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源于体外培养胰岛中表达Ngn3的细胞是胰腺内分泌前体细胞的新证据

查看全文 作　　者：[1]宋陆军 [1]秦新裕索引[1]牛伟新 [1]沈坤堂 [1]刘凤林 [2]K.A.Andreoni [2]D.A.Gerber [2]J.H.Fair [2]L.Rice [2]A.Pleasant [2]J.Wang 高影响力作者 机构地区：[1]复旦大学附属中山医院普外科,上海200032;[2]TransplantationandStemCellLab,DepartmentofSurgery,UniversityofNorthCarolinaatChapelHill,USAJianWang高影响力机构 出　　处：《中华外科杂志》索引2005年第43卷第1期,共4页高影响力期刊 基　　金：国家自然科学基金资助项目 (3 0 3 713 88) 摘　　要：目的 评估表达Ngn3的细胞对成体胰岛维护和更新的作用及其意义。方法 用 6~ 8周龄的C5 7BL/ 6小鼠分离胰岛。胆总管内插管成功后 ,切除胰腺组织并用浓度为 2 5mg/ml胶原蛋白酶V灌注消化。手工拣取胰岛后 ,置于 6 0mm培养皿内 ,每个培养皿内含 10~ 12个胰岛 ,用RPMI 16 4 0 (12 5mmol/LHEPES ,5 2mmol/L葡萄糖和 2 %胎牛血清 )培养液培养。用A6抗体 ,胰岛素抗体 ,胰高血糖素抗体 ,Nestin抗体 ,Ngn3抗体和 5′ 溴 2 脱氧尿嘧啶 (5 bromo 2′ deoxy uridine,BrdU)抗体进行胰岛细胞免疫荧光染色。结果 在增殖的胰岛细胞中 ,只有不到 15 %的细胞表达Ngn3,其中约有 30 %以上的细胞同时表达A6。在培养的胰岛细胞中存在表达Ngn3的细胞 ,这一结果与其他在胚胎发育和成体胰岛中的研究结果一致。本研究发现培养的胰岛细胞中存在同时表达A6和Ngn3的细胞。A6被认为是可分化为胆管上皮细胞的肝脏前体细胞的标记物。胰岛内表达A6的细胞可能来源于成体胰管 ,并迁移至胰岛内。细胞表达A6的同时表达Ngn3,表明这些细胞在胰岛内可分化为内分泌细胞。结论 培养的胰岛细胞中发现共同表达Ngn3和A6的细胞 ,表明胰岛内的 4种内分泌细胞可能来源于成体胰岛中的同一内分泌细胞系。 关 键 词：胰岛细胞 细胞表达 抗体 前体细胞 胰腺 标记物 治疗 成体干细胞 培养皿 内分泌细胞
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