禽流感病毒非结构蛋白1单克隆抗体的制备及其特异性分析

查看全文 作　　者：[1]丁细霞;Hoi-wah [2]Tsoi;[1]陈伟俊;[1]丘立文;[1]王压娣;[1]廖志勇;[2]袁国勇;[1]车小燕

机构地区：[1]南方医科大学珠江医院临床医学基础研究所,广州510282;[2]香港大学微生物系

出　　处：《现代免疫学》索引2007年第27卷第6期,共6页

基　　金：广州市科技攻关重点项目(2005Z2-E0231);广东省科技攻关项目(20052070046) 摘　　要：为研制禽流感病毒(H5N1)非结构蛋白1(NS1)的特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性,本研究在分别表达了具有良好抗原性的A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白基础上,用A/Viet-nam/1194/04(H5N1)-NS1蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,间接ELISA筛选阳性的杂交瘤细胞,并结合免疫荧光和免疫印迹对抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制实验对单抗识别的抗原位点进行分析。结果共获得19株能识别4个H5N1-NS1蛋白不同抗原位点的mAb,亚类测定显示,5株为IgG2a、1株为IgG2b,另外13株为IgG1。这些mAb均与A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白特异性结合,免疫荧光检测均与A型流感病毒(H1N1和H3N2)有交叉反应,而与B型流感病毒无交叉现象。表明成功获得特异性针对H5N1-NS1蛋白的mAb,为进一步研究禽流感病毒NS1蛋白的结构与功能奠定基础。 关键词：禽流感病毒(H5N1) 非结构蛋白单克隆抗体

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