乙肝病毒核心抗原单链抗体细胞内免疫抗乙肝病毒基因治疗研究

查看全文 作　　者：[1]陆荫英 [1]王琳 [1]刘妍 [2]于敏 [1]李克 [1]王业东 [1]张玲霞 [1]成军索引

机构地区：[1]中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心;[2]北京大学第一医院感染病科,北京市100034

出　　处：《世界华人消化杂志》索引2002年第10卷第7期,共5页

基　　金：国家自然科学基金;No.C03011402;军队'十;五'科技攻关面上项目;No.01MB135 摘　　要：目的:研究乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)人源单链抗体(ScFv)细胞内免疫抗乙型肝炎病毒(HBV)基因治疗的作用。方法:用噬菌体表面展示技术筛选特异性的HBcAg人源可变区单链抗体,聚合酶链反应(PCR)法和基因重组技术体外扩增HBcAg单链抗体基因,并构建表达HBcAgScFv基因的重组逆转录病毒载体pLXSN-HBcAg,转染PA317细胞,逆转录PCR(RT-PCR)方法验证细胞培养液上清分泌的假病毒颗粒中HBcAg ScFv的表达;将假病毒颗粒感染2.2.15细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测其上清HBsAg和HBeAg,定量检测HBV DNA。结果:成功筛选出HBcAg ScFv,PCR扩增出750bp的全基因,构建HBcAg ScFv基因的逆转录病毒载体,转染PA317细胞,在上清中检测出含HBcAg ScFv假病毒颗粒的存在,上清感染2.2.15细胞后第3、5、7、14天,HBsAg、HBeAg逐渐下降,到14d时HBsAg已变为阴性,DNA定量检测无明显变化。结论:HBcAg ScFV能成功地在逆转录病毒载体中表达,并有抑制HBsAg、HBeAg表达的作用。 关键词：乙肝病毒核心抗原单链抗体细胞内免疫抗乙肝病毒基因治疗

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