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| 1 | 大鼠骨骼肌卫星细胞体外培养的实验研究显示文摘目的 改进鼠肌卫星细胞体外培养方法 ,得到更高纯度的肌卫星细胞。方法 采用成年Wistar大鼠 ,将两步消化法加以改进 ,采用Ficoll分离和差速贴壁法两步纯化得到更高纯度的肌卫星细胞。所得细胞采用免疫组织化学方法加以鉴定。结果 此方法肌卫星细胞纯化率可达到98%。细胞增殖快 ,生长良好。结论 本实验成功建立了卫星细胞纯化方法 ,适用于心外科及相关科室开展细胞移植和基因治疗方面的研究。 | 夏家红 谢艾妮 徐磊 张凯伦 | 2005 | 中华实验外科杂志2005，22，2： | 34 |
| 2 | 骨骼肌失神经和再神经化时肌卫星细胞的变化显示文摘目的探讨骨骼肌失神经和再神经化时肌卫星细胞的变化规律,了解肌肉相应形态功能变化的细胞学机制。方法取1月龄Wistar大鼠27只制成失神经肌萎缩模型,于术后1~6个月,逐月取3只大鼠双侧小腿三头肌行组织学、组织化学等形态学检测;同时于术后1、2、3周和1~6个月逐月各取1只大鼠双侧小腿三头肌行细胞生物学检查。取1月龄Wistar大鼠35只制成神经再生模型,分别于失神经即时、术后1~6个月逐月取5只大鼠行神经植入手术,动态观察电生理指标变化至植入术后8周,然后进行形态学指标检测。结果骨骼肌失神经组显示肌湿重、肌细胞截面积迅速减少,胶原纤维含量逐渐增加,失神经后3~4个月DNA增殖期核所占百分比最高,后迅速减少,肌卫星细胞失神经3周数量开始明显增加,但2个月后急剧下降,至4个月时含量已极低。神经再生组神经植入后4~5周可引出肌诱发动作电位,以萎缩2~3个月后神经植入再生效果好,此时肌卫星细胞的分化能力较强。结论骨骼肌失神经支配4个月后卫星细胞数量极少导致肌肉进入萎缩的不可逆期;当失神经2~3个月时再神经化,增殖能力活跃的肌卫星细胞促使此时的萎缩肌功能恢复较好。 | 邬江 孙晓娟 钟世镇 徐达传 李主一 | 2006 | 中国修复重建外科杂志2006，20，10： | 21 |
| 3 | 组织工程用大鼠肌卫星细胞的体外筛选显示文摘目的 探讨不同年龄肌卫星细胞体外培养增殖、分化规律 ,以获得增殖能力强、分化能力适度的组织工程用卫星细胞群。 方法 用MTT法、免疫细胞化学技术及粘附细胞仪等手段 ,检测不同年龄段大鼠多代肌卫星细胞的增殖、分化能力和细胞数量。 结果 (1)单位重量细胞数与动物年龄成负相关 ;(2 )不同年龄组间细胞增殖能力从 7个月龄始明显递减 ;(3 )粘附细胞仪检测细胞分化能力 :2~ 3个月龄细胞传 12~ 13代后Desmin单抗荧光强度明显减弱。 8个月龄则是 7~ 9代后明显减弱。 结论 肌组织工程需要的卫星细胞体外扩增的临界传代数 :6个月龄以下的大鼠为 10~ 12代 ,7个月龄以上的大鼠为 5~ 7代。 | 邬江 孙晓娟 秦建强 钟世镇 李主一 | 2002 | 中华显微外科杂志2002，25，2： | 12 |
| 4 | 大鼠肌肉卫星细胞的分离、鉴定与诱导分化显示文摘肌肉卫星细胞是组织特异性干细胞,负责着骨骼肌的生长和再生。尽管发现卫星细胞的存在已经有50多年的历史了,但分离鉴定肌肉卫星细胞的方法仍然不稳定。本研究使用两步酶消化和差速贴壁相结合的方法分离大鼠(Rattus norvegicus)肌肉卫星细胞。免疫细胞化学染色显示,分离的大鼠肌肉卫星细胞高表达Desmin;通过RT-PCR鉴定所分离的细胞表达肌源性干细胞因子Myf5及Myod1;成肌诱导48h后,卫星细胞开始形成多核的肌管;成脂诱导1周后,细胞内开始出现脂滴,2周后充脂细胞明显增多。研究结果提示,分离的卫星细胞具有肌源性,有发育形成肌管和向成脂细胞分化的能力。 | 焦泽华 魏著英 白春玲 段彪 程磊 李光鹏 | 2011 | 农业生物技术学报2011，19，2： | 9 |
| 5 | 肌卫星细胞的研究现状及应用前景显示文摘 | 赵志强 刘强 韩树峰 | 2004 | 山西医科大学学报2004，35，1： | 6 |
| 6 | Dispase在成年鼠骨骼肌干细胞纯化中的价值显示文摘目的寻找一种最佳的骨骼肌干细胞分离及纯化方法。方法采用成年雌性SD大鼠,分别采用二步消化法和Dispase消化法分离肌干细胞,然后用差速贴壁技术纯化肌干细胞,骨骼肌肌动蛋白(α-sarcometricactin)免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。结果Dipase组肌干细胞的数量明显多于二步消化法组,且细胞的生长速度也明显较后者快,而衰老速度则明显慢于后者。结论Dipase可明显减轻细胞的损伤,提高肌干细胞的数量和质量,是一种最佳的细胞分离酶。 | 姚启盛 叶章群 陈丛波 王小康 王卫民 陈立新 | 2004 | 郧阳医学院学报2004，23，6： | 5 |
| 7 | 小鼠成肌细胞的体外培养及生物学特性的观察显示文摘目的 :对新生小鼠成肌细胞进行体外培养 ,并动态观察其成肌过程的生物学特性。方法 :分离乳鼠四肢骨骼肌 ,用DMEM/F -12培养液对成肌细胞进行体外原代培养 ;倒置显微镜下观察成肌细胞成肌过程的生物学特性 ;应用透射电镜及免疫细胞化学技术观察小鼠成肌细胞的超微结构及结构蛋白的分布。结果 :本实验方法培养的成肌细胞生长分化良好 ,最终由单个核细胞变为多个核细胞 ;电镜下显示 ,成肌细胞胞浆细胞器呈逐步发育成熟过程 ,成熟的肌细胞富含束状排列的肌丝。免疫细胞化学技术显示 ,细胞呈α -肌动蛋白阳性 ,阳性产物多分布在细胞质中。结论 :α | 汪涛 唐军民 舒丹毅 唐岩 伊焕发 | 2002 | 天津医科大学学报2002，8，2： | 4 |
| 8 | 大鼠眼外肌成肌细胞的增殖及分化特征显示文摘目的:完善眼外肌成肌细胞体外培养、鉴定的方法及观察其生物学特性。方法:实验于2005-02/08在青岛大学医学院附院中心实验室(省级实验室)完成。取出生后3~7d的大鼠,通过大鼠眼外肌细胞的取材、分离、消化、培养等技术,观察细胞的形态、生长曲线、细胞融合率,观察大鼠眼外肌卫星细胞的增殖与分化能力,利用成肌细胞标记物α-横纹肌肌动蛋白、中间丝结蛋白免疫细胞化学染色对所获得的细胞进行鉴定。结果:①成肌细胞的生长情况:在生长培养基作用下,细胞增殖旺盛;在分化培养基条件下,细胞分化良好,可融合成肌管。②成肌细胞融合率:在24h和48h融合率提高明显,72h达高峰,之后不再变化。③细胞免疫化学检测结果:α-横纹肌肌动蛋白和中间丝结蛋白免疫细胞化学染色阳性。结论:体外培养的大鼠眼外肌卫星细胞具有良好的增殖与分化能力,其生物学特征同骨骼肌卫星细胞。 | 张立贵 王传富 黄晓辉 | 2007 | 中国组织工程研究与临床康复2007，11，24： | 3 |
| 9 | 成年大鼠骨骼肌卫星细胞原代培养及鉴定显示文摘目的 :探讨骨骼肌卫星细胞体外培养、鉴定的方法。方法 :采用I型胶原酶和胰蛋白酶两步消化法分离大鼠骨骼肌卫星细胞 ,经差速贴壁法纯化后 ,在培养液中进行培养 ,观察不同血清浓度下 ,卫星细胞生长融合的情况。倒置显微镜观察细胞形态 ,利用结蛋白免疫细胞化学染色方法鉴定肌卫星细胞。结果 :细胞经过两步消化和差速贴壁后 ,纯度在90%以上 ,在生长培基中 ,细胞分裂增生 ;在融合培基中 ,细胞发生融合 ,形成肌管。结论 :成年大鼠肌卫星细胞在不同的培养条件下可增生或分化。 | 王邦茂 陈鑫 张文治 苏心 | 2002 | 天津医科大学学报2002，8，4： | 2 |
| 10 | 肌卫星细胞体外培养及其对胰岛素样生长因子Ⅰ刺激的反应显示文摘目的原代分离、纯化、培养大鼠肌卫星细胞,观察体外培养肌卫星细胞的增殖与分化特性及对类胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)刺激的反应。方法选用Wistar大鼠,切取双下肢及背部肌肉,两步酶消化法分离卫星细胞,不连续密度梯度离心法纯化后体外培养,观察其生长与分化特性,绘制生长曲线及融合率曲线,MTT法测定卫星细胞对不同浓度IGF-Ⅰ刺激的反应,并对其生长分数及融合率给予观察。结果此方法可以获得足量、纯度较高的肌卫星细胞。结论适宜浓度(100ng/ml)的IGF-Ⅰ对肌卫星细胞有较强的促增殖及促分化作用。 | 李钢 刘强 | 2006 | 中华创伤杂志2006，22，7： | 2 |
| 11 | 低浓度混合酶改良消化法体外培养SD大鼠面颌肌细胞显示文摘目的观察低浓度混合酶改良消化法体外培养SD大鼠面颌肌细胞的结果。方法分离SD大鼠颌面部咬肌区肌肉组织,先用0.1%的Ⅰ型胶原酶消化后再用0.1%的Ⅰ型胶原酶和0.125%的胰蛋白酶(1∶1)低浓度混合酶消化法分离细胞,差速贴壁法纯化,所得细胞进行结蛋白(Desmin)免疫组化染色。结果体外培养所得细胞Desmin胞质阳性率达95%。结论采用低浓度混合酶消化和差速贴壁法体外培养SD大鼠面颌肌细胞可获得纯度高、产量高、活性强、稳定性好的面颌肌细胞。 | 殷忠平 许艳华 徐芸 果利 | 2012 | 山东医药2012，52，42： | 2 |
| 12 | 基质细胞衍生因子受体4在肌损伤组织肌卫星细胞的表达显示文摘目的探讨注射心脏毒素后肌损伤的肌卫星细胞中基质细胞衍生因子受体4(CXC chemokine receptor4,CXCR4)的表达情况,为进一步研究肌肉退行性疾病的分子学发病机制和治疗方法提供理论依据。方法取C57雄性小鼠12只,于左侧股四头肌局部注射心脏毒素(5μg/只),建立小鼠肌损伤模型;右侧股四头肌作为自身对照。于注射后1、4d及1、2、4、6周处死小鼠,分离两侧股四头肌,取材行HE染色、免疫组织化学染色及RT-PCR检测分析CXCR4表达情况。结果HE染色示肌肉组织从损伤修复到再生的全过程。免疫组织化学染色检测示注射心脏毒素后1、4d和1、2、4、6周,肌肉组织内CXCR4表达分别为1955.6±150.3、2223.2±264.3、2317.6±178.7、3066.5±269.6、1770.9±98.7和1505.7±107.1,与正常肌肉组织(640.3±124.0)比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。RT-PCR检测显示,正常肌肉组织、注射心脏毒素后1、4d和1、2、4、6周肌肉组织内CXCR4mRNA表达分别为0.349±0.006、0.822±0.013、0.882±0.025、1.025±0.028、1.065±0.041、0.837±0.011和0.777±0.015;肌损伤后各时间点与正常肌肉组织比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论CXCR4可能在肌肉损伤修复过程中起重要作用。 | 李小雷 黄厚今 周光前 杨志明 解慧琪 邓力 | 2009 | 中国修复重建外科杂志2009，23，1： | 1 |
| 13 | 针刺对大鼠骨骼肌损伤后肌卫星细胞的影响显示文摘本文采用实验法、文献资料法等方法,将采用打击装置造成后下肢腓肠肌钝挫伤的大鼠随机分为即刻组、针刺治疗组、自然愈合组。观察大鼠骨骼肌钝挫伤后针刺治疗和自然愈合在不同时期肌卫星细胞增殖的情况,了解针刺对骨骼肌损伤后愈合进程和质量的影响,探讨针刺治疗骨骼肌损伤的可能机制。结果发现:1.经针刺治疗后,急性骨骼肌损伤大鼠骨骼肌卫星细胞增殖在第二天达到峰值,而后呈下降趋势。2.自然愈合的大鼠骨骼肌卫星细胞增殖在第一到四天呈递增情况,在第四天达到峰值后呈缓慢递减趋势。针刺治疗对大鼠骨骼肌损伤后肌卫星细胞增殖有良好促进作用,有助于肌卫星细胞增殖峰值的提前到来,从而加速骨骼肌的再生,促进损伤修复。 | 覃巾毓 葛运雨 | 2012 | 现代交际2012，，12： | 1 |
| 14 | 大鼠骨骼肌卫星细胞体外原代培养的试验研究显示文摘对大鼠骨骼肌卫星细胞体外原代培养方法进行研究,以得到高纯度的骨骼肌卫星细胞,为转基因等试验研究提供充足的试验材料。用0.1%Ⅱ型胶原酶消化法从18日龄SD大鼠后腿部肌肉分离出骨骼肌细胞并培养5日,再利用差速贴壁法分离得到高纯度的骨骼肌卫星细胞。研究结果表明,采用此方法分离得到纯度较高的骨骼肌卫星细胞,细胞增殖快,生长良好。 | 赵燕 管武太 | 2007 | 山西农业大学学报(自然科学版)2007，27，3： | 1 |
| 15 | 胎鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养、纯化与鉴定显示文摘目的探讨胎鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养、纯化与鉴定的方法,为胎儿和早产儿骨骼肌发育程序化的研究提供实验基础。方法Sprague—Dawley大鼠孕18d时剖宫取出胎鼠,手术显微镜下取胎鼠四肢骨骼肌肌肉,采用I型胶原酶和胰蛋白酶两步消化法分离胎鼠骨骼肌卫星细胞,差速贴壁法进行纯化。原代培养的生长培养基为(DMEM/F12+20%FBS+10%HS+5ng/mlbFGF)。分化培养基为(DMEM/F12+2%HS)。CCK-8法绘制胎鼠骨骼肌卫星细胞生长曲线图,细胞免疫组化染色鉴定纯化后细胞的肌源性标志蛋白Desmin,观察分化培养基条件下骨骼肌卫星细胞的成肌分化特性。结果胎鼠原代骨骼肌卫星细胞在培养的第3天进入对数生长期,5~6d达增殖平台期;纯化后的细胞90%以上表达结蛋白(Desmin)。在分化培养基的诱导下细胞之间相互融合形成具有自发节律性收缩特性的多核肌管。结论采用消化法和差速贴壁法分离纯化胎鼠骨骼肌卫星细胞,能够获得高活性和高纯度的具有成肌分化能力的骨骼肌卫星细胞。 | 余慕雪 戴杰民 郭楚怡 卢珍通 杨佩军 庄思齐 | 2016 | 中国生育健康杂志2016，0，4： | 0 |
| 16 | 增龄对成体肌肉干细胞生长能力的影响显示文摘目的:探讨不同年龄成体肌肉干细胞—卫星细胞体外培养增殖、分化规律,了解卫星细胞生长能力与年龄的关系。方法:用MTT法、免疫细胞化学技术及粘附细胞仪等手段,检测不同年龄段大鼠多代肌卫星细胞的增殖、分化能力和细胞数量。结果:(1)单位重量细胞数与动物年龄呈负相关;(2)不同年龄组间细胞增殖能力从7月龄始明显递减,分化能力从11月龄始减弱。结论:卫星细胞数量与年龄呈负相关,老年大鼠卫星细胞生长能力显著减弱。 | 邬江 孙晓娟 钟世镇 秦建强 李主一 | 2006 | 西南国防医药2006，16，2： | 0 |
| 17 | 自体筋膜作为骨骼肌再生支架的实验研究显示文摘目的 探讨自体筋膜作为支架材料在体内重建肌肉的可行性。 方法 采用28只新西兰兔的双后腿建立胫骨前肌中段缺损模型。随机选取一侧,植入用自体阔筋膜制成的支架和肌肉微粒(肌肉支架组);另一侧分为3部分: 10只腿缺损处植入筋膜支架(支架组), 10只腿缺损处植入肌肉微粒(肌肉组), 8只腿缺损不作处理(缺陷组)。术后2、3、4、6、9周分别解剖观察移植成活率,并切取标本行组织学及超微结构观察和结蛋白免疫组织化学鉴定。各时相点切取肌肉支架组和支架组移植物中段标本,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术进行α肌动蛋白DNA相对定量分析。结果(1)术后第4周肌肉支架组缺损愈合处形态接近正常,移植成活率达93. 33%,其他组相对较差。(2)肌肉支架组术后2—3周细胞增生活跃,结蛋白阳性率较高,α肌动蛋白DNA相对丰度较大,与支架组比较,差异均有统计学意义(P<0. 05 ). 结论 以自体筋膜为支架促使肌肉组织再生具有可行性。 | 汪道新 朱志祥 张力勇 黄志斌 关弘 | 2005 | 中华烧伤杂志2005，21，3： | 0 |
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