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| 1 | 基于新型衍生化方法的UPLC-HRMS单克隆抗体N-糖基化分析方法显示文摘目的:为了满足单克隆抗体药物N-糖分析的实际需要,建立稳定、灵敏、可靠的单克隆抗体药物N-糖分析的分析方法。方法:采用全新的肼基衍生化试剂对N-糖进行衍生化,并对衍生化后的N-糖进行超高效液相色谱高分辨质谱分析。采用与开源数据库比对和多级质谱对检测到的N-糖进行初步定性。结果:新的肼基衍生化分析方法将单克隆抗体药物N-糖分析的灵敏度提高了2-3个数量级,与传统2-氨基苯甲酰胺(2-AB)衍生化相比,灵敏度也有3倍的提高。新的方法条件温和,保证N-糖结构的完整性,实现了多种不稳定唾液酸修饰N-糖的检出。二级质谱的应用提高了结构分析的效率与针对性。结论:本文建立了可靠、灵敏、高效的单克隆抗体药物N-糖分析方法,该方法在实际应用中具有极大的应用前景。 | 铁偲 胡婷 张金兰 | 2015 | 药物分析杂志2015,35,6: | 3 |
| 2 | 基于超滤反应器的蛋白质N-糖基化快速分析方法显示文摘随着生物科技的发展,蛋白质药物正越来越多地被应用在疾病诊疗的各个方面。但是蛋白质的匀质性,特别是蛋白质N-糖基化修饰成为限制蛋白质药物发展的瓶颈,因此蛋白质N-糖基化修饰的分析方法正逐渐成为蛋白质药物研发的关键技术。为了提高蛋白质N-糖基化修饰分析效率,本文建立了基于超滤反应器的N-糖分离纯化方法。新处理方法大幅提高了含N-乙酰基葡萄糖N-糖的提取效率(10%~20%),避免了唾液酸结构的降解(20%~100%),同时将处理时间缩短至30 min。通过与HPLC-HRMS分析方法联用,提高了样品分析效率。本文建立了高效、可靠,适合蛋白质药物的N-糖基化修饰分析方法。 | 铁偲 胡婷 张金兰 | 2015 | 药学学报2015,50,6: | 2 |
| 3 | 完善国资委EVA考核细则的建议显示文摘一、归属于母公司所有者EVA概念的提出经济增加值(EVA,Economic value added)是企业可持续的收益水平超过资本成本的盈利能力,即税后净营业利润大于资本成本的净值。尽管业内对EVA理解不完全相同,但基本认同的计算公式为:EVA=税后净营业利润-资本成本-税后净营业利润-调整后资本×平均资本成本率。然而,从企业合并报表角度看,如此计算出来的EVA能否真正反映企业为出资人(本企业股东)创造价值的水平呢? | 何召滨 方佶偲 李铁 | 2015 | 财务与会计2015,0,14: | 0 |
| 4 | 维药神香草提取物体外抗炎作用的谱效关系研究显示文摘目的:为阐明维药神香草抗炎作用的药效物质基础提供参考。方法:采用高效液相色谱法建立神香草8个不同极性提取物的指纹图谱;以巨噬细胞RAW264.7为研究对象,考察神香草不同极性提取物对细胞培养上清液中炎症因子一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的抑制作用,比较其体外抗炎活性的差异性;采用灰色关联分析法分析指纹图谱共有峰的峰面积与抗炎活性的谱-效关系。结果:神香草8个不同极性提取物的指纹图谱具有明显的差异。体外抗炎结果提示,神香草30%乙醇提取物对体外炎症因子的抑制作用最强。对其建立的HPLC指纹图谱有共有峰14个,与体外炎症因子的抑制作用关系密切的5个共有峰分别为8、6、5、10、13号,其中8号峰为迷迭香酸。结论:所建立的指纹图谱及其与体外抗炎活性的谱效关系可为该药材的药效物质基础研究提供一定参考。 | 毛艳 贺金华 蔡晓翠 铁偲 王新堂 | 2017 | 中国药房2017,28,10: | 10 |
| 5 | 高效液相色谱法测定大鼠血浆中安石榴苷的含量及其药动学研究显示文摘目的建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中安石榴苷的含量,并用于药代动力学研究。方法血浆样品采用色谱甲醇处理,以大黄素作为内标,Agilent XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇(A)-0.1%三氟乙酸水溶液(B)梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃。采用大鼠单剂量静注13 mg/kg的安石榴苷,HPLC法测定安石榴苷的血药浓度,并采用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。结果方法学实验结果表明内源性杂质不干扰安石榴苷和内标的测定,线性范围0.02 016~1.00 800 mg/ml。方法精密度、准确度、稳定性和回收率均符合生物样品测定的要求。结论本方法操作简便、灵敏、专属性强,方法学考证符合生物样品测定的要求,并成功用于安石榴苷在大鼠体内的药代动力学研究。 | 严欢 刘晓燕 铁偲 贺金华 | 2017 | 医学动物防制2017,33,1: | 2 |
| 6 | 载货车驾驶室悬置系统试验仿真与优化显示文摘为从某新型载货车的三种驾驶室悬置参数水平值中找出最佳匹配值,进行样车道路试验;应用多体动力学软件建立驾驶室悬置系统虚拟样机模型,通过对比驾驶室悬置系统振动加速度功率谱密度曲线验证仿真模型的可信性。最后以减小驾驶室地板加速度功率谱密度的均方根值为目标,以悬置系统螺旋弹簧刚度、减振器阻尼为因子,运用试验设计技术对驾驶室悬置参数进行优化,改善了驾驶室悬置隔振性能,找出了适合该车型的最佳参数匹配值。 | 杨辉 张瑞亮 王铁 张珍偲 刘亚琼 | 2016 | 机械科学与技术2016,35,1: | 1 |
| 7 | 宋代黑釉茶盏油滴的飞行时间二次离子质谱表征显示文摘本研究利用飞行时间二次离子质谱(TOF-SIMS)表征典型黑釉茶盏釉面上银色反光斑纹,即华北油滴。高分辨质谱测定油滴的主要成分是氧化铁,由显微拉曼光谱确定其矿物形式是赤铁矿(α-Fe_(2)O_(3))。二次离子质谱(SIMS)离子成像进一步揭示:该赤铁矿呈六方柱晶体(约2~10μm);近百余枚这样的晶体自组织分散排列构成类似雨滴状的斑纹(约120μm);与其形貌互补的是含硅、铝、钙、钠等元素的碱性石灰质釉质。SIMS深度剖析发现,α-Fe_(2)O_(3)晶体的连续深度不小于5μm。基于SIMS表征结果,还探讨了赤铁矿沉积薄膜状镜铁矿(α-Fe_(2)O_(3))引起华北油滴呈银色与镜面反射现象的原理,以及TOF-SIMS在表征和研究古瓷方面的潜力和局限。 | 徐子琪 赵煊赫 梁汉东 李展平 铁偲 | 2023 | 质谱学报2023,44,1: | 0 |
| 8 | 基于脂质代谢组学的卵白蛋白诱导小鼠过敏性哮喘机制研究显示文摘目的基于脂质代谢组学研究卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导小鼠过敏性哮喘的机制,寻找潜在生物标志物。方法建立OVA诱导的BALB/c小鼠过敏性哮喘模型,采用ELISA法测定BALF中TNF-α、IL-4、IL-10、IFN-γ及血清中IgE表达水平;肺组织病理HE染色观察小鼠肺部炎症情况;采用UPLC-MS/MS代谢组学方法研究过敏性哮喘小鼠肺组织及血清中脂质介质变化情况。结果与正常对照组相比较,模型组血清IgE含量明显升高(P<0.05),BALF中TNF-α、IFN-γ含量明显升高(P<0.05);模型组小鼠肺组织可见典型炎症表现;UPLC-MRM共完成57种脂质介质的定量分析,模型组与正常对照组小鼠肺组织和血清中的脂质介质代谢轮廓差异均存在显著性,在肺组织和血清中分别发现17个和6个差异具有显著性的脂质介质,差异性代谢产物通过环氧酶(COX)、脂氧酶(LOX)和细胞色素P450氧化酶(P450)代谢途径产生。结论OVA诱导的过敏性哮喘可引起内源性脂质介质代谢紊乱,与细胞因子相互作用参与哮喘的发生发展,获得的差异性代谢物具有成为表征其发展变化的生物标志物的潜在研究价值。 | 戎晓娟 孔令霏 康雨彤 秦拓 徐磊 铁偲 | 2023 | 中国药理学通报2023,39,3: | 0 |
| 9 | 复合锶离子光交联海藻酸盐水凝胶支架的机械和生物学性能显示文摘背景:光交联藻酸盐水凝胶以其良好的稳定性、可控性和生物相容性而备受关注,然而其作为骨组织工程支架仍存在不足之处,如强度不足、细胞黏附性能较差、缺乏骨诱导性等。目的:在光交联海藻酸盐水凝胶支架中复合锶离子,探究其机械和生物学性能变化。方法:在甲基丙烯酸酯化海藻酸盐形成光交联水凝胶后,分别浸泡于不同浓度(0,10,30,50,80,100 mmol/L)锶离子溶液中,制备携锶离子光交联海藻酸盐水凝胶,测量其溶胀率、弹性模量,并用扫描电镜和能谱仪分析材料表面形态和元素。将MC3T3-E1细胞分别接种于不同浓度携锶离子光交联海藻酸盐水凝胶表面,培养第4小时,Live/Dead染色观察细胞黏附情况;培养第3天,Live/Dead染色观察细胞伸展情况。结果与结论:①扫描电镜显示,随着引入锶离子浓度的升高,携锶离子光交联海藻酸盐水凝胶的致密程度增加,孔径减小;②能谱仪检测显示,随着引入锶离子浓度的增加,携锶离子光交联海藻酸盐水凝胶表面锶离子含量递增;③随着引入锶离子浓度的增加,携锶离子光交联海藻酸盐水凝胶溶胀率呈逐渐降低的趋势,弹性模量呈逐渐升高的趋势;④随着引入锶离子浓度的提高,MC3T3-E1细胞在携锶离子光交联海藻酸盐水凝胶表面的早期黏附率呈递增趋势,细胞伸展越来越好;⑤结果表明,在光交联海藻酸盐水凝胶中引入锶离子,可提高其机械性能,促进细胞的黏附伸展。 | 赵德路 铁朝荣 王新 朱怀安 杨偲偲 李晓保 尹苗 | 2019 | 中国组织工程研究2019,23,18: | 8 |
| 10 | 维药神香草聚酰胺树脂柱40%乙醇洗脱物的成分分析及其对哮喘小鼠炎症的改善作用显示文摘目的:对神香草40%乙醇洗脱物进行成分分析,并考察其对哮喘小鼠炎症的改善作用。方法:收集聚酰胺树脂柱40%乙醇洗脱物,采用高效液相色谱-高分辨率质谱技术对神香草40%乙醇洗脱物成分进行分析。将72只小鼠随机分为空白组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、地塞米松组(阳性对照,1.6 mg/kg)和神香草40%乙醇洗脱物高、中、低剂量组(200、100、50 mg/kg),每组12只。除正常组外,其余各组小鼠均于实验第0、14天ip 0.2 m L卵白蛋白(OVA)致敏;于实验第25~31天ig给药,每天1次;给药结束后,用2 mg/mL OVA连续滴鼻激发7 d。末次滴鼻激发24 h后,检测各组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)和干扰素(IFN-γ)水平;观察肺组织病理变化。结果:共鉴定出11种化合物,相对百分含量为40.89%,主要成分有迷迭香酸、木犀草素7-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、金丝桃苷等。与空白组比较,模型组小鼠BALF中TNF-α、IL-4水平升高,IFN-γ水平降低,IL-4/IFN-γ比值增大(P<0.01);肺组织破坏严重,血管周围有炎症细胞浸润。与模型组比较,地塞米松组和神香草40%乙醇洗脱物高、中剂量组小鼠BALF中TNF-α、IL-4水平降低,IFN-γ水平升高,IL-4/IFN-γ比值减小(P<0.01);肺组织病理变化改善。结论:本研究建立的分析方法能够有效地分析神香草40%乙醇洗脱物中的化学成分;神香草40%乙醇洗脱物可调节哮喘小鼠肺组织炎症因子的释放,减轻哮喘小鼠肺组织的炎症病变。 | 毛艳 贺金华 铁偲 王新堂 袁凤娟 孙玉华 蔡晓翠 | 2017 | 中国药房2017,28,25: | 2 |
| 11 | 乙型/丙型肝炎肝硬化患者外周血清鞘脂表达谱特征分析显示文摘目的探索乙型/丙型肝炎肝硬化与非病毒性肝硬化患者外周血清鞘脂的不同表达谱特征。方法选取2014年7月-2015年5月首都医科大学附属北京佑安医院疑难肝病及人工肝中心收治的104例肝硬化患者为研究对象,最终纳入97例肝硬化患者,其中包括66例(68.04%)乙型/丙型肝炎肝硬化及31例(31.96%)非病毒性肝硬化患者。采用高效液相色谱-质谱分析法检测患者外周血清中57种鞘脂的表达水平,计量资料两组间比较采用t检验或Mann-Whitney U检验。计数资料两组间比较采用χ^2检验。单因素分析结果中有意义的变量纳入logistic多因素回归分析。结果两组患者年龄、男性比例、TBil、DBil及GGT等临床指标之间差异均无统计学意义(P值均>0.05)。检测57种血清鞘脂表达中,Cer(d18∶1/12∶0)、HexCer(d18∶1/14∶1)和dhCer(d18∶0/24∶1)-1-P在病毒性肝炎肝硬化组的表达水平分别为168.61(168.54~168.88)pmol/0.1 ml、213.93(211.15~218.92)pmol/0.1 ml、60.07(59.40~61.23)pmol/0.1ml,均高于非病毒性肝硬化组[168.53(168.48~168.63)pmol/0.1ml、212.26(209.90~214.64)pmol/0.1 ml、59.42(59.28~59.87)pmol/0.1 ml],两组间差异均有统计学意义(Z值分别为-2.54、-2.03、-2.32,P值均<0.05)。logistics回归分析结果表明,dhCer(d18∶0/24∶1)-1-P高表达与乙型/丙型肝炎肝硬化独立相关(比值比=1.11,95%可信区间1.004~1.225,P=0.042)。病毒性肝炎肝硬化患者亚组分析结果表明,Cer(d18∶1/12∶0)、HexCer(d18∶1/14∶1)和dhCer(d18∶0/24∶1)-1-P在乙型肝炎肝硬化和丙型肝炎肝硬化患者之间的表达水平差异均无统计学意义(Z值分别为-0.563、-0.610、-0.579,P值均>0.05)。结论外周血清鞘脂dhCer(d18∶0/24∶1)-1-P与乙型/丙型肝炎肝硬化密切相关,可能有助于从鞘脂角度深入理解病毒性肝硬化的疾病特征。 | 王扬 铁偲 刘霜 陈煜 段钟平 郑素军 张金兰 | 2020 | 临床肝胆病杂志2020,36,8: | 1 |
| 12 | 甲基丙烯酸钠修饰光交联海藻酸盐水凝胶支架的制备和表征显示文摘背景:光交联海藻酸盐水凝胶因具有良好的生物相容性、可微创注射等优势已为热门的组织工程研究材料,但是仍然存在强度不足、细胞黏附能力不足等问题。目的:构建载负电荷的光交联海藻酸盐水凝胶材料,探索其物理性能和细胞黏附性能变化。方法:利用海藻酸钠和2-氨乙基甲基丙烯酸酯盐酸盐制备甲基丙烯酸酯化海藻酸盐后,再与光引发剂和不同浓度甲基丙烯酸钠(0,20,40,60mmol/L)混合制备载负电荷光交联海藻酸盐水凝胶,利用傅里叶红外光谱仪分析水凝胶的功能基团变化情况,扫面电镜观察水凝胶的表面形态,并测量其溶胀率。将MC3T3-E1细胞与各组水凝胶共培养48h,采用活死染色与CCK-8法分析水凝胶的细胞毒性;接种MC3T3-E1细胞于4组水凝胶表面,在第4小时活死染色观察细胞早期黏附情况,第3天活死染色观察细胞伸展情况。结果与结论:①傅里叶红外光谱分析显示,甲基丙烯酸钠的引入可在水凝胶红外波普波数1600 cm-1左右处出现来自甲基丙烯酸钠的新波峰;②扫描电镜显示随着甲基丙烯酸钠浓度的增加,光交联海藻酸盐水凝胶的致密度增加,孔径减小;③溶胀率测试显示随着甲基丙烯酸钠浓度的升高,光交联海藻酸盐水凝胶的溶胀率逐渐降低;④活死染色显示4种水凝胶表面的细胞生长状态良好,细胞活性均在95%以上;CCK-8检测显示,载负电荷的光交联海藻酸盐水凝胶材料无细胞毒性;⑤随着甲基丙烯酸钠引入量的增加,载负电荷光交联海藻酸盐水凝胶表面的早期细胞黏附率逐渐增加,细胞伸展状态明显改善;⑥结果表明,甲基丙烯酸钠修饰的引入调节了光交联海藻酸盐水凝胶物理性能,并明显提高了其细胞黏附性能。 | 赵德路 铁朝荣 杨偲偲 孙珍 王新 朱怀安 尹苗 | 2020 | 中国组织工程研究2020,24,22: | 0 |
| 13 | 血清鞘脂用于乙肝相关甲胎蛋白阴性肝细胞癌的诊断价值研究显示文摘目的探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关甲胎蛋白(AFP)阴性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清鞘脂表达谱改变及其诊断价值。方法采用高效液相色谱法与串联质谱法,对15例乙肝相关AFP阴性HCC患者和49例乙肝肝硬化患者的外周血清中61种鞘脂的表达水平进行检测,并对结果进行统计分析。结果 61种血清鞘脂中,有14种鞘脂在两组间差异有统计学意义(P<0.05)。OPLSDA分析结果表明,Cer(d18∶1/8∶0)-1-P、Sphingosine(d17∶1)-1-P和Sphingosine(d18∶1)-1-P是区分乙肝相关AFP阴性HCC和乙肝肝硬化的潜在标志物,其在AFP阴性HCC患者中的表达水平分别为217.74pmol/0.1 ml、58.28 pmol/0.1 ml和62.99 pmol/0.1 ml,均显著高于乙肝肝硬化患者的表达水平(P<0.05)。将三种鞘脂纳入Logistics回归分析,结果表明,Cer(d18∶1/8∶0)-1-P与乙肝相关AFP阴性HCC独立相关(OR=0.667,95%CI:0.481~0.923,P<0.05),其预测诊断乙肝相关AFP阴性HCC的灵敏度为81.6%,特异度为86.7%。结论外周血清鞘脂Cer(d18∶1/8∶0)-1-P可能是乙肝相关AFP阴性HCC的潜在诊断标志物。 | 蒋莹莹 铁偲 王扬 程香普 卞丹丹 王婷 刘梅 段钟平 郑素军 张金兰 | 2018 | 胃肠病学和肝病学杂志2018,27,5: | 1 |