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1SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小分子多肽显示文摘目的 研究 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)显示小分子多肽的方法 .方法 观察不同方法处理的样品 ,上样量对电泳结果的影响及对分子量标准 (Mr 2 5 12~ 16 949)进行直线回归分析 .结果 样品的不同处理条件未见有差异 ;在该实验系统条件下上样样品为每孔 5~ 10μg较佳 ;分子量标准直线回归系数 r=- 0 .96 2 .结论 样品处理方便 ;上样量少 ;在 16 0 g· L- 1 T,6 0 g· kg- 1 C较低的丙烯酰胺含 6 mol· L- 1脲的分离胶中能够显示 Mr为 2 5 12的多肽 。石继红 赵永同 王俊楼 韩苇 颜真 张英起 2000第四军医大学学报2000,21,6:70
2应用SDS-PAGE显示小分子多肽技术的探讨显示文摘为探讨显示小分子多肽技术 ,应用SDS PAGE寻找更简单、快捷的分析小分子多肽的方法。采用 8%T ,3%C的丙烯酰胺浓缩胶和含 6mol/L脲 (或含 2 4 %的甘油 )的 16%T ,6%C的丙烯酰胺分离胶的双层不连续SDS PAGE和三羟基甘氨酸电泳缓冲液显示蛋白分子量标准 ( 2 512~16 94 9kD)和待测样品 ,并对蛋白分子量标准在这两种分离胶中进行了回归分析。结果表明在这两种条件下均能显示分子量小至 2 512kD的多肽 ;多肽样品在含脲和在含甘油的 2L T SDS PAGE中均有较好的显带 ;蛋白分子量标准的直线回归系数分别为r =- 0 966和r =- 0 964。它们是显示小分子多肽和估测其相对分子质量及对多肽分子进行进一步分析的更为简便易行的方法。石继红 赵永同 张英起 颜真 韩苇 王俊楼 2001生物工程进展2001,21,1:42
3四君子汤对脾虚患者血浆细胞因子的影响显示文摘目的 观察四君子汤对脾虚患者血浆细胞因子的影响 ,探讨脾虚与细胞因子的关系 .方法 6 6例脾虚患者分为四君子汤治疗组和六味地黄汤治疗组 ,采用免疫分析技术对脾虚患者及其血浆 IL - 2 ,IL - 2 R,IL - 4,IL - 5 ,TNF-α,Ig E,s ICAM- 1等细胞因子水平进行测定 ,用逆转录聚合酶链反应技术 (RT- PCR)对外周淋巴细胞 IL- 4m RNA,IL- 5 m RNA表达进行定量分析 ,用斑点杂交法检测外周血 CD2 m RNA.结果 脾虚患者 IL- 2 ,IL- 4,IL- 5 ,TNF- α,Ig E水平下降 ,s ICAM- 1和 s IL- 2 R水平升高 ,外周淋巴细胞 IL- 4m RNA,IL - 5 m RNA和 CD2 m RNA弱表达 ,表现为免疫功能下降 ,经过四君子汤治疗 ,上述各项指标恢复正常 .结论 四君子汤可通过益气健脾调节细胞因子的水平和功能 。章梅 夏天 张仲海 靳风烁 颜真 崔大祥 2000第四军医大学学报2000,21,4:46
4蛋白质翻译后修饰研究进展显示文摘蛋白质是执行细胞功能的基本功能单元,其表达受基因组和表观遗传学的调控。通常,蛋白质在表达以后还需要经过不同程度的修饰才能发挥所需要的功能。这种翻译后修饰过程受到一系列修饰酶和去修饰酶的严格调控,使得在某一瞬间细胞中蛋白质表现出某种稳定或动态的特定功能。最新的研究表明,真核细胞中存在着各种各样的蛋白质修饰过程,其中大约70%目前还无法解释。有理由认为,这种经过了特定修饰的蛋白质,更客观地反映了细胞的各种生理以及病理过程。因此,除了基因组所编码的'裸'蛋白质组的表达以外,更需要对经过翻译后修饰的蛋白质及蛋白质组的调控过程进行深入的研究。该文对常见翻译后修饰以及研究方法进行了综述。阮班军 代鹏 王伟 孙建斌 张文涛 颜真 杨静华 2014中国细胞生物学学报2014,36,7:38
5四君子汤对脾虚患者外周血单个核细胞白细胞介素-6mRNA表达的影响显示文摘章梅 夏天 颜真 崔大祥 张仲海 2000中国中西医结合杂志2000,20,9:31
6基于泰森多边形法的流域面平均雨量计算显示文摘以西南山区代表性较强的重庆市蔡家水文站控制断面以上笋溪河流域为研究流域,基于Arc GIS和数字高程模型(DEM)数据为基础,构建研究流域16个雨量站的泰森多边形,并利用16个雨量站2015年6月降雨量资料,采用不同方法对该控制断面以上流域面平均降雨量进行了计算。结果表明,基于Arc GIS和DEM构建泰森多边形计算面雨量较传统方法更简单。在雨量站分布较均匀且降水空间分布均匀的情况下,采用泰森多边形法和算术平均法计算的面雨量结果相差不大;当降雨空间分布极不均匀,个别站点出现了强降水情况时,由于泰森多边形法以权重来考虑分布不均匀的情况,采用该种方法计算结果精度更高更可靠;研究成果对西南山区流域(区域)面雨量计算具有一定的参考价值。颜真梅 母国宏 2017水利科技与经济2017,23,1:22
7基于“互联网+”大数据的输电巡检智能管控平台研发及应用显示文摘常规输电网络存在明显的信息检测不足行为,进而导致整体巡检数据的动态能力偏低,针对此问题,设计基于“互联网+”的大数据输电巡检智能管控平台。按照管控架构的部署现状,选用合理电力大数据采集层设备,进而设计完整智能巡检终端网络结构,完成输电巡检智能管控平台的硬件运行环境搭建。在此基础上,利用互联网电子采集点位分布情况,实时监控输电数据的巡检行为,进而连接相关智能串口服务器,完成智能管控平台的软件运行环境搭建,实现“互联网+”大数据输电巡检智能管控平台应用。对比实验结果表明,与常规输电网络相比,应用新型智能管控平台后,输电信息的最大检测量超过8.5×1013 T,定向化输电巡检管控精准性达到90%,巡检数据的整体动态能力得到稳定提升。伍鹏 林力辉 吴晓杰 卢朝成 颜真 2020电网与清洁能源2020,36,3:19
8胸腺素α_1 基因的克隆表达及其生物活性显示文摘胸腺素α1(thymosinalpha 1 ,Tα1)作为一种免疫增强剂 ,临床用途广泛 .为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成Tα1基因 ,克隆于质粒pUC1 9的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .经测序证明序列正确后 ,串联为 4串体 (Tα1④ ) ,经再次测序确认后克隆入pThioHisA的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .转化大肠杆菌T0P1 0 ,酶切鉴定正确后 ,经 1mmol LIPTG诱导 4h ,获得硫氧还蛋白与Tα1④的融合表达 ,用离子交换层析纯化融合蛋白 .溴化氰裂解融合蛋白 ,释放出Tα1单体 ,经离子交换色谱纯化出Tα1.采用3 H TdR参入法进行生物活性测定 ,证实融合蛋白和Tα1均具有刺激小鼠脾淋巴细胞分裂增殖的能力 .石继红 张英起 赵永同 赵宁 朱宝娥 颜真 韩苇 2001中国生物化学与分子生物学报2001,17,3:16
9用暴雨资料推求中小河流洪峰流量的方法研究显示文摘中小流域一般属于实测水文资料缺乏地区,河流水文站点不仅稀少,观测方法通常也比较简陋,资料的可靠性也比较差,但是中小流域一般都有较长降雨观测资料。为了解决无(缺)水文资料地区的中小流域设计洪水的问题,从暴雨推求洪水的思路出发,以缺乏实测水文资料的资水河流域为研究对象,探讨了比较常用、且具有一定理论基础的美国推理公式和'中铁法'在中小流域的适用性。通过对资水河邻近流域选取具有较长实测资料的相似中小流域构建了相应的计算公式,并对2种方法的计算精度进行了分析验证,结果表明,'中铁法'较美国推理公式精度更高,更适合利用暴雨推求中国中小河流的设计洪水。岳华 刘发明 颜真梅 2012四川大学学报(工程科学版)2012,44,4:15
10地龙提取液对小鼠腹腔巨噬细胞活化的作用显示文摘地龙提取液对小鼠腹腔巨噬细胞活化的作用张凤春陈云峰苏颜真胡奇芬(解放军第四六六医院北京100081)地龙是传统中药,《本草纲目》记载:能治疗瘰疠溃烂、口舌糜疮[1],临床上常用于治疗骨折、创伤、下肢溃烂等多种疾病[2~4],我们在临床上发现地龙液能减...张凤春 陈云峰 苏颜真 胡奇芬 1997中国中药杂志1997,22,9:12
11鱼腥草水提液对铜绿假单胞菌生物被膜的影响及与阿奇霉素的抗菌协同作用显示文摘目的研究鱼腥草水提液体外对铜绿假单胞菌生物被膜的影响及与阿奇霉素的抗菌协同作用。方法应用微量倍比稀释法测定鱼腥草水提液、阿奇霉素对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC),棋盘稀释法测定二者协同抗菌作用,MTT法测定鱼腥草水提液对铜绿假单胞菌生物被膜内细菌代谢的影响,镜下观察该药对铜绿假单胞菌生物被膜的形态影响。结果实验结果提示,鱼腥草水提液对铜绿假单胞菌的MIC为250 g.L-1,协同实验表明与阿奇霉素有抗菌相加作用。鱼腥草水提液对铜绿假单胞菌生物被膜内细菌代谢的SMIC501,3,7d分别是31.25,62.5,62.5 g.L-1,SMIC80分别是250,250,250 g.L-1。SMIC80药物浓度显示对铜绿假单胞菌生物膜形态形成有干扰作用。结论鱼腥草水提液与阿奇霉素抗菌相加作用明显,并能抑制铜绿假单胞菌生物膜的形成,为鱼腥草治疗由生物膜引起的慢性感染提供了依据。程惠娟 汪长中 汪海波 黄锦亮 颜真波 2012时珍国医国药2012,23,7:12
12人MUC-1全长cDNA基因真核表达载体构建及在COS-7细胞中的表达显示文摘目的 构建含人 MUC- 1全长 c DNA序列的真核表达载体 ,并观察其在 COS- 7细胞中的表达 .方法 将目的基因 MUC- 1克隆入 p GEM- 3zf(- )载体中并进行酶切鉴定和DNA序列测定 .亚克隆入真核质粒 pc DNA3.1(+) ,构建真核表达载体 pc DNA3.1(+) - MU C- 1.用电穿孔法将重组质粒转入 COS- 7细胞 ,以免疫荧光和流式细胞仪检测 MUC- 1的表达 .结果 酶切鉴定和序列分析证实 ,重组质粒含有人MU C- 1全长 c DNA编码序列 ,转染实验表明 MU C- 1基因能在 COS- 7细胞中表达 .结论 人 MU C- 1全长 c DNA基因真核表达载体构建及其在 COS- 7中的表达均获成功 。袁时芳 李开宗 韩苇 颜真 张英起 2002第四军医大学学报2002,23,13:11
13应用基因工程方法制备新型重组人肿瘤坏死因子-α显示文摘目的 应用基因工程技术 ,制备一种新型的重组人肿瘤坏死因子 α (novelrecombinanthumantumornecrosisfactor α ,nrhTNF α) ,并对其生物学活性、理化性质进行鉴定 ,为进入临床前研究提供基础。方法 应用PCR技术 ,将hTNF α基因的 5′端 17个氨基酸的编码序列删除 ,基因中Pro8Ser9Asp10 的编码序列用Arg Lys Arg的编码序列取代 ,同时Leu157的密码子被Phe的密码子所取代。将hTNF α突变基因 ,插入原核高效表达载体pBV2 2 0中 ,构建高表达工程菌株。纯化表达产物 ,对连续 3批制备的新型rhTNF α,按人用《重组DNA制品质量控制要点》检定要求进行鉴定。结果DNA序列分析和蛋白质N末端、C末端部分氨基酸序列分析表明 ,nrhTNF α与天然的hTNF α相比较 ,N末端缺失了 7个氨基酸 ,13位氨基酸为Arg Lys Arg ,其后为天然hTNF α 11位以后的氨基酸。 15 7位Leu的密码子被Phe的密码子所取代。产物表达量占菌体蛋白的 6 7.4 %。经 (NH4) 2 SO4沉淀、Q SepharoseF .F .及S SepharoseF .F .柱层析分离纯化后 ,产品的纯度达 99% ,比活性达 1× 10 9IU/mg蛋白。结论成功地制备了nrhTNF ,对连续 3批制备的nrhTNF α按人用《重组DNA制品质量控制要点》检定要求进行鉴定 。张英起 赵宁 李波 刘磊 王增禄 朱宝娥 颜真 苏成芝 2002细胞与分子免疫学杂志2002,18,4:11
14导向性人干扰素α2a工程菌的高密度发酵显示文摘目的 :优化大肠杆菌表达导向性人干扰素α2a的中试发酵工艺 ,以获得工程菌的高密度发酵和目的蛋白的高表达 .方法 :采用发酵罐发酵 ,对影响工程菌生长和目的蛋白表达的条件 ,如pH值、活化时间、诱导时间、溶氧范围及补料流加方式等进行优化 .结果 :根据优化条件 ,连续三批重复发酵10L工程菌 ,最终菌体密度均达A60 0nm2 5~ 30 ,菌体获得量均可达湿重 5 0g/L以上 ,目的蛋白表达量均为 3.2× 10 9U/L以上 .结论 :此发酵工艺具有周期短、产量高以及重复性稳定性好的特点 ,为下游纯化和进一步大规模生产奠定基础 .孟洁如 颜真 赵宁 张英起 2004第四军医大学学报2004,25,23:10
15重组融合蛋白GX1-rmhTNFα的克隆、表达及鉴定显示文摘目的构建胃癌新生血管导向性肽GX1与新型人肿瘤坏死因子(GX1-rmhTNF)基因的原核表达载体,表达GX1-rmhTNF蛋白。方法利用基因工程方法将胃癌血管特异性结合肽融合在新型人肿瘤坏死因子α的氨基末端,构建GX1-rmhTNF原核表达载体,在大肠杆菌进行表达。对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Westernblot检测分析。结果成功构建了GX1-rmhTNF重组融合表达质粒,表达的蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在相对分子质量(Mr)约18000处出现了1条新生的蛋白条带,该表达蛋白具有与TNFα单克隆抗体特异性的结合能力。结论成功构建了GX1-rmhT-NF基因的原核表达载体并在原核细胞中表达了该产物,为下一步GX1-rmhTNF的纯化奠定了基础。曹珊珊 吴开春 颜真 万一 韩宇 赵丽娜 樊代明 2006细胞与分子免疫学杂志2006,22,3:10
16大肠杆菌表达人新型肿瘤坏死因子的纯化显示文摘目的:制备符合临床要求的高纯度新型人肿瘤坏死因子(nhTNF),建立简单、高效的纯化途径.方法:用本室构建的nhTNF基因工程菌,经发酵、收菌、裂菌、硫酸铵盐析,Q-Sepharose及S-Sepharose层析,得到高活性、高纯度的nhTNF单一色谱峰,比活性达1×109U/mg蛋白.结果:nhTNF纯度达98%以上,活性回收率为79%.结论:纯化方法简单,且达到较好效果,为nhTNF的大规模制备和临床应用打下基础.杨辉 张英起 李芳梅 王俊楼 赵宁 朱宝娥 颜真 苏成芝 1997第四军医大学学报1997,18,3:10
17bFGF促进创伤愈合的作用机制研究显示文摘目的探讨bFGF促愈合的作用机制。方法在新西兰大白兔背部制作创伤模型,外用bFGF(1000U/ml),进行肉眼观察、病理学检查、免疫组化分析和电镜观察,并用0.02mol/L的PBS做对照。结果肉限观察发现bFGF组表皮、肌肉的愈合率明显比阴性对照组高;病理学检查表明bFGF能促进肉芽组织中的成纤维细胞、DNA,毛细血管、胶原纤维的增长;免疫组化分析结果表明bFGF能显著地增加肌肉组织中肌动蛋白的数量,有利于伤口的收缩,电镜观察发现bFGF组肉芽组织中细胞功能旺盛。结论bFGF具有显著地促进创伤愈合的作用,其作用机制可能与以下几个方面有关:(1)促进创面巨噬细胞的增生、活化,吞噬功能增强;(2)促进表皮增生、伤口收缩;(3)促进肉芽组织生长。张凤春 陈云峰 苏颜真 胡奇芬 1998中华实验外科杂志1998,15,6:9
18导向性人干扰素α2a工程菌生物学特性的稳定性显示文摘目的 全面观察了解pBV220-IFNN/DH5α工程菌生物学特性的稳定性。方法 工程菌菌株连续传至50代后,进行质粒性状、扫描电镜观察、干扰素表达水平、革兰氏染色及各项生化反应检测。结果 pBV220-IF-NN/DH5α工程菌呈现典型的大肠杆菌形态,各代次菌的各项检测结果与原始菌种差异无显著意义。结论 该菌种可作为生产用菌种。孟洁如 颜真 赵宁 李波 张英起 2003中国生物制品学杂志2003,16,4:9
19中医药治疗风湿性多肌痛研究进展显示文摘风湿性多肌痛(PMR)是一种与其他诊断明确的风湿性疾病、感染及肿瘤无关的疼痛性疾病,常见于老年人,表现以四肢及躯干近端肌肉疼痛为特点的临床综合征。PMR患者多对激素敏感性强,小剂量激素往往能取得很好疗效,但长期使用激素和免疫抑制剂毒副作用明显,甚至少数患者拒服激素。近年来应用中医和中西医结合治疗PMR,在减少激素用量、减轻毒副作用方面发挥着重要作用。兹总结近10年中医药治疗PMR的研究进展,以期对PMR的临床治疗和疗效评价有所裨益。颜真波 苏晓 2018河北中医2018,40,3:8
20无资料地区径流参证站分析选择显示文摘在无实测径流资料的地区,水电工程径流分析计算主要通过参证站与设计断面的集水面积缩放方法来推求,其关键就在于如何根据实际情况选择合适的设计参证站。以鲜水河支流甲斯孔流域的规划梯级电站工程径流分析计算作为典型例子,通过参证站、对比参证站及水文手册3种方法计算的参证站选择及径流成果合理性分析,提出了无资料地区设计参证站选择的一些建议。颜真梅 缪韧 刘芝 2011水利科技与经济2011,17,2:8
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