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1核因子-κB与大肠肿瘤细胞凋亡及增生的关系显示文摘目的:通过观察大肠腺瘤、腺癌和正常大肠组织中的细胞凋亡、细胞增生及其调控基因Bcl-2,Bcl-Xl,C-myc和核因子-κB的表达状态,探讨核因子-κB在大肠癌发病过程中的作用。 方法:利用DNA缺口末端标记技术和NF-κB,Bcl-2,Bcl-Xl,C-myc,PCNA蛋白免疫组化染色,原位检测30例大肠腺瘤和30例大肠腺癌中凋亡细胞、细胞增生和NF-κB,Bcl-2,Bcl-Xl,C-myc阳性表达细胞的密度和分布,以10例正常大肠组织作对照。 结果:NF-κB,Bcl-2,Bcl-Xl,C-myc蛋白的表达率和表达强度腺癌和腺瘤高于正常组织(70.9±7.2 vs 54.0±4.5 vs 30.6±2.4;78.2±8.3 vs 55.6±6.5 vs 11.0±1.9;77.3±6.5 vs 56.4±4.7vs 9.3±1.1;70.3±6.7 vs 50.1±4.2 vs 14.2±1.7,P<0.01),腺癌高于腺瘤(70.9±7.2 vs 54.0±4.5;78.2±8.3 vs 55.6±6.5;77.3±6.5 vs 56.4±4.7;70.3±6.7 vs 50.1±4.2,P<0.01)。腺瘤和腺癌中的凋亡细胞指数均高于正常组织(105.9±6.1 vs31.5±3.7 vs 10.0±1.5,P<0.01),腺瘤高于腺癌(105.9±6.1vs 31.5±3.7,P<0.01)。腺癌和腺瘤中的细胞增生高于正常组织(75.4±5.6 vs 50.7±4.9 vs 29.6±3.0,P<0.01);腺癌高于腺瘤(75.4±5.6 vs 50.7±4.9,P<0.01)。 结论:NF-κB在大肠肿瘤中促进细胞增生、抑制细胞凋亡。於亮亮 于皆平 冉宗学 于红刚 2002世界华人消化杂志2002,10,3:18
2Effects of vitamin E succinate on the expression of Fas and PCNA proteins in human gastric carcinoma cells and its clinical significance显示文摘AIM: To investigate the effects of vitamin E succinate (VES) on the expression of Fas and PCNA proteins as well as its clinical significance in human gastric carcinoma, and to explore the mechanism of VES-induced inhibition of gastric carcinoma cell growth. METHODS: Immunohistochemical methods were used to detect Fas and PCNA expression both in human gastric cancer SGC-7901 cells treated with VES at different doses and in human gastric carcinoma tissues. RESULTS: After the SGC-7901 cells were treated with VES at 5, 10, 20 mg/L for 48 h, the positive rates of Fas expression were 16%, 27% and 48%, respectively, significantly increased compared to that of control group (P<0.05); while the positive rates of PCNA expression in groups treated with different doses of VES were 20%, 18% and 7%, respectively, which were significantly decreased compared to that of the control group (P<0.05). In human gastric carcinoma tissues, the Fas positive expression rate was 42.4%(25/59), which declined with the decrease in the degree of tumor differentiation (P<0.05) and with the existence of lymph node metastasis (P<0.001). While the PCNA positive expression rate was 91.5%(54/59), no relationship was observed between PCNA expression and clinicopathologic parameters. CONCLUSION: VES inhibited the growth of gastric cancer cells by indudng Fas expression and inhibiting PCNA expression. It is, therefore, considered that the expression of Fas and PCNA genes, through tumor cell apoptosis and proliferation, respectively, may be useful as a clinical predictive index in the application of VES to gastric carcinoma therapy, where as Pas may be of more value than PCNA.KunWu LanZhao YaoLi Yu-JuanShan Li-JieWu 2004World Journal of Gastroenterology2004,10,7:8
3抑制性消减杂交构建凋亡肝癌细胞差异表达cDNA文库显示文摘目的应用抑制性消减杂交技术构建肝癌细胞凋亡消减杂交cDNA文库,以期克隆肝癌细胞凋亡相关基因。方法用三氧化二砷诱导人肝癌HCC-9204细胞凋亡,提取poly A' RNA,反转录合成 cDNA,消化成短片段后分成两组,分别与两种不同的接头连接,再与普通肝癌细胞的cDNA进行两次杂交及两次抑制性PCR扩增,将PCR产物与PT-Adv线性载体连接,转化大肠杆菌进行文库扩增,随机挑取克隆进行酶切鉴定,反向Northern blot分析差异基因的可靠性。结果成功地构建了具有高消减效率的人肝癌凋亡细胞cDNA文库,随机挑取200个克隆制备质粒并酶切分析,其中83.5%的克隆均具有100bp-600bp左右的插入片段,随机选取30个插入片段,分别以未凋亡和凋亡的肝癌细胞cDNA为探针,进行Reverser Northern Blot,其中21个被证明为差异表达的细胞凋亡相关基因cDNA片段。结论应用抑制性消减杂交技术成功构建了人肝癌凋亡细胞cDNA消减文库,为大批量筛选、克隆肝癌细胞凋亡相关的未知新基因奠定了基础,有助于了解细胞凋亡的分子机制。曾建新 王文亮 骆文静 王知力 2001世界华人消化杂志2001,9,11:7
4大肠腺癌组织Survivin蛋白的表达意义显示文摘目的:检测凋亡抑制蛋白Survivin在大肠腺瘤、腺癌组织中的表达,观察其与细胞增生、凋亡的关系,探讨Survivin基因表达在大肠癌发生、发展过程中的作用.方法:应用DNA缺口未端标记技术和免疫组织化学S-P法,原位观察20例正常大肠黏膜组织、35例大肠腺瘤和60例大肠腺癌组织中的凋亡细胞和Survivin、Ki-67蛋白阳性表达.结果:Survivin蛋白在正常大肠黏膜组织中不表达,在大肠腺癌和腺瘤中阳性表达率分别为60.0%和17.1%,二者比较差异有显著性(P<0.01).Survivin蛋白表达与大肠腺癌分化程度呈负相关,与Dukes’分期和淋巴结转移无明显相关.大肠腺癌Ki-67标记指数(labelingindex,LI)为39.1±10.4%,较腺瘤22.3±6.2%显著增高(P<0.01),大肠腺癌Survivin阳性组Ki-67LI25.1±7.6%与Survivin阴性组19.7±5.8%比较差异有显著性(P<0.01).大肠腺瘤和腺癌细胞凋亡指数(AI)显著高于正常大肠黏膜(P<0.01),高分化癌凋亡指数显著高于低分化癌(P<0.05),大肠腺癌Survivin阳性组凋亡指数0.85±0.52%与Survivin阴性组1.25±0.58%比较差异有显著性(P<0.01).结论:Survivin基因在大肠腺癌组织中表达上凋,通过促进肿瘤细胞增生和抑制凋亡参与大肠癌的发生、发展过程.检测大肠组织Survivin蛋白表达,对预测癌变及判断预后有重要意义.Survivin基因为肿瘤的基因治疗提供一理想靶点.肖军 邓长生 朱尤庆 2003世界华人消化杂志2003,11,5:6
5Hp^+消化性溃疡患者胃粘膜上皮细胞凋亡/增殖与Fas/FasL表达的关系显示文摘目的探讨幽门螺旋杆菌(Hp)感染对胃粘膜上皮细胞的凋亡/增殖与死亡受体(Fas)和死亡配体(FasL)表达的关系。方法采用原位末端标记(TUNEL)技术和免疫组化,对30例Hp感染的消化性溃疡患者和20例Hp阴性消化性溃疡患者胃粘膜上皮细胞凋亡/增殖情况和Fas/FasL的表达进行了检测和比较。结果 Hp感染的消化性溃疡患者胃粘膜上皮凋亡指数和增殖指数均明显高于Hp阴性消化性溃疡患者(凋亡指数和增殖指数分别为78.9±5.8vs9.0±1.8和46.5±7.7vs7.9±3.5P<0.01)。Fas主要在胃粘膜表面上皮细胞、固有层细胞、幽门腺细胞的表达,FasL主要在固有层细胞浸润的淋巴细胞表达,Hp感染的消化性溃疡患者胃粘膜上皮细胞Fas/FasL表达的阳性率显著高于Hp阴性消化性溃疡患者(分别为67.3±23.8%vs12.6±9.8%和47.3±27.2%vs2.4±1.7%P<0.01)。而且Fas/FasL 的表达与胃粘膜上皮凋亡和增殖呈正相关(0李瑛 李家邦 陈军 陈松 2001世界华人消化杂志2001,9,12:6
6DPC_4基因转染对结肠癌血管生成的影响显示文摘目的:研究DPC4基因转染对结肠癌血管生成的影响方法:利用脂质体介导转染技术建立表达Smad4蛋白的DPC4+-SW620(PcDNA-DPC4转染的SW620细胞)细胞模型;Western blot检测细胞中Smad4的表达;利用ELISA法检测细胞上清中VEGF蛋白的表达;利用RT-PCR检测细胞内VEGF mRNA的表达;利用皮下注射法建立裸鼠结肠癌移植瘤模型;利用免疫组织化学S-P法检测裸鼠肿瘤组织中VEGF的表达及微血管密度. 结果:建立了表达Smad4蛋白的DPC4+-SW620细胞系; DPC4+mSW620细胞,其Smad4蛋白表达于细胞质及细胞核,以胞质为主;DPC4+-SW620细胞其Smad4蛋白表达水平明显高于SW620细胞及PcDNA-SW620细胞(PcDNA3.1 转染的SW620细胞);DPC4+-SW620细胞其VEGF蛋白、VEGFmRNA水平明显低于SW620细胞及PcDNA-SW620 细胞(P<0.05);成功地建立了裸鼠结肠癌移植瘤模型; DPC4+-SW620组裸鼠肿瘤生长速度慢于SW620细胞组及PcDNA-SW620细胞组(P<0.05);DPC4+-SW620组裸鼠肿瘤重量低于SW620细胞组及PcDNA-SW620细胞组(P<0.05); DPC4+-SW620组裸鼠肿瘤组织VEGF蛋白、肿瘤组织微血管密度均低于SW620细胞组及PcDNA-SW620细胞组(P<0.05).罗庚求 李景和 陈永平 文继舫 肖德胜 胡忠良 杨晓静 郑晖 2004世界华人消化杂志2004,12,3:5
7CPP32在阿霉素诱导的胃癌耐药细胞的凋亡显示文摘目的探讨耐药细胞和药敏细胞中 caspase-3 mRNA、蛋白的表达以及他们相互之间的关系,试图阐明 caspase-3在诱导耐药细胞凋亡中的作用及意义.方法利用已有的胃癌耐药细胞系 SGC7901/08,通过 RT-PCR 研究 caspase-3的 mRNA 在细胞毒药物处理耐药细胞0h,24h 及药敏细胞0h,6h 时的表达,用 Western-blot 的方法讨论其蛋白在耐药细胞中0h,6h,24h,30h 的表达和药敏细胞中0h,6h,24h 的表达,DNA ladder 检测其特征性凋亡变化.MTT法检测细胞的存活率.结果耐药细胞在0h,24h 和药敏细胞在0h,6h 表达的caspase-3mRNA 无显著性差异,蛋白表达在耐药细胞中在6h 出现微量的表达,在30h 时出现更小片断;药敏细胞在6h 时出现小片断,在24h 出现完全裂解.细胞 DNA 分析表明耐药细胞在30h 出现典型的凋亡谱带;应用了 caspase-3抑制剂后细胞的凋亡延迟.药敏细胞在6h 出现典型的凋亡谱带,应用了抑制剂后也出现凋亡的延迟.结论提高耐药细胞的用药量仍然可以使耐药细胞出现凋亡,而且其凋亡的过程与耐药细胞相同,均有 caspase-3的激活,而抑制了 caspase-3的活性,凋亡的发生可被抑制或是延迟,其差别就在于耐药细胞需要较高的药物诱导浓度.耐药细胞与药敏细胞的凋亡机制从本质上并无显著的不同,其根本的差别可能在于凋亡发生前的诸多因素产生的差异.王少东 张振书 张杏泉 周殿元 2001世界华人消化杂志2001,9,10:4
8凋亡相关基因Fas和FasL在胰腺癌组织中的表达显示文摘目的:研究细胞凋亡相关基因Fas和FasL在胰腺癌组织中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学技术观察Fas及FasL蛋白的表达,用原位末端标记法检测细胞凋亡。结果:40例胰腺癌中Fas和FasL阳性30例,阳性率76·5%;用于对照的10例癌旁正常胰腺组织中Fas和FasL阳性1例,阳性率10%,Fas和FasL在胰腺癌组织中表达高于对照组,χ2=14·3463,P=0·0002;在正常胰腺组织连续切片中未发现TdT酶标记的DNA3/-OH末端,提示无细胞凋亡;在胰腺癌标本中用TdT酶标记的DNA3/-OH末端分析连续切片表明,大多数癌细胞未发生细胞凋亡,在40例胰腺癌中仅有3例发现约10%的癌细胞凋亡。结论:Fas和FasL参与了大部分胰腺癌的凋亡调变,胰腺癌在发生分化过程中,可能部分获得了逃逸Fas介导的凋亡功能。殷占新 韩国宏 时永全 孙安华 吴开春 丁杰 樊代明 2006中华肿瘤防治杂志2006,13,4:2
9肝动脉化疗栓塞治疗肝癌显示文摘肝动脉化疗栓塞(TACE)是不能手术切除肝癌的首选治疗方法,该技术诞生30 a来不断的完善和提高,目前已在全球得到广泛应用,尤其是近年来TACE技术有了长足的发展.螺旋CT的临床应用为TACE术前病情分析及制定切实可行的方案提供了有力的保障,同时也为TACE术后疗效判断和进一步治疗提供了理论指导.在具体操作上,个体化、大剂量的碘油可明显提高TACE治疗肝癌的疗效,改善患者的预后.经过长期的临床观察和经验积累,大家已经认识到由于肝癌血供丰富,TACE后新生血管的产生,侧支循环地建立等因素的制约,单纯的TACE不容易达到理想的治疗效果,综合治疗才是TACE技术的发展方向,例如配合经皮肝穿刺乙醇注射可明显提高治疗效果.同时基础研究是TACE技术进一步完善的前提,动物模型地建立为血管生成抑制剂的试用提供了机会,TACE后肝癌特异性蛋白质地检测,如Bax与Bcl-2、PCNA等,为临床工作指明了努力的方向.历史已经证明,经过大家的不断努力,TACE 技术正在逐渐完善和提高.冯勇 刘君 2004世界华人消化杂志2004,12,6:2
10非同位素法分析序列特异性DNA结合蛋白的三种方法显示文摘目的为在转录调控水平研究蛋白质异常表达机制,利用核转录因子与相应DNA调控序列特异结合的原理,非同位素法分析细胞内序列特异性DNA结合蛋白。方法凝胶滞留实验(EMSA)采用Dig-ddUTP末端标记DNA,核蛋白粗提或纯化产物与之液相结合后,PAGE分离核蛋白并转印至尼龙膜,化学发光法检测结果,Southwestern分析方法首先采用SDS-PAGE分离核蛋白粗提或纯化产物,蛋白转印至膜上后与Dig-dUTP末端标记的DNA杂交,酶免疫学检测结果,磁性DNA结合蛋白纯化法则将靶DNA与商品化磁性DNA粒子相连,用不同的连接、洗脱条件得到序列特异性靶DNA结合蛋白,银染显示核蛋白纯化结果。结果 EMSA中由于游离DNA与DNA-蛋白复合物有不同电泳迁移率,出现滞后DNA条带提示有识别该特定DNA序列的核蛋白存在,Southwestern分析除能提示核抽提物中有无可与DNA结合的核蛋白外,还提示其中核蛋白分子质量,核蛋白粗提物经磁性DNA亲和层析后DNA结合蛋白在银染时出现较纯的特异识别该DNA序列的核蛋白条带。结论 EMSA,Southwestern分析及磁性DNA层析是3种实用的研究DNA结合蛋白的方法,配伍应用具有简便、重复性好、敏感性和特异性高、无同位素污染等优点,是转录调控水平研究疾病相关基因异常表达的有效方法。高春芳 王皓 高国华 宓庆梅 孔宪涛 2001世界华人消化杂志2001,9,5:1
11Fas/FasL系统表达与结直肠癌的研究进展显示文摘细胞凋亡是指在一定生理和病理情况下,机体为维护内环境的稳定而发生的主动性细胞死亡过程,即程序性死亡.由死亡受体与其配体相互作用是引起细胞凋亡的主要途径之一,其中Fas/FasL系统是被认为最主要的介导细胞凋亡的信号转导途径.大肠癌是严重威胁人类健康的常见恶性肿瘤之一,大肠癌的发生、发展与细胞凋亡的调节失衡有关.本文就Fas/ FasL系统表达与结直肠癌发生发展的关系及相关方面研究作一综述.史勇 关景明 韩丹 2007世界华人消化杂志2007,15,36:1
12卵形鲳鲹TNFSF6的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备显示文摘为了研究卵形鲳鲹肿瘤坏死因子配体6(TNFSF6)的功能,本研究构建了TNFSF6的原核表达载体并制备了其多克隆抗体,首先通过PCR扩增技术扩增获得了TroTNFSF6的开放阅读框序列,并构建了原核表达重组质粒pET-TroTNFSF6,随后将重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21中,进行原核表达并获得重组蛋白rTroTNFSF6.结果显示,重组蛋白rTroTNFSF6大小约46.5 kDa,其最适诱导温度为20℃,诱导时间为8 h,IPTG的最佳浓度为0.6 mmol/L.可溶性分析表明,重组蛋白rTroTNFSF6主要在沉淀中,以包涵体的形式存在.将纯化后的重组蛋白rTroTNFSF6免疫小鼠以制备多克隆抗体,ELISA检测结果表明其效价高达1∶32000.本研究为进一步探究卵形鲳鲹TNFSF6的功能奠定了基础.王鹭 李海平 周永灿 孙云 曹贞洁 2020海南大学学报(自然科学版)2020,38,2:1
13c-Jun N-terminal kinase is required for vitamin E succinate-induced apoptosis in human gastric cancer cells显示文摘To investigate the roles of c-Jun N-terminal kinase (JNK)signaling pathway in vitamin E succinate-induced apoptosisin human gastric cancer SGC-7901 cells.KunWu YanZhao Gui-ChangLi Wei-PingYu 2004World Journal of Gastroenterology2004,10,8:1
14Fas-FasL系统在结肠癌研究中的进展显示文摘龙汉安 赵东晖 肖秀丽 马跃荣 2004中国煤炭工业医学杂志2004,7,3:0
15Survivin在结直肠癌中的表达及其临床意义显示文摘目的:探讨结直肠癌组织中凋亡抑制因子Survivin的表达及其与各临床病理因素的关系,评价Survivin在结直肠癌预后判断中的价值。方法:应用组织芯片结合免疫组织化学SABC法,检测126例结直肠癌组织中Survivin的表达情况,分析Survivin与各临床病理因素及预后之间的关系。结果:根据免疫组化染色强度和分级结果,所有病例被分为Survivin高表达组和低表达组。其中高表达组有26例(26/126,20·6%),低表达组有100例(100/126,79·4%)。Survivin在结直肠癌中表达情况与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、组织学类型、浸润深度、淋巴是否转移和Dukes分期均无显著相关。然而,高表达的Survivin与肿瘤复发、特别是血行转移显著相关,P<0·05。Survivin高表达组和低表达组的生存率用Kaplan-Meier方法评估,并用log-rank test进行比较,两组之间生存率差异具有统计学意义,P<0·05。多因素分析结果显示,在潜在的预后因素中(年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、组织学类型、淋巴是否转移和Dukes分期、Survivin表达),Survivin表达和Dukes分期被认为是结直肠癌根治术后独立预后因素。结论:Survivin的表达与结直肠癌的术后复发相关:结直肠癌术后复发率在Survivin高表达组明显高于Survivin低表达组,是与预后相关的独立危险因子。应用组织芯片高效检测临床组织样本具有快速、方便、经济、准确的优点。吴爱国 姚红兵 陈佑江 文明波 周魁平 2006中华肿瘤防治杂志2006,13,7:0
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