A faster immunofluorescence assay for tracking infection progress of human cytomegalovirus

查看全文 作　　者：Yingliang [1]Duan;Lingfeng [1]Miao;Hanqing [1]Ye;Cuiqing [1]Yangl;Bishi [1]Fu;Philip [2]H.Schwartz;Simon [1]Rayner;Elizabeth [3]A.Formnato;Min-Hua [1]Luo

机构地区：[1]State Key Laboratory of Virology,Wuhan Institute of Virology,Chinese Academy of Sciences,Wuhan 430071,China;[2]National Human Neural Stem Cell Resource,Children's Hospital of Orange County Research Institute,Orange,CA 92868,USA;[3]Department of Biological Sciences and the Center for Reproductive Biology,University of Idaho,Moscow,ID 83844-3052,USA

出　　处：《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》索引2012年第44卷第7期,共9页

摘　　要：Immunofluorescence 试金(IFA ) 是在生物科学和诊所诊断的最经常使用的方法之一,但是它昂贵、费时间。克服这些限制,我们由修改标准 IFA 开发了更快、更划算的 IFA (f-IFA ) ,并且使用了这个方法追踪人的 cytomegalovirus (HCMV ) 的前进在不同房间的感染。我们开发了的 f-IFA 不仅节省时间,而且戏剧性地减少抗体(Ab ) 的数量,它将在诊所诊断便于 IFA 的应用程序。f-IFA 为堵住,为主要的各个的 10 min 孵化和第二等的 Abs 要求仅仅 15 min,由 1 min 列在后面广泛在每孵化以后洗。仅仅冲淡的 Ab 答案的 25 l 在主要、第二等的 Ab 孵化步骤为每 coverslip 被需要。另外,所有步骤在房间温度被执行。这 f-IFA 成功地被使用了跟随 virion 入口(pp65 ) 和病毒的基因(IE1, UL44,和 pp65 ) 的表示以便追踪 HCMV 感染过程的细节。我们发现 0.5%感染 HCMV 的 T98G 房间形成了 multiple-micronuclei (IE1 并且原子核染色) 并且有由 f-IFA 的流的病毒(染色的 pp65 ) ,它不能被传统的 IFA 检测。我们的结果显示 f-IFA 是为调查病毒感染进步的细节的一个敏感、方便、快、划算的方法,特别 HCMV 感染。有更高的敏感和特性的更快、划算的特征暗示 f-IFA 在临床的诊断有潜在的应用。 关键词：巨细胞病毒病毒感染检测跟踪免疫荧光法人类临床诊断成本效益 HCMV

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