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1稳定高表达MT-1E基因人肾小管上皮HK-2细胞株的构建显示文摘目的成功构建高表达金属硫蛋白MT-1E基因的人肾小管上皮HK-2细胞株。方法利用转染技术将测序鉴定后的质粒转染至HK-2细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的HK-2细胞,荧光显微镜观察并记录,通过western blot技术对阴性对照细胞组和高表达MT-1E组进行MT-1E蛋白表达量鉴定。结果转染后的质粒测序结果包含MT-1E基因序列,嘌呤霉素筛选最小致死浓度为4μg/mL,高表达MT-1E组蛋白相对表达量为2.79±0.16,与阴性对照细胞组比较,差异有统计学意义(t=15.89,P=0.016)。结论本研究完成高表达MT-1E基因的HK-2细胞株构建,可用于后续相关分子生物学实验。李莎 罗磊 黄邵玲 李继猛 熊艳艳 朱雪芹 谢颖 2022广东医学2022,43,4:0
2三穗麻鸭MT基因克隆与序列分析显示文摘目的:为三穗麻鸭金属硫蛋白(MT)的结构与功能研究提供基础材料。方法:应用MT特异引物,通过RT-PCR从三穗麻鸭肝组织总RNA中扩增目的基因,克隆测序后应用生物信息学软件对该编码蛋白二级结构、亚细胞定位、跨膜结构及信号肽进行预测。结果:三穗麻鸭MT基因全长185bp,可编码61个氨基酸,其中半胱氨酸19个,丝氨酸9个,不含芳香族氨基酸;该基因序列与绿头鸭MT基因的核苷酸同源性为99%,氨基酸同源性达100%;该蛋白为可溶性蛋白,可分布细胞核内和核外,不含信号肽。结论:首次克隆出三穗麻鸭金属硫蛋白基因。张人俊 嵇辛勤 傅心亮 阮涌 汪德生 文明 2012生物技术2012,22,4:0
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