猪流性腹泻病毒流行毒株核衣壳蛋白能够通过阻断核因子κB入核拮抗λ干扰素产生(英文)

查看全文 作　　者：Ying [1]SHAN;Zi-qi [1]LIU;Guo-wei [1]LI;Cong [1]CHEN;Hao [1]LUO;Ya-jie [1]LIU;Xun-hui [2]ZHUO;Xing-fen [3]SHI;Wei-huan [1]FANG;Xiao-liang [1]LI

机构地区：[1]Zhejiang Province Key Lab of Preventive Veterinary Medicine, Institute of Preventive Veterainary Medicine, College of Animal Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China;[2]Institute of Parasitic Disease, Zhejiang Academy of Medical Sciences, Hangzhou 310013, China;[3]Animal Products Quality Testing Center of Zhejiang Province, Hangzhou 310020, China

出　　处：《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》索引2018年第19卷第7期,共11页

基　　金：Project supported by the National Natural Science Foundation of China(No.31702250);the Key Research and Development Project Funds of Zhejiang Provincial Science and Technology Department(Nos.2015C02044 and 2018C02028);the Agricultural Technology Extension Funds of Zhejiang University;the Dabei Agricultural Discipline Development and Talent Training Fund(No.2017ZDNT004);the Three Rural and Six Party Funds,China 摘　　要：目的:探索猪流性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N蛋白)对III型λ干扰素(IFN-λ)的影响。创新点:首次在IPEC-J2细胞模型中证明PEDV流行病毒株的N蛋白可拮抗由聚肌胞苷酸(poly(I:C))诱导表达的III型IFN,但不能拮抗I型或II型IFN。这种拮抗作用是通过阻断核因子κB(NF-κB)入核来实现的。方法:利用poly(I:C)刺激IPEC-J2细胞使其IFN诱导表达。实验组转染N蛋白真核表达载体,对照组转染空载体;利用定量聚合酶链反应(q PCR)、荧光素酶报告基因等技术,检测N蛋白对I型、II型及III型IFN表达抑制情况。利用间接免疫荧光技术,检测NF-κB在细胞内的分布情况,分析NF-κB入核与N蛋白抑制IFN-λ表达的关系。结论:2013年至2017年间从浙江省不同的农场分离的10个PEDV毒株的N蛋白具有较高的核苷酸同源性,而疫苗毒株CV777的N蛋白在系统发育树中形成单系分支(图1)。流行病毒株的N蛋白可以在IPEC-J2细胞中成功表达(图2和3),并拮抗由poly(I:C)诱导表达的III型IFN,但不能拮抗I型或II型IFN(图4和5)。PEDV N蛋白通过阻断NF-ΚB入核来对poly(I:C)诱导的IFN-λ3产生的抑制作用(图6)。 关键词：猪流行性腹泻核衣壳蛋白 λ干扰素核因子ΚB 肠上皮细胞

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