创伤弧菌PMA RTi-PCR检测技术的建立

查看全文 作　　者：[1]张晶 [1]周勇索引[1]陶霞 [1]吴新伟

机构地区：[1]广州市疾病预防控制中心微生物检验科,广州510440

出　　处：《中国人兽共患病学报》索引2013年第29卷第1期,共5页

基　　金：广州市医药卫生科技项目(201102A213240)资助~~ 摘　　要：目的将叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)与实时定量聚合酶链式反应(RTi-PCR)技术相结合,建立以一种快速准确的创伤弧菌检测方法。方法以vvh基因作为检测创伤弧菌的靶基因,用PMA对样品基因组提取进行前处理,抑制该DNA分子的RTi-PCR扩增。结果终浓度为3.0mg/L的PMA可有效抑制死细胞(1×108 CFU/mL)DNA的扩增;当PMA浓度小于或等于5.0mg/L时,对创伤弧菌DNA的扩增没有显著的影响;含有不同比例死活细菌的创伤弧菌混合液RTi-PCR结果表明,PMA RTi-PCR能选择性定量创伤弧菌中的活菌。纯培养创伤弧菌活细胞的检测灵敏度检测极限为2.5×101 CFU/mL,并且Ct值与细胞数的对数呈良好的线性关系,相关系数R2值为0.9982。结论 PMA RTi-PCR是一种快速灵敏且能有效鉴别并定量检测病原活细胞的新方法。 关键词：创伤弧菌 PMA RTi-PCR 死活细菌

相关文献

参考文献（15）
引证文献（9）
耦合文献（109）

参考文献(15)

引证文献(9)

耦合文献(109)

互联网出版许可证新出网证(渝)字10号全国400电话 - 免长途话费

创伤弧菌PMA RTi-PCR检测技术的建立

参考文献(15)

引证文献(9)

耦合文献(109)

用户提示