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1黑麦A,B染色体着丝粒区同源性的荧光原位杂交分析显示文摘显微切割了4条黑麦 B染色体着丝粒区片段,用连接接头扩增方法(linker adapter PCR,LA-PCH)扩增,得到100~2000bp的扩增产物,用 DIG-11-dUTP标记 PCR产物进行荧光原位杂交分析,结果表明,此PCR产物来源于黑麦B染色体着丝粒区且和A染色体着丝粒区有较高的同源性,为探讨B染色体起源于A染色体提供了佐证.张荣信 陈成彬 李秀兰 宋文芹 陈瑞阳 1999科学通报1999,44,5:10
2杉木单染色体的显微分离及体外扩增显示文摘The single chromosome of Cunninghamia lanceolata was successfully dissected by 'glass needles' under the micromanipulator in this research. The dissected Cunninghamia lanceolata chromosomes were digested by proteinase K in Eppendorf respectively. After degenerate olionucleotideprimedPCR amplification (DOPPCR), DNA fragments were acquired. The suitable method of making chromosome specimens for the microdissection and PCR amplification has been discussed.李湘阳 周坚 2002林业科学研究2002,15,6:5
3B染色体分子生物学研究进展显示文摘B染色体是独立存在于物种染色体组之外的一种特殊染色体,广泛存在于动物和植物中。近年来随着分子生物学技术手段的不断发展和完善,在分子水平上对B染色体有了更全面和深刻的认识。B染色体DNA组成与常染色体(A染色体)极为相似,大部分DNA序列是A、B染色体所共有的。B染色体同时还含有相当数量的特异性DNA序列,已发现的B染色体特异DNA全部为高度重复序列,多分布于B染色体的着丝粒和端粒部位。但是,目前对B染色体的了解还非常有限。祁仲夏 宋文芹 李秀兰 陈瑞阳 2002细胞生物学杂志2002,24,4:5
4植物染色体微分离微克隆技术研究进展与展望显示文摘染色体微分离与微克隆技术是细胞遗传学与分子遗传学相结合的一项桥梁技术 ,近年来在植物中的应用日渐活跃 .本文综述了该技术在植物中的研究进展 。吕柳新 黄代青 2001福建农业大学学报2001,30,3:4
5普通小麦5DL染色体分选及染色体BIBAC文库构建技术体系优化显示文摘【目的】优化小麦染色体流式分选及特定染色体BAC文库构建技术体系,为加速小麦基因组学研究提供技术支撑。【方法】采用双阻断法对中国春5DL端体根尖分生组织进行细胞周期同步化处理,结合机械匀浆法制备染色体悬浮液进行流式核型分析,分选染色体5DL及PCR检测,对小麦染色体分选技术体系进行优化。对复合峰分选产物BamHI酶切制备高分子量(high molecular weight,HMW)DNA,按10﹕1质量比与双元细菌人工染色体(binary-bacterial artificial chromosome,BIBAC)连接,电激转化感受态细胞DH10B,随机挑取100个重组子,经NotI完全酶切后脉冲电泳检测插入片段大小,优化小麦染色体BAC文库构建的技术体系。【结果】经1.25mmol·L-1羟基脲(hydroxyurea,HU)18h,恢复6h和1μmol·L-1氟乐灵(trifluralin)2.5h的顺序处理的小麦根尖分生组织,细胞有丝分裂指数可超过60%。流式核型分析表明,5DL端体的流式核型图由清晰的三个复合峰和两个单峰组成。PCR鉴定表明,其中一单峰确由5DL染色体组成。部分酶切复合峰染色体3~10min,可以获得50~300kb的HMWDNA。连接产物检测显示平均插入片段可达100kb左右,根据荧光通道值,估算5DL端体的大小约为482Mb,构建库容为19000个克隆的5DL端体特异文库即可达到约4倍的覆盖率。【结论】上述两项优化技术适用于小麦染色体的分选及染色体特异文库的构建。佘茂云 郭东伟 李连城 徐兆师 陈明 曲延英 马有志 2008中国农业科学2008,41,2:3
6染色体显微切割技术及其在植物中的应用研究进展显示文摘染色体微切割与微克隆技术首先在动物和人类上得到应用,随着PCR技术的发展,该技术在植物遗传与进化研究等方面也得到了较为广泛应用。本文就植物染色体显微切割和微克隆技术的原理、主要操作规程以及在植物中应用的研究现状、存在问题进行了综述。王黎明 朱玉丽 李兴锋 刘树兵 王洪刚 2007西北植物学报2007,27,5:3
7蓝粒小麦4Ag染色体的显微分离与鉴定显示文摘本研究采用显微分离技术从蓝粒小麦(Triticum aestivum L.(2n=6x=42)×Thinopyrum ponticum Liu&Wang(2n=10x=70))根尖细胞中期分裂相中分离出具有4Ag染色体形态特征的单条染色体,对分离后的细胞进行原位杂交(FISH),结果显示细胞中所剩的和显微分离到的单条染色体均为4Ag染色体。利用Sau3A接头介导的PCR方法对分离出的单条4Ag染色体进行体外扩增,扩增的DNA片段大小约为200~2000bp,主要集中在250~750bp之间。以DIG-dUTP标记的蓝粒基因组DNA为探针,与该扩增产物进行Southern杂交,结果表明显微分离出的染色体得到了有效的扩增。利用该分离染色体的PCR扩增产物为探针,对蓝粒小麦进行原位杂交,证明显微分离的染色体体外扩增片段确实来源于4Ag染色体。本研究拓宽了染色体显微分离的范围,为构建4Ag染色体文库和克隆位于该染色体上的重要农艺性状基因提供了新途径。任亮 郑琪 李滨 尚勋武 王化俊 李振声 2010农业生物技术学报2010,18,6:1
8染色体分离技术及其在植物中应用研究进展显示文摘染色体分离技术是分子遗传学和细胞遗传学的桥梁技术,得以在诸多领域广泛应用。就染色体分离技术的原理、主要流程及存在的主要问题进行了总结,同时对该技术在植物中应用研究进展进行了阐述。刘玉玲 王坤波 2010安徽农业科学2010,38,16:1
9鸡组织细胞端粒相关序列的克隆及序列分析显示文摘根据真核细胞端粒DNA序列的共同特点 ,设计了一条引物 (TELO0 2 ) ( 2 4nt)。按照TaKala克隆试剂盒的介绍方法 ,染色体基因组DNA经 HaeⅢ 和 HinfⅠ 两种限制性内切酶酶切后 ,先进行初级PCR(C1和TELO0 2 )扩增 ,得到的产物为模板再经过次级PCR(C2和TELO2 )扩增 ,得到的产物用试剂盒回收 ,并连接到PMD_1 8_T载体上 ,转化到JM1 0 9受体菌中。从阳性克隆中提取质粒DNA进行PCR和酶切鉴定 ,确认后进行序列测定 ,获得了一段 2 43sbp的鸡端粒相关序列。此序列与人第 7条染色体基因组末端序列的同源性为 63 .5 % ;与鼠端粒旁序列同源性为 63 .2 % ;而与MDV基因组序列的BamHⅠ酶切片段 76.6%同源。陈守义 阮承迈 李军涛 马永红 李鹏 张玉静 2003中国预防兽医学报2003,25,1:1
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