| 1 | 微卫星标记位点的分离及其在美洲剑线虫群体分类鉴定上的应用显示文摘在美洲剑线虫群体 (Xiphinemaamericanumgroup)上 ,应用简并寡核苷酸引物聚合酶链式反应 (DOP -PCR)技术 ,克服了基因组DNA样本不足的难题 ,成功在微量基因组DNA条件下分离和标记了微卫星重复子 (Mi crosatellite)。研究中 ,目标DNA片段被克隆前 ,DOP -PCR产物首先被连接到载体上 ,然后通过寡核苷酸 (CA) 9和载体上游引物 ,对包含微卫星位点的左侧DNA片段进行PCR扩增 ,该过程后的产物用于克隆和DNA序列分析 ;依据已分析的部分左侧序列 ,设计引物并与载体下游引物一起 ,对DOP -PCR产物再进行PCR扩增 ,使包含整个微卫星及其右侧连接部分被扩增 ,重复克隆和DNA序列分析并结合已分析的左侧序列 ,获得了包含全部微卫星重复子的DNA片段的完整序列。这种分离含微卫星标记位点DNA片段的路径新颖、高效 ,有效克隆率提高到了 93.3%。研究中 ,发现和分析了 9个包含微卫星重复子的片段 ,美洲剑线虫 (X .americanumsensustricto)和美洲剑线虫亚群组(X .americanumsubgroup)的标记性引物被设计和检测。 | 沈培垠 李红梅 HeYu MauriceMoens | 2004 | 检验检疫科学2004，14，4： | 1 |
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