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1荔枝ACS1基因的分离及其与幼果脱落的关系显示文摘【目的】植物中ACC合成酶(ACC synthase,ACS)和ACC氧化酶(ACC oxidase,ACO)是调控乙烯形成的关键酶。荔枝ACO基因已分离获得,在此基础上,笔者进一步从荔枝中分离出ACS基因,进而分析该基因与荔枝幼果脱落的关系。【方法】通过RT-PCR和RACE扩增技术相结合的方法分离荔枝ACS基因;利用遮阴、环剥摘叶和100 mg·L-1NAA处理促进荔枝幼果脱落,进而用实时荧光定量PCR分析荔枝ACS基因与幼果脱落的关系。【结果】首次从荔枝中分离出ACS基因,命名为Lc-ACS1。Lc-ACS1推导的氨基酸序列与多种植物的ACS蛋白有较高的同源性,其中与甜橙和蓖麻的同源性最高,为76%。该基因包含ACS基因特有的11个不变氨基酸残基和7个保守区。遮阴、环剥摘叶和100 mg·L-1NAA处理都可以显著促进荔枝幼果脱落,且环剥摘叶后幼果乙烯释放量高峰出现在第2天。Lc-ACS1基因在任何一种促进荔枝幼果脱落过程中的表达量都高于对照,且基因表达量的高峰都早于相对落果率高峰。【结论】LcACS1基因可能是调控荔枝幼果脱落中的关键基因。吴建阳 李彩琴 李建国 2017果树学报2017,34,7:12
2罗汉果乙烯合成酶SgA CS1基因的克隆与表达分析显示文摘在转录组unigene序列基础上,结合RACE技术,从罗汉果总RNA中克隆乙烯合成关键酶-1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶1(ACS1)全长cDNA,同时,应用hi TAIL PCR技术获得Sg ACS1的DNA全长。通过实时荧光定量PCR检测该基因在雄株、雌株以及Ag^+处理后的雌株在取/授粉前后的叶、茎、芽、花蕾、花中的相对表达量。克隆得到1 749 bp的cDNA全长,最长开放阅读框为1 530 bp,编码509个氨基酸,命名为Sg ACS1(GenBank登录号为KX620760),编码蛋白与同源物种苦瓜的相应蛋白序列相似性为86%,该蛋白具有磷酸吡哆醛转移酶结构域和转氨酶结合结构域,属于天冬氨酸转氨酶家族;获得Sg ACS1的DNA全长为3 245 bp,其中含有3个内含子,该内含子和5'UTR含有多个高水平转录调控因子、激素响应元件和环境胁迫相关的作用元件,暗示该基因参与转氨反应、生物体内乙烯的合成代谢等生物学过程,并且与其他激素共同发挥作用维持机体的正常生命活动。实时荧光定量PCR结果表明,Sg ACS1在罗汉果各个部位和时期均有表达,其中在授粉后的雌株花蕾中相对表达量最高,其次是授粉前后雌株的花和取粉前后雄株的芽,而Ag^+处理后的雌株在授粉后的花蕾和芽中的相对表达量最低,说明该暗示罗汉果Sg ACS1参与花芽形成、雄蕊原基分化、蕾中雄蕊发育以及雌花形成,Sg ACS1在雌株蕾中受到授粉或银离子诱导上调表达。曾娜霞 胡姗姗 周琼 李刚 闵丹丹 2017分子植物育种2017,15,3:5
3葡萄MAPKK基因家族的识别与分析显示文摘丝裂原活化蛋白激酶(MAPKK)是编码丝氨酸/苏氨酸特异的蛋白激酶,MAPKK基因家族对植物生长发育细胞周期调控和生物与非生物胁迫响应重要作用。已在一些物种中对这个基因家族进行了识别与分析,并对其如何参与胁迫条件下信号传导进行了探讨。在这项研究中,共识别出了葡萄基因组中5条MAPKK基因,并将其基因分别定位在第9、11、11、14和17条染色体上。对5条MAPKK基因序列内含子、外显子等结构信息进行了初步的比较分析。结果表明,它们可能存在功能上的分化。系统发生分析表明,葡萄和拟南芥的MAPKK基因亲缘关系近于其和水稻之间的亲缘关系;结合拟南芥MAPKK基因分组信息,将XP_002273313.1、XP_002280877.1、XP_002283491.1归为A组,而将XP_002274862.1和XP_002283080.1分别归位B组和D组。本研究结果为进行后续葡萄MAPKK基因和葡萄果实膨大相关方面的研究提供了有价值的参考。张演义 吕福堂 张全军 房经贵 2015西南农业学报2015,28,4:3
4无花果ACS1基因RNAi植物表达载体构建显示文摘通过构建无花果ACS1基因的RNA干扰植物表达载体,为研究ACS基因的功能及采用生物技术方法培育无花果耐贮新品种奠定基础。本试验根据已克隆的无花果ACS1基因序列及植物表达载体pBI221、pBI121的酶切位点,设计2对带相应酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,进行PCR扩增,获得正、反向扩增片段,分别正、反向插入到pBI221载体中的CaMV35S启动子和gusA基因之间,构建成无花果ACS1基因的RNAi中间表达载体。再将中间载体中的正、反向片段和gusA基因以双酶切方式连接到表达载体pBI121上,构建成pBI121-RNAi-ACS1植物表达载体。通过各种限制性内切酶的酶切鉴定,成功构建了无花果ACS1基因的RNA干扰植物表达载体。唐霞 张帅 马俊莲 张子德 2013河北农业大学学报2013,36,4:2
5茄子1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶基因的生物信息学及其响应逆境胁迫的表达分析显示文摘基于课题组前期得到的茄子低温转录组数据,筛选到1个1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)合成酶基因SmACS。研究发现,SmACS编码的氨基酸序列与大豆ACS的同源性最高,并且含有ACC合成酶特有的7个保守结构域和11个不变的氨基酸残基。该SmACS基因位于第8号染色体上,全长3550 bp,编码序列长1437 bp,含3个内含子和4个外显子,属典型的ACS基因结构。其编码的蛋白质由478个氨基酸组成,分子质量为54.03 kDa,等电点为6.48,亲水系数为-0.206,是一种定位于细胞质的不稳定的非分泌型亲水蛋白;该蛋白的主要构成元件为α-螺旋和无规则卷曲,具有保守的Aminotran_1_2结构域,含有39个磷酸化位点,其中以丝氨酸和苏氨酸为主。SmACS蛋白主要与ACC氧化酶等发生相互作用。该基因启动子中含有脱落酸、乙烯、冷胁迫、水杨酸及伤口响应等有关的顺式作用元件。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)结果证实,SmACS基因受低温、高温、干旱和盐诱导而上调表达,其中尤以低温胁迫诱导效果最为显著。上述结果可为进一步研究茄子SmACS基因的功能奠定理论基础。万发香 王连臻 高军 2021浙江大学学报(农业与生命科学版)2021,47,3:1
6蓝莓Vc ACS基因的克隆与表达分析显示文摘1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶基因(ACS)编码的蛋白是控制植物体内乙烯合成的关键限速酶,在植物发育、果实成熟、性别决定及抗逆境等过程中都发挥着重要调控作用。该研究采用RT-PCR和RACE技术首次从高丛蓝莓中获得了ACS基因的全长cDNA序列。该基因的cDNA序列全长为1747bp,其开放阅读框长为1323bp,编码440个氨基酸,命名为Vc ACS。Vc ACS为亲水性蛋白,无跨膜结构域,预测定位于细胞核或细胞质,含有AAT_like-吡哆醛-5-磷酸保守结构域。进化树分析表明,蓝莓Vc ACS蛋白和中华猕猴桃ACS蛋白的亲缘关系最近。转录表达水平检测结果表明,VcACS基因主要在花托、花瓣、雄蕊和根中表达,在花托中表达量最高,在嫩茎有低水平的表达,在叶中不表达。PEG6000(干旱)、低温和乙烯利都能诱导Vc ACS基因的表达上调,但表达水平存在差异。该研究成果为蓝莓ACS基因的进一步利用奠定了基础。陈秋红 韦鹏飞 喻泱华 谭攀 郭崇炎 王志龙 2018安徽农学通报2018,24,21:0
7粉蕉MbACS7基因的克隆及表达分析显示文摘乙烯合成及其效应是决定香蕉果实成熟的核心要素,其中1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)合成酶(ACS)是乙烯合成途径的限速酶。粉蕉果实成熟速度较快,保鲜难度较大。研究粉蕉ACS家族基因的特征和表达模式可为控制香蕉果实成熟进程和延长货架期提供理论依据。本研究从粉蕉中克隆获得一个全长序列为1458 bp的目的片段,编码485个氨基酸,分子量为54.751 kD,具有PLN02450保守结构域(37~1377氨基酸),属于ACS基因家族蛋白,因此被命名为MbACS7。理化性质分析表明MbACS7蛋白亲水且不稳定。进化分析表明MbACS7蛋白预测的氨基酸序列与苦瓜(Momordica charantia)ACS蛋白的氨基酸序列(CAE53271.1)遗传关系较近。瞬时表达分析表明MbACS7蛋白在烟草表皮细胞的细胞核中强烈表达,表明该蛋白可能在细胞核中发挥着重要的生理功能。实时荧光定量表达分析表明MbACS7基因在粉蕉果实成熟期表达量最高,为果实发育初期的900多倍。本研究为进一步解析MbACS7基因在粉蕉果实乙烯生物合成中的功能奠定基础,也为改良香蕉果实贮藏性提供基因资源。符思颖 李美英 颜彦 田丽波 商桑 胡伟 2023分子植物育种2023,21,16:0
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