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| 1 | 金川牦牛BCL2A1基因克隆及生物信息学分析显示文摘为探讨金川牦牛抗凋亡因子——B淋巴细胞瘤2相关蛋白A1(B cell lymphoma 2related A1,BCL2A1)基因特点,本试验采用PCR方法以金川牦牛血液DNA为模板扩增BCL2A1基因,用DNAStar、ExPASy、ABCpred等生物信息学软件分析基因序列和蛋白质结构。结果显示,克隆获得的片段长622bp,GenBank登录号:MG459158,开放阅读框为516bp,共编码171个氨基酸,其中缬氨酸(V)、赖氨酸(K)的含量较多,分别为9.4%和8.8%。BCL2A1分子质量为19.46ku,理论等电点为4.99,不稳定系数为17.44,具有跨膜螺旋结构域(Scores>500)。二级结构主要为α-螺旋,占60.82%,有一个BCL2结构域,三级结构模型与人BCL2A1同源性最高(72.79%),BCL2A1存在潜在的B细胞抗原表位。与野牦牛氨基酸序列进行比对显示,金川耗牛BCL2A1存在5个氨基酸差异位点。NJ法系统进化分析显示,金川牦牛与野牦牛同源性为98.5%,亲缘关系最近。本试验成功克隆了金川牦牛BCL2A1基因,其在哺乳动物中具有较高的保守性,为深入研究牦牛BCL2A1基因功能提供理论依据。 | 吴开年 王利 李晨阳 | 2018 | 中国畜牧兽医2018，45，6： | 2 |
| 2 | 连翘叶酶-醇提取物抗药物性肝损伤作用研究显示文摘【目的】研究连翘叶酶-醇提取物(FLEAE)抗药物性肝损伤(DILI)的作用及其机制。【方法】将48只昆明小鼠随机分为6组,每组8只,分别为正常对照组(NC)、FLEAE对照组(FC)、DILI模型组(DILI)及FLEAE高、中、低剂量治疗组(HFC、MFC、LFC),其中NC组和FC组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠腹腔注射300 mg/kg APAP注射液,每天2次,连续注射4 d,第5天开始NC组和DILI组小鼠灌胃生理盐水,FC、HFC、MFC和LFC组小鼠分别灌胃FLEAE 600,600,400和200 mg/kg,每天2次,连续灌胃3 d。最后1次灌胃12 h后,检测各组小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平及氧化应激指标谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)水平,肝组织切片苏木精伊红(HE)染色观察肝损伤情况。用网络药理学方法构建FLEAE调控DILI的靶点集,GO和KEGG分析靶点的基因功能及通路,筛选FLEAE抗DILI的核心靶点。qRT-PCR和Western Blot检测核心靶点PIK3CA及其下游凋亡抑制分子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)基因和蛋白的表达水平。【结果】FLEAE可显著降低DILI组小鼠血液中的ALT和AST水平,改善药物性肝损伤。FLEAE可显著降低DILI小鼠的GSH和SOD水平,提高H_(2)O_(2)和MDA水平。网络药理学分析表明,FLEAE抗DILI靶点与凋亡过程的负调控、氧化应激等有关,主要富集于PI3K/Akt信号通路,可能通过PIK3CA发挥作用;qRT-PCR和Western Blot结果显示,FLEAE可能通过提高PIK3CA基因和蛋白的表达发挥抗DILI及抑制细胞凋亡的作用。【结论】FLEAE通过上调DILI中PIK3CA的表达抑制细胞凋亡和改善氧化应激,发挥抗DILI的作用。 | 范碧玥 王萌 潘阳阳 安志霞 马小燕 叶得河 王桂荣 | 2022 | 西北农林科技大学学报(自然科学版)2022，50，10： | 2 |
| 3 | 隐丹参酮通过G蛋白偶联受体55调节Wnt/β-catenin信号通路抑制舌鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡及其作用机制研究显示文摘目的探讨隐丹参酮对舌鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法实验设置不同浓度隐丹参酮(CT)组、空白对照(NC)组、pcDNA-con组、pcDNA-GPR55组、CT+si-con组、CT+si-GPR55组。MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测GPR55 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测蛋白表达。结果 MTT法检测显示,0 CT组、2CT组、4 CT组、8 CT组、16 CT组、32 CT组细胞增殖抑制率分别为(0.00±0.02)%、(25.04±2.50)%、(68.56±5.86)%、(85.44±8.54)%、(88.25±8.82)%、(80.11±8.01)%,与不含隐丹参酮的细胞相比,不同浓度隐丹参酮处理组TSCC细胞的增殖抑制率均显著升高(F=284.028,P<0.05)。隐丹参酮可抑制舌鳞状癌细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制Bcl-2、β-catenin表达,促进Bax、GPR55表达。过表达GPR55也抑制舌鳞状癌细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制CyclinD1、Bcl-2表达,促进Bax表达。低表达GPR55逆转了隐丹参酮对舌鳞状癌细胞的增殖抑制、凋亡促进及对β-catenin表达的抑制作用。与NC组(0.75±0.08)相比,CT组TSCC细胞中β-catenin表达水平(0.26±0.03)显著降低;与CT+si-con组(0.30±0.03)相比,CT+si-GPR55组TSCC细胞中β-catenin表达水平(0.62±0.06)显著升高(F=176.212,P<0.05)。结论隐丹参酮可抑制舌鳞状癌细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与调控GPR55及Wnt/β-catenin信号通路有关。 | 方松城 林钊宇 叶志佳 刘志国 | 2020 | 安徽医药2020，24，2： | 1 |
| 4 | 牦牛Bcl-2、Bax基因克隆及其在生殖轴上的表达分析显示文摘试验旨在分析Bcl-2与Bax基因的序列特性,并分析其在母牦牛生殖轴上的表达特点,为探讨其在牦牛繁殖活动中的调控作用奠定基础。试验采集健康母牦牛与母黄牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管及子宫组织样品,通过RT-PCR扩增并克隆Bcl-2与Bax基因,并采用生物信息学软件进行序列分析;利用实时荧光定量PCR法检测Bcl-2与Bax基因在牦牛与黄牛不同组织中的表达差异。结果表明,牦牛Bcl-2编码区全长690 bp,编码229个氨基酸;与黄牛Bcl-2基因核苷酸序列同源性最高,为99.86%,其次是山羊、绵羊,同源性分别为98.41%、97.97%;系统进化树表明,牦牛与黄牛亲缘关系最近。牦牛Bax基因编码区全长579 bp,编码192个氨基酸,与黄牛、藏山羊和金堂黑山羊同源性较高,分别为99.83%、99.48%和99.48%,其次是绵羊、马、人,同源性分别为99.14%、95.34%、94.30%;系统进化树表明,牦牛与黄牛亲缘关系最近。Bcl-2和Bax蛋白不存在信号肽,均为酸性不稳定的疏水蛋白。Bcl-2与Bax基因在黄牛及牦牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管和子宫组织中均有表达,其中牦牛卵巢、子宫中Bcl-2基因表达量分别显著和极显著高于黄牛(P<0.05;P<0.01);牦牛子宫、输卵管中Bax基因表达量显著高于黄牛(P<0.05),牦牛卵巢中Bcl-2/Bax比值极显著高于黄牛(P<0.01),子宫和垂体中显著高于黄牛(P<0.05)。表明Bcl-2与Bax在动物进化中非常保守且在繁殖活动中起重要作用,牦牛卵巢、子宫、输卵管和垂体中的高表达量可能与牦牛处于极端恶劣环境的细胞抗凋亡作用有关。 | 夏忆 王琴 何向东 陈莹 吉格莫体 字向东 | 2019 | 中国畜牧兽医2019，46，7： | 1 |
| 5 | β-淀粉样蛋白对幼鼠骨髓干细胞增殖、迁移和凋亡的影响显示文摘目的探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)对幼鼠骨髓干细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法培养新生小鼠骨髓干细胞,将其分为对照组和Aβ处理组。利用Brd U方法检测两组阳性细胞数;检测Aβ蛋白对幼鼠骨髓干细胞迁移的影响;流式细胞仪检测对照组和Aβ处理组细胞凋亡情况;Western印迹检测Cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 Aβ处理组的细胞生长速度明显低于对照组,对照组Brd U阳性率显著高于Aβ处理组(P<0.05);Aβ处理组的细胞迁移距离及凋亡率显著高于对照组(P<0.05,P<0.01);经Aβ蛋白处理的骨髓干细胞中Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达量明显升高,而Bcl-2蛋白表达量与对照组相比明显减少(P<0.01)。结论 Aβ能抑制骨髓干细胞的增殖,加速骨髓干细胞的迁移和凋亡。 | 热娜.阿布力孜 威力江.赛买提 | 2017 | 中国老年学杂志2017，37，2： | 0 |
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