Purification of total DNA extracted from activated sludge

查看全文 作　　者：SHAN [1,2]Guobin;JIN [3]Wenbiao;Edward [1]KHLAM;XING [2]Xinhui

机构地区：[1]Baolimei Chemical Engineering Co., Ltd., Dongguan 523581, China.;[2]Institute of Biochemical Engineering, Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing 100084, China;[3]Department of Urban and Civil Engineering, Harbin Institute of Technology Shenzhen Graduate School, Shenzhen 518055, China

出　　处：《Journal of Environmental Sciences》索引2008年第20卷第1期,共8页

基　　金：This work was supported by the China Postdoctoral Science Foundation(No.20060390060). 摘　　要：从活性污泥样品提取的全部的脱氧核糖核酸的纯化被学习。从活性污泥提取的全部的脱氧核糖核酸的产量和纯净上的抽取缓冲区和细胞溶解处理(溶解酵素,钠 dodecyl 硫酸盐(SDS ) , sonication,机械工厂和热吃惊) 的效果被调查。SDS 和机械工厂是为房间细胞溶解的最有效的方法,这被发现,并且,两个都由 SDS 和热吃惊给了最高的脱氧核糖核酸收益,最纯的脱氧核糖核酸摘录能被获得。有另外的细胞溶解处理的 SDS 的联合例如 sonication 和热吃惊,能显然增加脱氧核糖核酸收益而且导致严重的砍。为粗略的脱氧核糖核酸摘录的纯化,聚乙烯化合物的 polypyrrolidone 被用于腐殖的沾染物的移动。Cetyltrimethyl 铵溴化物,钾醋酸盐和酚 / 氯仿被用来把蛋白质和多糖从粗略的脱氧核糖核酸移开。粗略的脱氧核糖核酸被 isopropanol 降水进一步净化。因此,一个合适的协议为脱氧核糖核酸抽取被建议,产出大约 49.9 mg (全部的脱氧核糖核酸)/g 不稳定的推迟的固体,和脱氧核糖核酸摘录成功地为 16S rDNA 和 16S rDNA V3 区域在 PCR 扩大被使用。16S rDNA V3 区域的 PCR 产品允许 DGGE 分析(使中毒的坡度胶化电气泳动) 可能。 关键词：活性淤泥溶菌处理 16S RDNA 净化废水生物处理

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