RP的分子机制研究中亟待解决的问题。赵晨 郝朋 赵堪兴 2011中华实验眼科杂志2011,29,9:3
19胸腺素β4对乙醇诱导的体外兔角膜上皮细胞损伤的保护作用显示文摘背景准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(LASEK)是目前主要的屈光矫正术式之一,但术中使用的乙醇可引起角膜上皮的损伤。胸腺素β4(Tβ4)具有抗凋亡等多种生物学作用,但其对乙醇所致的角膜上皮细胞损伤是否具有保护作用尚不清楚。目的研究T[34对乙醇诱导的角膜上皮细胞损伤是否具有预防作用。方法收集10只健康成年新西兰白兔的角膜,采用组织块培养法获得兔原代角膜上皮细胞传代,逆转录PCR(RT—PCR)法检测缝隙连接蛋白COilnexin 43和成熟角蛋白keratin 12的表达情况,对细胞进行鉴定。选取第2代处于对数生长期的细胞均衡分为4个组,正常对照组细胞进行常规培养,Tβ4组细胞在培养液中添加终浓度为1μg/ml的Tβ4,乙醇组细胞用含体积分数20%乙醇的PBS作用20s以制备角膜上皮细胞损伤模型,乙醇+Tβ4组在损伤模型培养液中加入Tβ4。采用MTT法检测各组角膜上皮细胞存活率;采用TUNEL法观察角膜上皮细胞的凋亡情况;采用实时荧光定量PCR法检测各组角膜上皮细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)mRNA的相对表达量;应用ELISA法检测各组角膜上皮细胞中bcl-2蛋白的质量浓度;用分光光度法检测细胞裂解液中caspase-3酶活性。结果MTT法结果显示,正常对照组细胞存活率设定为100%,乙醇组细胞存活率为(52.1±14.07)%,明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P=0.001);乙醇+TB4组细胞存活率为(77.7±19.60)%,明显高于乙醇组,差异有统计学意义(P=0.035)。TUNEL染色显示,乙醇组和乙醇+Tβ4组均可见明显的TUNEL阳性染色细胞,乙醇+Tβ4组阳性细胞百分比为(30.0±6.7)%,明显低于乙醇组的(42.4±4.0)%,差异有统计学意义(P=0.01)。实时定量PCR显示,乙醇+Tβ4组细胞中Cyclin D1 mRNA和CDK4 mRNA的相对表达量分别为0.93±0.17和0.88±0.09,均明显高于乙醇组的0.68±0.05和0.54±0.07,差异均有统计学意义(P=0.027、0.002)。ELISA显示,乙醇组细胞中bcl-2蛋白质量浓度明显低于乙醇+Tβ4组,而caspase-3酶活性则高于乙醇+Tβ4组,差异均有统计学意义(P=0.030、0.021)。结论Tβ4对乙醇诱导的角膜上皮细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过降低角膜上皮细胞中caspase-3酶活性和增加bcl-2蛋白质量浓度来阻止乙醇所致的细胞凋亡;Tβ4也可上调角膜上皮细胞中Cyclin D1及CDK4的表达,以调控细胞分裂和增生,促进角膜上皮损伤的愈合。姜志昕 郝朋 汤欣 李轩 2016中华实验眼科杂志2016,34,2:3
20两个先天性珊瑚状白内障家系CRYGD基因P23T突变的检测显示文摘背景先天性白内障的致病基因及临床表型具有明显的异质性,通过连锁分析进行基因定位,直接测序法筛选致病基因是目前常用的分析方法。目的对2个先天性珊瑚状白内障家系(CCl和CC2)进行致病基因研究。方法收集确诊为常染色体显性遗传的2个先天性珊瑚状白内障家系17名成员的外周静脉血各5ml,包括ll例患者、4名正常成员和2名配偶,提取基因组DNA。选取与已知常染色体显性遗传先天性白内障相关的位点进行基因组扫描,利用微卫星标记物进行PCR扩增并进行序列分析。采用两点法计算LOD值对致病基因进行连锁分析。采用直接测序法对候选致病基因以及3个单核苷酸多态性(sNP)位点(rs2305429,rs2305430,rs2242074)进行序列分析。利用SNP对2个家系的先证者进行单体型分析。结果CCl和CC2家系中的先证者裂隙灯下均可见双眼晶状体核中央混浊区呈珊瑚状,经两点法计算LOD值,家系CCl在微卫星位点D2S325获得的最大LOD值为3.28,而CC2家系在D2S325获得的最大LOD值为1.50,连锁分析结果支持2个家系均与位于2q的候选致病基因CRYGC和CRYGD连锁。基因序列分析发现2个珊瑚状白内障家系均携带CRYGD基因c.C70A.(P.P23T)突变体,而2个家系中的正常人及100名正常对照则无此基因突变。2个家系先证者携带不同类型的单体型结构。结论CRYGD基因C.C70A.(P.P23T)突变是导致2个不同祖先来源的先天性珊瑚状白内障家系CCl和CC2致病的丰要原因。李宁东 袁松涛 王犁明 王玉川 韩梅 韩瑞芳 郝朋 应铭 2011中华实验眼科杂志2011,29,6:3
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