人膝关节内侧副韧带细胞在力学牵张下的mRNA差异显示

查看全文 作　　者：[1]马庆军;[1]党耕町;J [2]Kim;K-L Paul [2]Sung

机构地区：[1]北京大学第三医院骨科,100083;[2]美国加州大学圣迭戈分校骨科与生物工程系

出　　处：《中华骨科杂志》索引2001年第21卷第7期,共4页

摘　　要：目的用mRNA差异显示技术观察人膝关节内侧副韧带medialcollateralligamentMCL细胞在力学牵张下的mRNA表达变化。方法MCL细胞置于EquiBiaxial牵张装置中培养,生长达80%丰满后细胞饥饿24h,实验组给予5%的牵张力刺激2h,对照组不给予牵张刺激。刺激后立即提取细胞总RNA,用mRNA差异显示技术观察实验组与对照组在mRNA表达水平上的差异,将有差异的表达带回收、扩增、克隆并行ReverseNorthern杂交,选出阳性克隆进行cDNA测序并与NCBI基因数据库进行对照分析。结果在实验组与对照组间找到6个阳性克隆基因,其中基因G2S3与Lam-bertEaton肌无力综合征抗原B基因的同源性达96%,其余5个基因的功能目前尚未得知。结论给予MCL细胞5%的牵张刺激后其mRNA表达发生变化;G2S3可能与神经肌接头处乙酰胆碱传递的基因相关。 关键词：膝关节侧副韧带细胞培养遗传学技术 mRNA差异 MCL

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