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| 1 | 晚期糖基化终产物诱导大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化显示文摘目的探讨晚期糖基化终产物对大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化(EMT)的影响,建立大鼠腹膜间皮细胞EMT模型。方法体外培养的大鼠腹膜间皮细胞经含40 mmol/L晚期糖基化终产物(AGEs)、80 mmol/L AGEs的M199培养基分别培养48、72 h;以正常M199培养基和含80 mmol/LBSA的M199培养基为对照。采用相差显微镜观察细胞形态学改变,应用实时定量PCR法检测间皮细胞E-cadherin、α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGF mRNA的表达;应用Western blot检测E-cadher-in、α-SMA蛋白的表达;应用ELISA法检测间皮细胞TGF-β1、VEGF蛋白表达水平。结果①AGEs(40 mmol/L、80 mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞由典型的上皮细胞形态逐渐变为梭形及不规则形,类似肌成纤维细胞;②AGEs(40 mmol/L、80mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGF mRNA和α-SMA、TGF-β、VEGF蛋白表达水平显著增加(P<0.05);③AGEs(40 mmol/L、80 mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞E-cadherin mRNA和E-cadherin蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论 AGEs能上调α-SMA、Collagen I、TGF-β、VEGF表达和下调E-cadherin表达,AGEs诱导大鼠腹膜间皮细胞EMT。 | 邵维斌 彭淑娟 夏春英 李忻 荀康 | 2011 | 实用临床医药杂志2011，15，19： | 6 |
| 2 | Galectin-1在高糖腹透液诱导人腹膜间皮细胞转分化中的作用显示文摘目的:研究人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)中galectin-1的表达和在高糖腹透液(peritoneal dialysate solution,PDS)刺激下galectin-1表达的变化及其与上皮细胞-间充质细胞转分化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法:以HPMCs为研究对象,实验分为:正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),含1.5%葡萄糖的PDS(1.5%PDS)组,2.5%PDS组及4.25%PDS组。培养48 h后,采用实时定量PCR和Western印迹检测galectin-1,vimentin和zo-1 mRNA和蛋白的表达水平,分析galectin-1与vimentin和zo-1表达的相关性。使用阳离子脂质体转染galectin-1 siRNA至HPMCs内,实验分为:正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖),高糖组(4.25%PDS)和转染组(galectin-1 siRNA+4.25%PDS)。观察galectin siRNA干预后vimentin和zo-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果:不同浓度PDS刺激HPMCs 48 h后,与对照组比,galectin-1mRNA表达上调,尤以4.25%PDS组明显(P<0.05),其蛋白水平的表达均明显上调(P<0.05),且具有浓度依赖性;同时vimentin mRNA表达上调,以2.5%PDS组和4.25%PDS组更明显(P<0.05),其蛋白水平的表达均明显上调(P<0.05);而zo-1 mRNA和蛋白水平的表达均明显下调(P<0.05)。不同浓度高糖PDS刺激下galectin-1 mRNA和蛋白表达水平与vimentin mRNA和蛋白表达水平呈正相关(P<0.05);与zo-1 mRNA和蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。Galectin-1 siRNA干预后vimentin mRNA和蛋白水平的表达较高糖组明显下调(P<0.05),而zo-1 mRNA和蛋白水平的表达较高糖组明显上调(P<0.05)。结论:Galectin-1与高糖PDS诱导的HPMCs EMT相关,galectin-1 siRNA能够抑制高糖PDS诱导的HPMCs转分化。Galectin-1可能参与腹膜纤维化的发生环节,成为防治腹膜纤维化的新靶点。 | 刘映红 戴洪勤 刘伏友 孙林 肖力 刘虹 | 2012 | 中南大学学报(医学版)2012，37，2： | 3 |
| 3 | 晚期糖基化终产物对体外培养人腹膜间皮细胞上皮-间叶转化的影响显示文摘目的建立晚期糖基化终产物(AGEs)诱导体外培养人腹膜间皮细胞上皮-间叶转化(Epithelial-to-Mesenchymal Transition,EMT)的模型。方法体外培养的人腹膜间皮细胞经含40m M、80m M AGEs的M199培养基分别培养48、72小时;以正常M199培养基和含80m M BSA的M199培养基为对照。采用相差显微镜观察细胞形态学改变,运用实时荧光定量PCR法检测m RNA的表达情况;运用Western印迹法检测蛋白的表达情况。结果 (1)AGEs刺激后人腹膜间皮细胞由典型的上皮细胞形态逐渐变为梭形及不规则形,类似肌成纤维细胞;(2)AGEs刺激后,人腹膜间皮细胞胶原蛋白I(Collagen I)m RNA、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)m RNA和α-SMA蛋白表达水平显著增加(P<0.05);(3)AGEs刺激后,人腹膜间皮细胞E-钙粘蛋白(E-cadherin)m RNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论 AGEs能上调体外培养人腹膜间皮细胞α-SMA、Collagen I表达和下调E-cadherin表达,AGEs诱导人腹膜间皮细胞EMT。 | 邵维斌 路萍 夏春英 李忻 荀康 | 2017 | 临床医药文献电子杂志2017，4，32： | 2 |
| 4 | 水飞蓟宾对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞整合素连接激酶、转化生长因子β1及α平滑肌肌动蛋白表达的影响显示文摘目的研究水飞蓟宾对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)整合素连接激酶(ILK)、转化生长因子β1(TGF—β1)及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法胰蛋白酶消化法原代及传代培养RPMC,经鉴定后第2代用于实验。细胞随机分组:(1)正常对照组;(2)高糖组:不同质量浓度的葡萄糖(1.5%、2.5%、4.25%)作用24h;2.5%葡萄糖分别作用RPMC12、24、48、72h;(3)水飞蓟宾组:不同质量浓度的水飞蓟宾(5、10、20mg/L)预孵育2h,加入2.5%葡萄糖再作用24h。实时定量PCR检测ILK及α-SMA mRNA的表达。Western印迹法检测ILK蛋白表达。ELISA法检测细胞培养上清液中TGF—β1的表达。结果与正常对照组相比,高糖可以刺激RPMCILK及α-SMAmRNA的表达增高(均P〈0.05);高糖诱导RPMCILK及TGF-β1蛋白的表达增高(均P〈0.05);与高糖组相比,水飞蓟宾能显著降低高糖所致的RPMCILK、TGF-β1及d.SMA的高表达(均P〈0.05)。结论高糖可上调RPMCILK、TGF—β1及α-SMA的表达;水飞蓟宾可以抑制高糖所致的RPMCILK、TGF-β1及α—SMA的高表达。 | 孙立霞 马健飞 樊怡 杨丽娜 邓文艳 王力宁 | 2013 | 中华肾脏病杂志2013，29，4： | 2 |
| 5 | 中医药防治腹膜纤维化的研究进展显示文摘腹膜透析是治疗终末期肾脏病较为有效的方法之一,但是腹膜长期暴露于非生理性的腹膜透析液中(低pH、高浓度葡萄糖以及高渗透压等)会致腹膜纤维化,从而导致腹膜结构和功能的丧失,这是患者放弃腹膜透析的原因之一。现代药理学实验证明,中医药对于腹膜纤维化的防治研究主要集中在腹膜间皮细胞的上皮间质转化方面,通过对细胞因子的作用,保护和/或改善腹膜间皮细胞的功能防治腹膜纤维化。 | 张敏 赵菁莉 | 2014 | 现代生物医学进展2014，14，1： | 2 |
| 6 | 骨形成蛋白-7对晚期糖基化终产物诱导大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化的影响显示文摘目的探讨骨形成蛋白-7(BMP-7)对晚期糖基化终产物诱导大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化(EMT)的影响。方法晚期糖基化终产物诱导发生上皮-间叶转化的体外培养大鼠腹膜间皮细胞,分别经含5 ng/mL及80 mmol/L晚期糖基化终产物的M199培养基和含10 ng/mL BMP-7及80 mmol/L晚期糖基化终产物的M199培养基培养48 h,以含80 mmol/L晚期糖基化终产物的M199培养基为对照,应用实时定量PCR法检测间皮细胞E-cadherin、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Collagen I)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达;应用Western印迹法检测E-cadherin、α-SMA蛋白的表达;应用ELISA法检测间皮细胞TGF-β1、VEGF蛋白表达水平。结果 BMP-7作用后,上皮-间叶转化的大鼠腹膜间皮细胞E-cadherin mRNA和E-cadherin蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。BMP-7作用后,上皮-间叶转化的大鼠腹膜间皮α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGFmRNA和α-SMA、TGF-β、VEGF蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论 BMP-7能上调上皮-间叶转化的大鼠腹膜间皮细胞E-cadherin表达和下调α-SMA、Collagen I、TGF-β、VEGF表达,BMP-7能逆转晚期糖基化终产物诱导大鼠腹膜间皮细胞EMT。 | 邵维斌 朱莉 顾琳 夏春英 李忻 荀康 冯松涛 | 2012 | 实用临床医药杂志2012，16，22： | 1 |
| 7 | CRISPR/Cas9介导Smad3基因敲除对人腹膜间皮细胞增殖和凋亡的影响显示文摘目的:以CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建Smad3基因敲除的人腹膜间皮细胞(HPMC),研究Smad3在HPMC增殖和凋亡中的调控机制。方法:利用CRISPR Design软件设计gRNA,比对后合成,构建Smad3 gRNA-PX459质粒,用Lipofectamine 3000转染细胞,嘌呤霉素筛选后用有限稀释法获得单克隆细胞株,提取DNA进行PCR扩增后测序,同时提取总蛋白,采用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测蛋白表达情况;CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测凋亡相关蛋白表达。结果:成功构建Smad3稳定敲除的HPMC。Smad3基因敲除后,细胞增殖率无明显变化(P>0.05),而凋亡率从(7.92±0.26%)上升至(11.70±0.56%),促凋亡相关蛋白Bax表达量从(0.70±0.05)上调至(1.25±0.11)(P<0.05)。结论:Smad3基因在HPMC的凋亡中具有重要的调控作用。 | 梁靖梅 李福记 林鹏 廖蕴华 | 2020 | 广西医科大学学报2020，37，8： | 1 |
| 8 | microRNA-192在晚期糖基化终产物诱导人腹膜间皮细胞上皮-间叶转化中的作用显示文摘目的探讨microRNA-192(miR-192)对晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人腹膜间皮细胞上皮-间叶转化(EMT)的调控作用。方法人腹膜间皮细胞、转染miR-192抑制物后人腹膜间皮细胞和转染miR-192抑制物阴性对照的人腹膜间皮细胞在含AGEs的培养基培养72 h,以M199培养基和含80 m M BSA的M199培养基为对照,然后运用实时荧光定量PCR法检测miR-192和mRNA的表达情况,运用蛋白质印迹法检测蛋白的表达情况。结果在AGEs刺激后,人腹膜间皮细胞miR-192、胶原蛋白I(Collagen I)mRNA、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白表达水平显著上升(P<0.05),而E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。与转染miR-192抑制物阴性对照的人腹膜间皮细胞相比,转染miR-192抑制物的人腹膜间皮细胞miR-192、Collagen I mRNA、α-SMAmRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05),而E-cadherin mRNA和蛋白表达水平显著上升(P<0.05)。结论 AGEs可能通过上调miR-192表达诱导人腹膜间皮细胞EMT。miR-192抑物可能通过下调miR-192表达阻止AGEs诱导人腹膜间皮细胞EMT。miR-192在AGEs诱导人腹膜间皮细胞EMT中起重要调控作用。 | 邵维斌 路萍 夏春英 李忻 荀康 冯松涛 赵倩 | 2017 | 实用临床医药杂志2017，21，19： | 0 |
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