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1美洲鲽抗冻蛋白基因的克隆及在E.coli中的表达显示文摘本文报告了美洲鲽抗冻蛋白基因的克隆及在E.coli中表达的研究,以质粒P^(CT5)作为抗冻蛋白基因的供体,p^(ORF-2)作为表达载体。用HpaⅡ酶从质粒p^(CT5)上切下抗冻蛋白基因片段,再经Bal 31酶,绿豆核酸酶处理,连接上BglⅡ接头,然后插入到p^(ORF-2)的BglⅡ位点上,借助于p^(ORF-2)上的β-半乳糖苷酶基因的活性,使含正确插入抗冻蛋白基因的克隆呈现出蓝色菌落,共获得4000多个转化子,其中有201个蓝色克隆。对于50个蓝色克隆提取质粒DNA,电泳后发现均大于p^(ORF-2)。用BglⅡ消化后,可以发现有300—1500bpDNA片段,同时确定了抗冻蛋白基因在p^(ORF-2)中的插入方向,对于正确插入的克隆作出部分限制性内切酶图谱,测定出插入的抗冻蛋白基因片段的DNA序列,然后将重组质粒从E.coli MH1000菌株转化到E.coliTK1046中,研究分析表达产物,SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳结果证明插入的抗冻蛋白的基因已表达,有明显的融合蛋白带,分子量大于β-半乳糖苷酶、是由大肠杆菌的外膜蛋白F,抗冻蛋白和β-半乳糖苷酶组成。融合蛋白含量占总蛋白的20%左右。杨志兴 Lender Force 1991生物技术1991,1,4:6
2美洲拟鲽抗冻蛋白基因在E.coli中表达的研究显示文摘本文阐述了美洲拟鲽抗冻蛋白基因在E.coli中表达的研究。用Hpa Ⅱ酶切pCT5质粒,分离出抗冻蛋白基因片段,再经Bal引酶、绿豆核酸酶处理,并连接上Bgl Ⅱ接头,插入到pORF-2表达质粒的BglⅡ位点上,筛选出正确插入方向的转化子,称pORF-AF。并对pORF-AF质粒作出部分限制性酶切图谱,测定出插入基因的DNA序列,同时用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析检测插入基因,在E.coli TK1046中的表达产物,发现在电泳图谱上有明显的融合蛋白带,分子量大于标准蛋白β-半乳糖苷酶是由大肠杆菌外膜蛋白F、抗冻蛋白和β-半乳糖苷酶组成。融合蛋白含量占总的菌体提取蛋白20%左右。杨志兴 Lender Force 1992遗传1992,14,1:4
3他们的搅拌站凭什么获得生态奖?显示文摘在美国国家沥青路面协会(NAPA)的2018年中会议上,密歇根州大急流城的Superior Asphalt公司凭借多年来对其搅拌站的环境管理工作,获得了卓越运营奖。在此之前,他们还获得了2017年的生态奖(Ecological Award)——不只是因为通过精简生产设施提高了生产率与安全,还因为他们展示了沥青行业对环境问题的深切关注。Sandy Lender 本刊 2019筑路机械与施工机械化2019,36,5:2
4Reverse Structural and Gap-Junctional Remodeling After Prolonged Atrial Fibrillation in the Goat显示文摘Jannie Ausma Huub M.W. van der Velden Marie-Hélène Lenders Erwin P. van Ankeren Habo J. Jongsma Frans C.S. Ramaekers Marcel Borgers Maurits A. Allessie 2003Circulation: Journal of the American Heart Association2003,,15:2
5Redefinition and Elaboration of River Ecosystem Health: Perspective for River Management显示文摘P. Vugteveen R. S. E. W. Leuven M. A. J. Huijbregts H. J. R. Lenders 2006Hydrobiologia2006,,1:2
6pheochromo-cytomas 显示文摘Lenders JW Eisenhorfer G Manmedli M 2005Lancet2005,366,9486:1
7Characterization of rubber partic1es and rubber chain elongation in Taraxacum koksaghyz显示文摘Schmidt T Lenders M Hi11ebrand A 2010BMC Biochemistry2010,11,1:1
8Time course of atrial fibrillation induced cellular structural remodeling in atria of the goat显示文摘Ausma J Lirjens N Lenders MH 2001J Mol Cell Cardiol2001,33,:1
9Reverse structural and gap-junctional after prolonged atrial fibrillation in the goat显示文摘Ausma J van der Velden HM Lenders MH 2003Circulation2003,107,15:1
10Pheochromoeytoma 显示文摘Lenders JW Eisenhofer G Mannelli M 2005Lancet2005,366,:1
11Cardiovascular manifestations of phaeochromocytoma显示文摘Prejbisz A Lenders JW Eisenhofer G 2011J Hypertens2011,29,11:1
12Systematic review: diagnostic procedures to differentiate unilateral from bilateral adrenal abnormality in primary aldosteronism显示文摘Kempers MJ Lenders JW van OL 2009Ann Intern Med2009,151,:1
13Cardiovascular manifestations of phaeochromocytoma 显示文摘Prejbisz A Lenders JW Eisenhofer G 2011J Hypertens2011,29,:1
14Mortality associ- ated with phaeochromocytoma 显示文摘Prejbisz A Lenders J W M Eisenhofer G 2013Hormone and Metabolic Re- search2013,45,2:1
15Pheochromocytoma and paraganglioma:an endocrine society clinical practice guideline显示文摘LENDERS J W DUH Q Y EISENHOFER G 2014J Clin Endocrinol Metab2014,99,6:1
16In vivo three- dimensional kinematics of the cervical spine during maximal axial rotation 显示文摘Salem W Lenders C Mathieu J 2013Man Ther2013,18,4:1
17Phaeochromocytoma显示文摘Lenders JW Eisenhofer G Mannelli M 2005Lancet2005,366,9486:1
18Biochemical diagnosis of pheochromocytoma: which test is best?显示文摘Lenders JW Pacak K Walther MM 2002JAMA2002,287,11:1
19Biochemical diagnosis of pheochromocytoma:which test is best显示文摘Lenders JW Pacak K Walther MM 0,,11:1
20Biochemical diagnosis of pheochromocytoma:which test is best?显示文摘Lenders JW Pacak K Walther MM 2002JAMA2002,287,:1
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