|
|
|
题名
|
作者
|
年代
|
出处
|
被引量
|
| 1 | 维生素C生产技术显示文摘介绍了维生素C的性质、功能和用途。综述了维生素C生产技术的演变过程和发展趋势。着重探讨了微生物发酵法的生产工艺进展。介绍了二步发酵法与葡萄糖直接发酵法的研发现状 ,探讨了 2 -酮基 -L-古龙酸的分离提取工艺。展望了我国维生素C生产技术的前景。指出 。 | 仪宏 张华峰 朱文众 曾远智 | 2003 | 中国食品添加剂2003，14，6： | 20 |
| 2 | Vc二步发酵中伴生菌的作用机制显示文摘应用细胞培养和膜分离技术研究了Vc两步发酵中伴生菌巨大芽孢杆菌 (Bacillusmegaterium)对氧化葡萄糖酸杆菌 (Gluconobacteroxydans)产酸作用机制。结果表明 :巨大芽孢杆菌培养液中分子量在 30~ 5 0kD及大于 1 0 0kD组分明显促进产酸 :其组分通过凝胶层析分离纯化 ,自动紫外检测仪检测 ( 2 80nm) ,聚丙烯酰胺凝胶电泳及考马斯亮兰G2 5 0特异染色 ,初步证实为蛋白质 ,且至少是两种以上蛋白质 。 | 吕淑霞 冯树 张忠泽 刘阳 谢占武 安海英 | 2001 | 微生物学通报2001，28，5： | 20 |
| 3 | 维生素C发酵中伴生菌对氧化葡糖杆菌的影响显示文摘通过分析维生素C二步发酵过程中活菌数、产酸量、pH、糖酸转化活力等 ,研究了蜡状芽孢杆菌 (俗称大菌 )对氧化葡糖杆菌 (俗称小菌 )生长和产酸的影响。结果表明 ,在大菌存在情况下 ,小菌的活菌数约为单菌培养条件下的 5倍 ,产酸量为单菌培养条件下的 2~ 3倍 ,糖酸转化活力为单菌培养条件下的 2~ 3倍 ,提示在混合菌发酵条件下大菌仅仅是通过刺激小菌的生长而促进小菌产酸。用小菌休止细胞进行的糖酸转化实验结果也表明 ,无论大菌的发酵上清液还是破碎的菌体 ,都未发现对小菌产酸产生直接影响。 | 焦迎晖 张惟材 谢莉 袁红杰 陈梦霞 | 2002 | 微生物学通报2002，29，5： | 16 |
| 4 | 维生素C二步发酵中离子注入诱变巨大芽孢杆菌的生物学效应显示文摘巨大芽孢杆菌BM279是经低能N+离子注入诱变原始菌株BM80而得到的维生素C高转化率伴生菌株。通过对离子注入前后出发菌和突变株的生理、生化等生物学特点比较,探讨了离子注入巨大芽孢杆菌对2-酮基-L-古龙酸(2KGA)高转化率的促进机理。离子注入对巨大芽孢杆菌自身的生长无明显影响,BM279呈现出与BM80基本一致的生长曲线;但BM279对混菌发酵体系中产酸菌GO29的细胞增殖有显著促进作用。BM279在混菌发酵过程中分泌较多的碱性物,有利于维持GO29生长、代谢的pH环境。BM279培养42 h,其胞外活性物质对GO29的糖酸转化活力较BM80有显著提高,且分泌时间较BM80推迟6 h。利用层析技术分别从BM80、BM279胞外液中纯化了L-山梨糖脱氢酶(L-sorbose dehydrogenase,SDH)激活蛋白(SSPBM80和SSPBM279),后者比活较前者高出50%,对GO29中的SDH酶活有更强促进作用。 | 赵世光 王陶 余增亮 | 2007 | 激光生物学报2007，16，4： | 10 |
| 5 | 山梨糖脱氢酶基因在大肠杆菌染色体上整合及表达显示文摘以质粒pKF3为模板 ,扩增出两翼与ptsG基因上下游序列同源 ,中间为氯霉素抗性基因的DNA片段 ,连至pMD18 T载体 ,构建得到pMD18 PC。以质粒pQE6 0 SDH为模板 ,扩增山梨糖脱氢酶基因sdh ,与pMD18 PC连接 ,得到pMD18 PC SDH。将其用PvuⅡ酶切 ,回收含ptsG1 cat sdh ptsG2 的目的片段 ,电转化至JM10 9 pKD4 6 ,在Red重组酶的作用下 ,外源DNA片段与染色体上对应区域发生同源重组 ,将基因ptsG敲除 ,替换为cat sdh基因 ,获得整合sdh基因的JM10 9s。经检测JM10 9s具有山梨糖脱氢酶活性。以ptsG基因上下游序列为引物 ,JM10 9s基因组DNA为模板进行PCR 。 | 高书颖 张惟材 汪建华 郭蔼光 | 2005 | 微生物学报2005，45，1： | 9 |
| 6 | VC混菌发酵中大菌不同胞外组分对小菌的影响显示文摘在维生素C(VC)二步混菌发酵中,巨大芽孢杆菌可显著促进氧化葡萄糖酸杆菌产VC前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)。采用硫酸铵分级盐析沉淀、柱层析及电泳技术对巨大芽孢杆菌胞外液中的活性物质进行了分离纯化。通过测定氧化葡萄糖酸杆菌生长细胞转化L-山梨糖为2-KLG的生成量、产酸菌关键酶L-山梨糖脱氢酶(SDH)酶活性及产酸菌的活菌数,研究了VC两步发酵中大菌不同胞外组分对小菌的作用。结果表明:大菌胞外36 000和44 300两个组分蛋白质对小菌产酸、SDH酶活具有促进作用。 | 吕淑霞 牛建双 马镝 张良 陈宏权 张忠泽 | 2011 | 食品与生物技术学报2011，30，5： | 7 |
| 7 | 酮古龙酸菌WB0104中L-山梨糖脱氢酶的分离和性质研究显示文摘从两步法生产维生素C重要前体2-酮基-L-古龙酸(2-Keto-L-gulonic acid,简称2-KLGA)的第二步转化菌酮古龙酸菌Ketogulonigeniumsp.WB0104的细胞质中,经SP-SepharoseFast Flow、DEAE-CL6B和凝胶过滤的方法,分离到了L-山梨糖脱氢酶(L-Sorbose Dehydrogenase,简称SDH),质谱测定该酶分子量为60.499kd,而用凝胶过滤法测定其分子量为139.053±4.96kd,由此推测该酶为具有两个相同亚基的二聚体;辅基分析表明SDH含有辅基pyrroloquinolinequinone(PQQ)。以L-山梨糖(L-Sorbose)为底物,2,6-Dichlorophenolindophenol(DCIP)为电子受体,SDH具有明显的脱氢酶活性;以L-Sorbose为底物的Km值为23.94mmol/L。在无细胞体系中,在phenazine methosulfate(PMS)存在的情况下,SDH能将底物L-Sorbose直接转化为2-KLGA。 | 郝爱鱼 贾茜 吴洪涛 周华芮 耿文飞 高文利 赵军强 贺建功 | 2008 | 工业微生物2008，38，1： | 6 |
| 8 | 维生素C生物转化的代谢工程研究显示文摘本文从代谢工程角度出发,综述维生素C(Vc)生物转化代谢研究进展。分别论述了3条产生Vc重要前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)反应路线的代谢机制、反应酶系及代谢工程菌构建等方面的问题;并对Vc生物转化应用前景作了展望。 | 袁红杰 张惟材 | 2003 | 生物技术通讯2003，14，3： | 4 |
| 9 | Vc二步发酵离体实验系统的建立显示文摘以氧化葡萄糖酸杆菌和巨大芽孢杆菌混合培养物的无细胞抽提液为基本反应液 ,在试管中建立了Vc二步发酵离体实验系统 .将底物山梨糖加入反应体系后在pH 7.0 ,35℃下保温 2 4h,2 酮基 L 古龙酸生成 .加入巨大芽孢杆菌胞外活性物质对离体系统的产酸没有影响 ,一定量的L 山梨糖脱氢酶可促进产酸 .试验了pH、θ/℃、金属离子、电子受体、去污剂等对该系统产酸的影响 ,并就其作用机理进行了探讨 ,结果表明离体系统产酸的最适pH和θ/℃分别是 8和 40℃ ,Fe3+促进产酸 ,Co2 +抑制产酸 ,2 ,6 二氯酚定酚作为电子受体促进细胞膜组分产酸 ,但对细胞质组分没有影响 ,TritonX 10 0和Tween 80抑制产酸 .图 8参 | 郝林 冯树 张成刚 张忠泽 刘阳 谢占武 安海英 | 2001 | 应用与环境生物学报2001，7，2： | 3 |
| 10 | 阳离子交换树脂催化古龙酸甲酯的非均相动力学显示文摘以阳离子交换树脂H11为催化剂催化合成2-酮基-L-古龙酸甲酯。考察了催化剂的内外扩散、反应温度、反应物浓度配比、催化剂浓度对反应的影响,得到了最佳反应条件,反应最高产率可达到97%。还考察了催化剂的失活性,发现H11是一种理想的催化剂,连续反应4次都不影响催化效果。反应数据用Langmu ir-H inshel-wood模型拟合,通过验证反应模型符合反应原理,表面反应是关键的控速步骤,反应活化能为32 kJ/mol。 | 吴伟杰 陶大峻 张磊 赵谷林 魏秀丽 应汉杰 | 2006 | 南京工业大学学报(自然科学版)2006，28，5： | 3 |
| 11 | 维生素C发酵中L-山梨糖脱氢酶的研究显示文摘从氧化葡糖杆菌 SCB32 9菌体中分离纯化得到 L-山梨糖脱氢酶后 ,用 Western印迹法验证了 L-山梨糖脱氢酶只存在于产酸“小菌”。SDS- PAGE电泳测得分子量约为 6 0 0 0 0。动力学性质研究表明它为一个典型的 Michaelis-Menten氏酶 ,对 L -山梨糖作用的 Km 值为 5 2 .7× 10 - 3m ol/ L ,最适作用 p H和温度分别为 7.0和 42°C。Mg2 + 、Ca2 +是酶的激活剂 ,EDTA、Cu2 + 是酶的抑制剂 ,氨基酸组成分析表明酸性氨基酸占 2 4.3% ,碱性氨基酸仅占 7.6 %。 | 薛震役 林文楚 尹光琳 | 2001 | 中国医药工业杂志2001，32，3： | 3 |
| 12 | 酮古龙酸菌与呼吸链偶联的2-KGA代谢途径研究进展显示文摘酮古龙酸菌可将底物L-山梨糖转化为维生素C的前体2-酮基-L-古龙酸(2-KGA)。该菌共存在5种反应参与2-KGA代谢,包括:1D-山梨醇氧化为L-山梨糖;2L-山梨糖氧化为L-山梨酮;3L-山梨酮(吡喃型)氧化为2-KGA;4L-山梨酮(呋喃型)氧化为维生素C。52-KGA还原为L-艾杜糖酸。其中L-山梨糖/L-山梨酮脱氢酶(SSDH)参与反应123,L-山梨糖脱氢酶(SDH)参与反应23,L-山梨酮脱氢酶(SNDH)参与反应34,醛脱氢酶(ALDH)参与反应3,2-KGA还原酶(2-KGR)参与反应5。SDH/SSDH/ALDH属于Ⅰ型醌酶,其辅酶为1分子PQQ;SNDH属Ⅱ型醌酶,与PQQ、heme C共同构成quinohemoproteins,2种醌酶均分布于周质空间中与呼吸链相偶联,意味着这种膜上直接氧化过程伴随ATP产生,使得菌体可以利用环境中的底物实现快速供能。 | 李野 厉学 张怡轩 | 2014 | 微生物学报2014，54，10： | 3 |
| 13 | Vc二步发酵新菌种单因素发酵条件的研究显示文摘用测定发酵液糖酸转化率的方法,对Vc二步发酵新菌种的最适单因素发酵条件进行了研究。结果表明,装液量为20ml/250ml,培养温度为29℃,种龄为18~20h,接种量为15%,底糖浓度为8%是最适发酵条件。 | 黄磊 吕淑霞 张利 邵立东 张忠泽 | 2005 | 安徽农业科学2005，33，12： | 2 |
| 14 | 维生素C二步发酵中L-山梨糖脱氢酶的性质及作用显示文摘从氧化葡萄糖酸杆菌细胞质中分离纯化出L 山梨糖脱氢酶 (SDH) ,其分子量为 46× 10 3 ,表观分子量为 190× 10 3 ;在测试范围内 ,最适pH是 7.4,温度为 5 5℃ ,最稳定的 pH是 7.0 ,温度为 30℃以下 ;FeCl3 促进酶活 ,CoCl2 抑制酶活 .该酶活力与发酵产物 2 酮基 L 古龙酸的合成呈正相关 ;伴生菌促进产酸菌生长和代谢 ,并使该酶比活力增加 ,从而提高发酵系统中该酶的总活力 .图 11表 5参 | 郝林 陈宏权 曹桂环 曹铁 曹军 冯树 张成刚 张忠泽 | 2002 | 应用与环境生物学报2002，8，2： | 2 |
| 15 | 普通生酮基古龙酸菌中山梨糖脱氢酶和山梨酮脱氢酶的纯化及酶学性质分析显示文摘【目的】对源于普通生酮基古龙酸菌(Ketogulonicigenium vulgare WSH-001)的山梨糖脱氢酶(Sorbose dehydrogenase,SDH)和山梨酮脱氢酶(Sorbosone dehydrogenase,SNDH)的酶学性质进行分析。【方法】以K.vulgare WSH-001基因组DNA为模板,PCR扩增得到山梨糖脱氢酶基因(sdh)和山梨酮脱氢酶基因(sndh),构建重组表达质粒p ET28a-sdh、p ET28a-sndh,并分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中。利用镍柱亲和层析和凝胶过滤层析得到纯化的SDH和SNDH。【结果】成功构建产SDH和SNDH的大肠杆菌BL21(DE3)并对目的酶进行纯化。SDS-PAGE分析结果表明,SDH和SNDH的大小分别为64 k Da和48 k Da,与理论预测值一致。显色法测得SDH酶活为3.15 U/mg,最适反应温度为30°C,最适反应pH为8.0左右;SNDH酶活为6.12 U/mg,最适反应温度为35°C,最适反应pH为8.0左右。在pH 3.0、4.0、5.0的偏酸性条件下,2个酶的酶活受到显著影响。【结论】表达并纯化了来源于普通生酮基古龙酸菌来源的SDH、SNDH,并进行了酶学性质分析,为利用SDH、SNDH实现维生素C前体2-酮基-L-古龙酸的一步法发酵生产提供了必要的参考。 | 高媛 曾伟主 周景文 陈坚 | 2017 | 微生物学报2017，57，10： | 1 |
| 16 | 山梨糖脱氢酶和氨甲酰化酶的融合表达显示文摘利用大肠杆菌-生黑醋杆菌穿梭载体pUG18构建了山梨糖脱氢酶基因sdh和氨甲酰化酶基因hyuC的融合表达质粒pUG18-SDH-HyuC。在JM109/pUG18-SDH-HyuC中检测到山梨糖脱氢酶(SDH)和氨甲酰化酶(HyuC)的酶活性,大量的SDH和HyuC不以融合蛋白形式存在。将质粒pUG18-SDH-HyuC电转化至生黑醋杆菌H24,检测到HyuC活性,但尚未检测到SDH酶活性。从生黑醋杆菌转化子中提取质粒,重新转化至JM109,又可同时检测到SDH和HyuC活性,传代实验和对质粒的鉴定结果也说明该质粒在H24中稳定存在。 | 高书颖 张惟材 汪建华 郭蔼光 | 2005 | 生物技术通讯2005，16，2： | 1 |
| 17 | 山梨糖脱氢酶基因在酮古龙酸菌中的过表达显示文摘目的在酮古龙酸菌中克隆并过表达山梨糖脱氢酶基因,以便提高单菌发酵产2-酮基-L-古龙酸的能力。方法从酮古龙酸菌DSM4025基因组中克隆获得山梨糖脱氢酶基因(sorbose dehydrogenase,sdh),酶切连接到含有双亲本接合转移关键基因即可移动基因(mobilization,mob)的p BBR1MCS-2质粒上,构建p BBR1MCS-2-sdh重组质粒;再将p BBR1MCS-2、p BBR1MCS-2-sdh分别转入供体菌大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)S17-1中,以酮古龙酸菌(Ketogulonigenium sp.)Rif-B-003为受体菌进行双亲本接合转移。挑取利福霉素(Rifamycin,Rif)和卡那霉素双抗平板上的接合子进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、双酶切和测序验证。取重组菌进行摇瓶发酵,用菌体蛋白的十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)电泳结果来验证阳性克隆的过表达成功,并检测发酵终点2-酮基-L-古龙酸的产量。结果构建的重组质粒p BBR1MCS-2-sdh成功转入酮古龙酸菌(Ketogulonigenium sp.)Rif-B-003中,SDS-PAGE检测到,发酵终点菌体蛋白在58 ku(目标蛋白)处条带有加深,重组菌株发酵终点2-酮基-L-古龙酸产量相比于对照菌株酮古龙酸菌(Ketogulonigenium sp.)Rif-B-003提高了20.86%。结论山梨糖脱氢酶基因在酮古龙酸菌Rif-B-003里过表达成功,可以提高发酵终点2-酮基-L-古龙酸的产量。 | 王威勋 李燕 李野 张天园 张怡轩 | 2016 | 沈阳药科大学学报2016，33，10： | 1 |
| 18 | 氧化葡萄糖酸杆菌SCB329基因组的大小与结构的研究显示文摘收集维生素C产生菌氧化葡萄糖酸杆菌GluconobacteroxydansSCB32 9的纯培养对数期的菌体 ,采用凝胶包埋法制备完整染色体 ,用稀有酶切位点的限制性内切酶和脉冲场电泳技术对SCB32 9的基因组进行了分析 ,SpeⅠ (5′ ACTAGT)酶切有 2 4个片段 ,其大小从 1 0kb到32 0kb,用XbaⅠ (5′ TCTAGA)酶切产生 40个片段 ,其大小从 4kb到 2 0 0kb,综合两种限制酶酶切片段长度的总和结果 ,SCB32 9基因组大小为 2 70 0kb,SCB32 9基因组由一条 2 50 0kb的染色体和一个 2 4 5kb的质粒组成。通过用脱氧核糖核酸酶Ⅰ和S1核酸酶处理其基因组后电泳证实SCB32 | 林文楚 尹光琳 | 2001 | 微生物学报2001，41，5： | 1 |
| 19 | 维生素C生物转化的研究现状和未来显示文摘在利用微生物氧化合成维生素C(VC)的研究方面,阐述了微生物通过以D-山梨醇和D-葡萄糖为底物进行生物转化的代谢途径,以合成维生素C前体--2-酮基-L-古龙酸(2-KGA)的研究现状和发展趋势。 | 焦迎晖 张利平 | 2004 | 河北化工2004，27，4： | 0 |
| 20 | 一种提取氧化葡萄糖酸杆菌山梨糖脱氢酶的简单方法显示文摘利用表面活性剂TritonX 10 0建立一种提取和测定氧化葡萄糖酸杆菌 (Gluconobacteroxydans )L 山梨糖脱氢酶 (L sorbosedehydrogenaseSDH)活性的简便方法 .最适提取条件为 :TritonX 10 0浓度 φ(Triton) / %=0 .3;提取温度θ=4℃ ;处理时间t/h =6~ 10h;用于提取的菌悬液D550nm范围 0 .0 90~ 0 .2 5 2 .该方法提取效率为细胞碎片法的 97.83%.图 2表 2参 | 张惠文 周樱桥 姚志红 张成刚 | 2002 | 应用与环境生物学报2002，8，1： | 0 |
您所在的机构暂未开通此部分的功能，请联系管理员