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| 1 | JAK2转基因骨髓造血干/祖细胞体外长期扩增调控及定向分化的研究显示文摘目的 探讨酪氨酸激酶JAK2转基因骨髓造血干 祖细胞体外长期扩增调控和定向分化潜能的可行性。方法 克隆了一个MSCV based逆转录病毒载体称作MGI F2Jak2 ,它编码一个绿色荧光蛋白 (GFP)和两个改进的FK5 0 6结合蛋白 (F36v)与JAK2组成的融合蛋白 ,F36v是二聚化化学诱导物AP2 0 187的结合位点。应用该载体转染GpE +86包装细胞株 ,将C5 7BL 6小鼠的骨髓细胞与照射过15 0 0cGy的GpE +86产毒细胞株共同培养实现基因转导。转导后的细胞在X VIVO 15培养体系中扩增 ,分为①空白对照组 ;②AP2 0 187组 ;③干细胞因子 (SCF)组 ;④AP2 0 187+SCF组。扩增的细胞用直接法标记藻红蛋白荧光素 (PE)结合的抗Sca1、c kit、CD34 、Gr1、CD1 1b、TER 119、CD4 1 、B2 2 0和CD3单克隆抗体以流式细胞仪检测 ,并进行定向分化、祖细胞集落培养和脾细胞集落形成单位 (CFU S)的研究。结果 只有AP2 0 187+SCF组可以持续地使转基因的骨髓造血干 祖细胞大量增殖 ,扩增 80d后细胞可达10 1 4倍 ,细胞倍增时间约 30h ,扩增细胞的表型为CD34 、c kit和Sca1等干细胞表面标志强阳性 ,其它细胞表面标志如Gr1、CD1 1b、TER119、CD4 1 、B2 2 0、CD3接近阴性。所扩增的细胞在不同的细胞因子组合下 ,可定向分化为粒细胞、巨噬细胞、红细胞、 | 赵声明 顾惜春 常乃柏 Tim Clackson C Anthony Blau | 2004 | 中华血液学杂志2004，25，2： | 8 |
| 2 | Direct clone characterization from plaques and colonies by the polymerase chain reaction 显示文摘 | Gussow D Clackson T | 1989 | Nucl Acids Res1989，17，10： | 1 |
| 3 | Regulated gene expression systems显示文摘 | Clackson T | 2000 | Gene Ther2000，7，： | 1 |
| 4 | Direct clone characterization from plaques and colonies by the poly merase chain reaction显示文摘 | Gussow D Clackson T | 1989 | Nucleic Acids Res1989，17，10： | 1 |
| 5 | Broad antitumor activity of ap23573,an roTOR inhibitor in clinical development 显示文摘 | Clackson T Metcalf CA Rivera VM | 2003 | Proc AmSoe Clin 0neol2003，22，22： | 1 |
| 6 | Interprofessional continuing health education for diabetic patients in an urban underserved community显示文摘 | Davis P Clackson J Henry C | 2008 | Interprof Care2008，221，： | 1 |
| 7 | Making antibody fragments using phage display libraries 显示文摘 | Clackson T Hoogenboom HR Griffiths AD | 1991 | Nature1991，352，6336： | 1 |
| 8 | A hot spot of binding energy in a hormone-receptor interface显示文摘 | Clackson T Wells J A | 1995 | Science1995，267，： | 1 |
| 9 | Making antibody fragments using phage display libraries显示文摘 | Hoogenboom H R Griffiths A D | 1991 | Nature1991，352，6336： | 1 |
| 10 | UV ozone modification of wool fiber surfaces显示文摘 | Bradley R H Clackson I L Sykes D E | 1993 | Applied Surface Science1993，72，2： | 1 |
| 11 | Regulated gene expression system显示文摘 | Clackson T | 2000 | Gene Therapy2000，7，： | 1 |
| 12 | Regulated gene expression systems 显示文摘 | Clackson T | 2000 | Gene Therapy2000，，7： | 1 |
| 13 | Making antibody fragments using phage display libraries显示文摘 | Clackson T Hoogenboom H R Griffiths A D | 1991 | Nature1991，352，： | 1 |
| 14 | Direct clone characterization from plaques and colonies by polymerase chain reaction 显示文摘 | GUSSOW D CLACKSON T | 1989 | Nucleic Acid Research1989，17，10： | 1 |
| 15 | In vitro selection from protein and peptide libraries显示文摘 | Wells J A | 1994 | Trends Biotechnol1994，12，5： | 1 |
| 16 | Regulated gene expression system gene therapy 显示文摘 | Clackson T | 2000 | 7(2):120-1252000，7，2： | 1 |
| 17 | Direct clone characterization from plaques and colonies by the polymerase chain reaction显示文摘 | Gussow D Clackson T | 1989 | Nucleic Acids Res1989，17，10： | 1 |
| 18 | A versatile synthetic dimeri- zer for the regulation of protein - protein interactions 显示文摘 | Amara JF Clackson T Rivera VM | 1997 | Proe Natl Aead Sei USA1997，20，10： | 1 |
| 19 | Making antibody fragments using phage display libraries显示文摘 | Clackson T Hoogenbcom H R Griffiths A D | 1991 | Nature1991，352，6336： | 1 |
| 20 | Direct clone characterization from plaques and colonies by the polymerase chain reaction显示文摘 | Güssow D Clackson T | 1989 | Nucleic Acids Research1989，17，10： | 1 |
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