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| 1 | 30个枣树种质资源遗传多样性的ISSR分析显示文摘取30个枣树品种进行ISSR分子标记分析,其扩增条带分别进行琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,以期获得不同产地品种之间的遗传多态性。从100条选择扩增的ISSR引物中筛选出17条扩增清晰、重复性和稳定性好的引物,选取其中8条扩增条带多态性强的引物进行遗传聚类分析。结果表明:(1)1%琼脂糖凝胶电泳和5%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增总条带数分别为72和127条,其中多态性条带分别为51条和113条,多态性条带比率(PPB)分别为70.8%和88.9%。(2)基于UPGMA软件对30个品种的遗传差异性分析表明,8个ISSR引物可以将枣树品种之间遗传差异明显区分开来。两种电泳检测方法相比较,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测可获得较为精细的枣树品种间遗传图谱。其遗传相似系数范围在0.56~1.00之间,以0.62为最低遗传相似系数,可将30个枣树品种分成3个大类,6个亚类,为进一步研究枣树品种间分类、起源进化关系和分子辅助育种奠定基础。 | 侯思宇 孙朝霞 申洁 王玉国 韩渊怀 | 2011 | 植物生理学报2011，47，3： | 13 |
| 2 | 正交设计优化狭叶坡垒ISSR-PCR反应体系显示文摘以狭叶坡垒DNA为模板,利用正交试验分别对ISSR-PCR反应的MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定最佳退火温度和循环次数,最终确定狭叶坡垒最佳反应体系及扩增条件为:25μL体系中1×PCRbuffer,2mmol/LMgCl2,0.25mmol/LdNTPs,0.04U/μLTaq聚合酶,0.2μmol/L引物,4ng/μLDNA模板;最佳扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性45s,53℃退火45s,72℃延伸1.5min,共35个循环;72℃最后延伸7min。 | 代文娟 唐文秀 邓涛 丁莉 骆文华 黄仕训 | 2011 | 中国农学通报2011，27，18： | 6 |
| 3 | 岩白菜ISSR-PCR反应体系的优化显示文摘目的:优化岩白菜ISSR-PCR反应体系,为利用ISSR标记进行岩白菜遗传多样性研究服务。方法:采用5因子4水平正交设计法优化岩白菜ISSR-PCR反应体系。结果:五个因子从大到小的影响力排序结果为:dNTPs>Mg2+>模板DNA>引物=Taq酶。岩白菜ISSR-PCR最佳反应体系为:总体积25μL,内含10×PCR缓冲液2.5μL、2.5 mmol.L-1Mg2+、2.0 U Taq酶、0.2 mmol.L-1dNTPs、0.48μmol.L-1ISSR引物、125 ng模板DNA。结论:研究获得的最佳反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点,为利用ISSR标记技术研究岩白菜遗传多样性奠定了基础。 | 刘芸君 王仕玉 郭凤根 刘云芬 杨正安 张应华 | 2012 | 生物技术2012，22，1： | 5 |
| 4 | 红枣分子标记技术应用研究进展显示文摘红枣是山西等众多地区的主要经济作物,但传统的分类、命名及育种限制了其发展。随着分子标记技术的发展,其在枣的分类育种的应用方面显示出了良好的优越性。本文简要综述了分子标记技术在红枣种质资源和遗传育种研究中的应用,如在遗传图谱构建、亲缘关系及分类研究、遗传多样性、枣种鉴定及育种方面的应用,并分析了其在红枣研究中存在的问题和应用前景,以期为开展红枣分子遗传育种提供参考。 | 薄璇 侯艳霞 常宁 | 2020 | 中国果菜2020，40，9： | 5 |
| 5 | 石斛属植物ISSR扩增体系的建立与优化显示文摘旨在建立并优化石斛属植物的ISSR-PCR反应体系。通过对ISSR-PCR反应体系中主要影响因子模板DNA、dNTP、10×PCR Buffer、引物以及Taq DNA聚合酶分别进行单因素优化,最终建立一套适用于石斛属植物的扩增多态性高、稳定性强、带型清晰的ISSR最佳反应体系。20μL反应体系的适宜浓度及用量分别为:模板DNA 10 ng/μL 3μL,dNTP 2.5 mmol/L 1.5μL,10×PCR Buffer 3.0μL,引物4μmol/L3.5μL,TaqDNA聚合酶5 U 0.2μL。这一优化体系适用于石斛ISSR分析,为今后遗传多样性与亲缘关系分析、连锁图谱构建、QTL定位、基因定位与克隆等方面的研究提供了技术支撑。 | 陈美霞 朱文宁 孙焕 魏日凤 刘伟 | 2014 | 中国农学通报2014，30，10： | 4 |
| 6 | 胡麻专化型尖孢镰刀菌ISSR-PCR最佳反应体系的建立显示文摘采用正交试验设计原理,对尖孢镰刀菌ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素进行优化筛选,确立了适合尖孢镰刀菌ISSR分析的反应体系,即25μL PCR反应体积中含有20 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.4μmol/L引物、0.2 mmol/LdNTPs、4.0 mmol/L Mg2+和2.5μL10×buffer。PCR反应最佳退火温度根据引物而定,在此基础上筛选出12条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。此研究为今后利用ISSR技术分析尖孢镰刀菌遗传多样性和群体结构奠定了基础。 | 苑琳 刘姗姗 路福平 李子钦 张辉 | 2011 | 生物技术通报2011，27，7： | 2 |
| 7 | 辣椒疫霉菌SSR-PCR反应体系的建立及优化显示文摘为快速有效地确定辣椒疫霉菌SSR-PCR反应体系,采用正交优化设计方法,对影响辣椒疫霉菌SSR-PCR反应体系的4个主要因素(模板DNA、引物、d NTPs、Taq酶)在4个水平上进行优化。结果表明,不同因素下各水平浓度对SSR-PCR的反应结果均有显著性影响,最佳反应体系(20μL)为:1.0 ng模板DNA,0.8μmol/L引物,0.5μmol/L d NTPs,1.0 U Taq酶。PCR扩增程序为:94℃预变性2 min;94℃变性15 s,58.4℃退火30 s,36个循环,72℃延伸2 min,最佳循环数为36。利用该体系对12份辣椒疫霉菌进行验证,证明该体系稳定可靠,本试验为辣椒疫霉菌遗传多样性分析研究及分子育种奠定了理论基础。 | 陶丽婷 杨世鹏 王丽慧 李屹 李莉 | 2017 | 江苏农业科学2017，45，7： | 0 |
| 8 | 鸭梨Hc ISSR-PCR反应体系的优化显示文摘应用正交设计的方法对影响鸭梨Hc ISSR-PCR反应的4个因素(模板DNA、引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶)进行5个水平的优化试验,以DPS 7.55软件分析。结果表明:鸭梨HcISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:模板DNA 60 ng、引物浓度0.4μmol/L、dNTPs浓度0.1mmol/L、TaqDNA聚合酶2 U。 | 支婷 刘春琴 崔建州 杜克久 | 2011 | 北方园艺2011，，12： | 0 |
| 9 | 鸭梨ISSR-PCR反应体系的初步建立显示文摘以沧州泊头市鸭梨为试验材料,对鸭梨ISSR-PCR反应体系中的模板DNA用量、dNTPs浓度、引物浓度以及Taq酶浓度进行了探索,初步建立适合鸭梨ISSR-PCR反应体系为:在20μL反应体系中,含1×Taq PCR Buffer[1.5 mmol/L Mg2+]0、.15 mmol/L dNTPs、0.40μmol/L引物、40 ng DNA和1 U Taq酶。 | 支婷 杜克久 崔建州 刘春琴 | 2011 | 河北林果研究2011，26，1： | 0 |
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