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| 1 | 银杏GbSAD基因对非生物胁迫的响应及原核表达显示文摘以悬浮培养的银杏愈伤组织为材料,采用荧光定量RT-PCR研究了Gb SAD基因在高盐和不同外源激素处理条件下的表达模式。结果表明:外施100μmol·L^(-1)水杨酸(SA)后,Gb SAD表达量发生显著变化;外施100μmol·L^(-1)脱落酸(ABA)、40μmol·L^(-1)乙烯利(ETH)、100μmol·L^(-1)茉莉酸甲酯(Me JA),Gb SAD表达量未呈现显著变化;外施200 mmol·L^(-1)氯化钠(Na Cl),Gb SAD表达量小幅度降低。Gb SAD组织表达分析表明基因在根、茎、叶、雄花和雌花中均有表达,在叶中表达量最高。SAD氨基酸序列同源比对发现,Gb SAD与其他被子植物的序列相似度较高,表明Gb SAD在进化上较保守。将银杏Gb SAD克隆到原核表达载体p ET-32a(+)中,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)并诱导表达。结果表明,Gb SAD蛋白在1 mmol·L^(-1)IPTG的诱导下,培养2 h即能实现融合蛋白的高效表达,为进一步纯化目的蛋白及研究其功能奠定了基础。 | 刘新亮 蔡金峰 王欢利 曹福亮 | 2015 | 东北林业大学学报2015，43，12： | 3 |
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