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| 1 | 虎眼万年青总皂苷对诱发大鼠肝癌病变过程中肝组织IGF-2及P16 ink4a影响显示文摘目的动态检测虎眼万年青总皂苷对二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌变过程中肝组织中IGF-2及P16 ink4 a表达的影响。方法二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌变,虎眼万年青总皂苷干预,运用实时定量PCR法检测并分析第14周末预防组、模型组及18周末治疗组癌旁组织、癌组织、模型组癌组织标本中IGF-2及P16 ink4 a的表达。结果肝癌变模型组18周癌组织中IGF-2表达最高,与正常组、14周末预防组、模型组、18周末治疗组癌旁组织及癌组织间比较均有统计学意义(P<0.05)。肝癌变模型组18周癌组织中p16 ink4 a表达最高,与正常组、14周末预防组、模型组、18周末治疗组癌旁组织间比较均有统计学意义(P<0.05)。治疗组癌组织与模型组18周癌组织间无统计学差异(P>0.05)。结论二乙基亚硝胺诱发的肝癌组织中IGF-2及P16 ink4 a表达水平增高,而虎眼万年青总皂苷具有干预肝癌组织中IGF-2、p16 ink4 a表达水平。 | 金星林 崔刚 千昌石 杜希臣 吴艳玲 | 2010 | 时珍国医国药2010，21，1： | 6 |
| 2 | 《黄帝内经》“和”思想对原发性肝癌防治的意义显示文摘'和'是中国传统文化的思想核心之一,'和'思想贯穿于《黄帝内经》阴阳、五行、脏腑气血、养生等,是'和法'的理论基础,亦是中医理论及临床的核心思想之一。《黄帝内经》'和'思想对原发性肝癌的预防、治疗及瘥后防复具有重要指导意义。 | 李艳艳 张翠英 | 2013 | 中华中医药杂志2013，28，2： | 4 |
| 3 | 草苁蓉环烯醚萜苷对肝癌抑制作用显示文摘目的探讨草苁蓉环烯醚萜苷(IGBR)对二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌细胞凋亡的影响及其可能作用机制。方法 Wistar雄性大鼠随机分为对照组和模型组、5–氟尿嘧啶(5-FU)组、IGBR组,除对照组外,其余大鼠第1天给予腹腔注射DEN 200 mg/kg 1次,自由饮用0.05%的DEN水溶液;5-FU组大鼠腹腔注射25 mg/kg 5-FU,每周3次;IGBR组大鼠灌胃500 mg/kg IGBR每日1次。实验第12、20、28周末分批处死动物,TUNEL法检测肝细胞凋亡,Western blot法检测肝组织中Bax、Bcl-2和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肝细胞凋亡指数[(12.3±0.4)%]明显升高;与模型组比较,5-FU组与IGBR组大鼠肝细胞凋亡指数[分别为(22.3±0.2)%、(22.2±0.1)%]明显升高(P<0.05),5-FU组与IGBR组之间差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠肝组织中p-ERK、p-Akt表达水平下降、p-JNK、p-p38表达水平升高,ERK、p38、JNK、Akt表达无显明变化;与模型组比较,5-FU组与IGBR组大鼠肝组织中Bcl-2和p-ERK、p-Akt表达水平下降,Bax和p-JNK、p-p38表达水平升高。结论 IGBR可通过MAPK、PI3K/Akt信号通路,调节Bax和Bcl-2表达,诱发DEN大鼠肝癌细胞凋亡。 | 崔香丹 郑峰 朱洁波 全吉淑 尹学哲 | 2018 | 中国公共卫生2018，34，4： | 4 |
| 4 | RNAi检测IFRD1在肝癌增殖中的作用及不同中医治法的调节显示文摘目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌干扰素相关发育调节因子1(IFRD1)表达的调控差异,以及IFRD1在人肝癌细胞增殖中的作用。方法:(1)采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗后,Affymetrix rat 230A GeneChip arrays检测肝癌组织IFRD1表达的差异;(2)设计3个人IFRD1基因siRNA靶点,将重组质粒电转入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测细胞生长增殖情况、Realtime-PCR检测该基因的表达差异。结果:(1)芯片结果显示,IFRD1基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,不同中医治法对其具有不同程度的下调作用,其中活血化瘀治法下调作用较明显,对照西药化疗反而具有上调作用;(2)采用MTT法筛选到1个IFRD1基因RNA干扰有效靶序列,转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制(与阴性对照组相比,P<0.01);(3)实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达明显降低。结论:SMMC-7721肝癌细胞恶性增殖有赖于IFRD1基因的高表达,而中药活血化瘀治法对其具有下调作用。 | 梁超 方肇勤 管冬元 胡卫 代小平 吴中华 高必峰 | 2010 | 世界科学技术-中医药现代化2010，12，5： | 4 |
| 5 | MT1E在肝癌形成过程中的表达及其在肝癌细胞中的作用显示文摘目的:探讨MT1E基因在肝癌形成过程中不同阶段的表达及其在肝癌细胞中的生物学功能.方法:DEN诱发大鼠肝癌形成模型,分别观察造模4、8、16、20wk后肝脏组织病理形态学的改变以及MT1E基因表达的差异;针对MT1E基因mRNA序列设计2个siRNA靶点,分别经质粒重组后电转入SMMC-7721肝癌细胞株中,实时荧光定量PCR检测MT1E基因的表达,MTT法检测细胞生长增殖.结果:大鼠肝癌造模4、8wk时肝组织主要表现为炎性病变,而到16wk后呈现典型的增生病变,20wk后已全部发展为肝细胞癌.MT1E基因在造模16wk后表达明显增加,与对照组比较差异显著(芯片读数:11524vs5462).成功筛选到MT1E基因RNA干扰的一个有效靶序列,电转染72h后该基因的表达量较空白对照组与阴性对照组明显降低(0.38vs1.00,0.93,P<0.01).与阴性对照组比较,有效干扰靶点电转染144h后细胞的生长增殖得到了明显抑制(0.1700±0.0313vs0.5748±0.0480,P<0.01).结论:成功应用DEN诱发大鼠肝癌形成MT1E基因在肝癌形成的后期表达明显升高其高表达与肿瘤细胞的恶性增殖有关. | 管冬元 方肇勤 代小平 梁超 胡卫 吴中华 高必峰 | 2009 | 世界华人消化杂志2009，17，17： | 4 |
| 6 | 基因芯片技术在中医药研究中的运用显示文摘通过对近10年来关于基因芯片技术在中医药中的运用文献的研究,对基因芯片技术在中医证、中医基础理论,病因病机,治则治法,辨证论治与诊断,针灸以及中药的运用加以综述。 | 张俊清 孟智宏 樊小农 | 2012 | 辽宁中医杂志2012，39，7： | 3 |
| 7 | 大鼠肝癌高表达基因cDNA序列的克隆显示文摘目的克隆出大鼠肝癌高表达EST片段相关基因的cDNA完整表达序列,为进一步揭示其生物学功能奠定基础。方法通过基因芯片检测出DEN诱发的大鼠肝癌高表达的EST片段;其中部分高表达的EST片段,采用电子克隆与PCR相结合的方法,克隆出其cDNA完整表达序列。结果与正常大鼠肝组织比较,肝癌组织中明显高表达的EST片段有34个。采用EST电子克隆技术与PCR技术相结合的方法,成功克隆出4个EST片段的cDNA序列,经进一步BLAST对比分析,证明G15、G20、G36、G40等4个基因为新基因,并进行GenBank登录,登录号分别为DQ480746、DQ480747、DQ480744、DQ912022。结论利用大鼠基因芯片高通量地筛选出DEN诱发的肝癌组织高表达的有关基因,并在充分利用生物信息学资源的基础上,成功克隆出4个新基因的cDNA序列,为今后进一步深入观察这些基因的功能及其在肝癌发生、发展过程中的作用机制打下良好的研究基础。 | 管冬元 方肇勤 朱希 吴中华 高必峰 | 2008 | 实用肿瘤杂志2008，23，5： | 3 |
| 8 | RNA干扰研究波形蛋白在肝癌细胞增殖中的作用及不同中医治法的调节显示文摘目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌波形蛋白(vimentin,VIM)表达的调控差异,以及VIM在人肝癌细胞增殖中的作用。方法:将84只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组以及实验组,除正常组外均采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,实验组分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)VIM表达的差异;根据人VIM基因编码区设计2个siRNA靶点,并将构建好的重组质粒转染SMMC-7721人肝癌细胞株,Realtime-PCR检测转染前后该基因的表达差异,MTT法检测转染前后细胞生长增殖情况。结果:芯片结果显示,VIM基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加(模型组芯片读数为正常组10倍以上),健脾和活血治法明显下调其表达;采用MTT法筛选到一个VIM基因RNA干扰有效靶序列,脂质体转染144 h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;实时荧光定量PCR检测表明,转染72 h后该基因的表达量明显降低(转染效率为50%)。结论:肝癌细胞恶性增殖有赖于VIM基因的高表达,健脾和活血方药能显著下调该基因表达。 | 胡卫 方肇勤 梁超 管冬元 吴中华 | 2011 | 中国实验方剂学杂志2011，17，20： | 3 |
| 9 | UBE2D2基因在肝癌细胞中的作用及不同中医治法对其调控作用的影响显示文摘目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌UBE2D2表达的调控差异,以及UBE2D2在人肝癌细胞增殖中的作用。方法:采用DEN诱发大鼠肝癌,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗后,Affy-metrix rat 230A GeneChip arrays检测肝癌组织UBE2D2表达的差异;设计2个人UBE2D2基因siRNA靶点,将重组质粒经脂质体转入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测细胞生长增殖情况、Realtime-PCR检测该基因的表达差异。结果:芯片结果显示,UBE2D2基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,不同中医治法对其具有不同程度的下调作用,其中健脾理气法下调作用较明显;采用MTT法筛选到1个UBE2D2基因RNA干扰有效靶序列,转染6 d后细胞的生长增殖得到了明显的抑制(与阴性对照组相比,P<0.01);实时荧光定量PCR检测表明,转染6 d后该基因的表达明显降低。结论:UBE2D2基因的高表达与肝癌细胞恶性增殖有关,而中药健脾理气治法对其具有下调作用。 | 梁超 方肇勤 管冬元 胡卫 代小平 吴中华 高必峰 | 2011 | 上海中医药大学学报2011，25，2： | 2 |
| 10 | RNAi研究角蛋白18在肝癌增殖中的作用及不同中医治法的调节显示文摘目的观察不同中医治法对大鼠肝癌角蛋白18(CK18)表达的调控差异,及其在人肝癌细胞增殖中的作用。方法 (1)采用DEN诱发大鼠肝癌模型,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治法治疗后,检测肝癌组织(和正常肝组织)CK18表达的差异;(2)设计2个人CK18基因siRNA靶点,将重组质粒电转入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测细胞生长增殖情况、Realtime-PCR检测该基因的表达差异。结果 (1)芯片结果显示,CK18基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,不同中医治法对其具有不同程度的轻度调控作用,其中健脾益气治法下调作用较明显;(2)采用MTT法筛选到一个CK18基因RNA干扰有效靶序列,转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;(3)实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达已明显降低。结论肝癌细胞恶性增殖有赖于CK18基因的高表达,目前常用治法对该基因的调控作用有限,因而该基因可望作为肝癌疗效筛选评价指标。 | 胡卫 方肇勤 梁超 管冬元 代小平 吴中华 高必峰 | 2010 | 安徽医药2010，14，6： | 2 |
| 11 | RNAi研究CK18在肝癌增殖中的作用及不同中医治法的调节显示文摘目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌CK18表达的调控差异,以及CK18在人肝癌细胞增殖中的作用。方法:(1)采用DEN诱发大鼠肝癌,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗后,检测肝癌组织CK18表达的差异;(2)设计2个人CK18基因siRNA靶点,将重组质粒电转入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测细胞生长增殖情况、Realtime-PCR检测该基因的表达差异。结果:(1)芯片结果显示,CK18基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,不同中医治法对其具有不同程度的轻度调控作用,其中健脾益气治法下调作用较明显;(2)采用MTT法筛选到一个CK18基因RNA干扰有效靶序列,转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;(3)实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达已明显降低。结论:肝癌细胞恶性增殖有赖于CK18基因的高表达,目前常用治法对该基因的调控作用有限,因而该基因可望作为肝癌疗效筛选评价指标。 | 胡卫 方肇勤 梁超 管冬元 代小平 吴中华 高必峰 | 2010 | 辽宁中医杂志2010，37，4： | 2 |
| 12 | 金属硫蛋白1E的研究进展显示文摘人类金属硫蛋白(metallothionein,MT)家族基因定位于染色体16q13,含有MT1E、MT2A、MT1F、MT1G、MT1H、MT1X等10个亚型的编码区,其表达产物是一组低分子量、半胱氨酸丰富的金属结合蛋白。 | 方肇勤 管冬元 梁超 | 2011 | 中西医结合肝病杂志2011，21，2： | 2 |
| 13 | MT1E在肝癌细胞中的作用及不同中医治法对其表达调控的差异研究显示文摘目的:比较常用不同中医治法对MT1E表达调控作用的差异,以及初步探讨MT1E在肝癌细胞中的生物学功能。方法:(1)以DEN诱发大鼠肝癌形成为模型,应用基因芯片检测健脾益气、清热解毒、活血化瘀等常用中医治法对MT1E基因表达的差异;(2)针对MT1E基因mRNA序列设计2个siRNA靶点,分别经质粒重组后电转入SMMC-7721肝癌细胞株中,用实时荧光定量PCR技术检测MT1E基因的表达情况,用MTT法检测细胞生长增殖情况。结果:(1)芯片结果显示,MT1E基因在肝癌形成后表达明显增加,不同中医治法对其具有不同程度的调控作用,其中健脾益气法的下调作用最明显;(2)成功筛选到MT1E基因RNA干扰的1个有效靶序列,经实时荧光定量PCR技术检测到电转染72h后,该基因的表达水平明显降低;(3)MTT的结果显示,有效干扰靶点电转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制。讨论:MT1E基因是中医健脾益气法防治原发性肝癌的有效靶点之一,经生物学功能研究表明,该基因的高表达与肿瘤细胞的恶性增殖有关。 | 管冬元 方肇勤 代小平 梁超 胡卫 吴中华 高必峰 | 2009 | 中国中医基础医学杂志2009，15，11： | 2 |
| 14 | 银杏叶对黄曲霉毒素B1诱发大鼠肝癌IGF-ⅡmRNA及蛋白表达影响的观察显示文摘目的:动态观察银杏叶提取物(EGb761)在抑制黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发大鼠肝癌(HCC)过程中对肝组织相关基因IGF-ⅡmRNA及蛋白表达水平的影响,从分子生物学水平揭示银杏叶抗癌的机制及其效果。方法:将70只4周龄Wistar雄性大鼠随机分为AFB1组(25只)、AFB1+EGb761组(25只)及对照组(20只)。在诱发大鼠HCC过程中,分别于第13周、33周及53周对大鼠进行肝组织活检;实验至第73周处死全部动物取肝组织。利用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法动态检测肝组织中IGF-ⅡmRNA及相应蛋白的表达情况。结果:AFB1组原发性HCC发生率为58.8%(10/17);AFB1+EGb761组发生率为29.4%(5/17);对照组为0(0/16)。AFB1+EGb761组HCC发生率显著低于AFB1组(P<0.05)。AFB1+EGb761组肝组织IGF-2mRNA及相应蛋白表达水平在第53周及73周较AFB1组均显著下降,差异有统计学意义,P<0.05。结论:银杏叶提取物(EGb761)具有抑制AFB1致大鼠HCC的作用。其机制可能与调控肝细胞增殖基因IGF-ⅡmRNA及蛋白表达水平有关。 | 郑海平 欧超 曹骥 李瑗 苏建家 李国坚 | 2012 | 中华肿瘤防治杂志2012，19，17： | 1 |
| 15 | 论方肇勤对中医辨证论治学术的探索显示文摘本文介绍方肇勤在中医辨证论治理论方面的学术成果。从辨证论治理论研究及其计算机程序化模拟研究、辨证论治动物实验方法学研究、肝癌同病异证证候特征及其物质基础研究、中药复方及其拆方后不同治法的研究予以简要梳理。方肇勤在学术上的突出成就体现在辨证中提出了“新值”和“潜值”“显值”等概念,创建了大鼠/小鼠辨证论治实验方法学,率先提出与践行按照不同治法拆方的思路研究复方药效,领先开展大规模临床病例的证候流行病学调查研究,同步从神经内分泌免疫组织基因表达谱全方位探索证候物质基础,所取得的研究成果丰富与发展了当代中医基础理论。 | 潘志强 方肇勤 | 2021 | 中国中医基础医学杂志2021，27，4： | 1 |
| 16 | 基因芯片技术在中医药防治肿瘤研究中的应用显示文摘基因芯片技术已被广泛应用于中医药防治肿瘤的研究。本文归纳总结了近年来,基因芯片技术在肿瘤常见中医证候的物质基础研究、不同中医治法的作用机制研究、中药及其有效成分抗肿瘤的机制研究等领域中的应用情况,并对其中存在的问题及今后的研究前景进行了思考与展望。 | 胡卫 方肇勤 | 2009 | 上海中医药大学学报2009，23，3： | 1 |
| 17 | RNAi研究TrxR1在肝癌细胞增殖中的作用及不同中医治法的调节显示文摘目的观察不同中医治法对大鼠肝癌TrxR1表达的调控差异,以及TrxR1在人肝癌细胞增殖中的作用。方法将84只雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组以及实验组,除正常组外均采用DEN诱发大鼠肝癌,实验组分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)TrxR1表达的差异;设计2个人TrxR1基因siRNA靶点,将重组质粒通过脂质体转染入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测转染前后细胞生长增殖情况、Real-time-PCR检测该基因的表达差异。结果芯片结果显示,TrxR1基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,益气健脾治法明显下调其表达;采用MTT法筛选到一个TrxR1基因RNA干扰有效靶序列,脂质体转染144 h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达量明显降低。结论肝癌细胞恶性增殖有赖于TrxR1基因的高表达,益气健脾方药能显著下调该基因表达。 | 胡卫 方肇勤 梁超 管冬元 吴中华 | 2012 | 时珍国医国药2012，23，1： | 1 |
| 18 | 细胞角蛋白18及其在肝癌中作用的研究进展显示文摘细胞角蛋白与肿瘤关系的研究已被广泛关注。但是目前角蛋白18在人类肝细胞癌表达的研究尚少,应用于中医药防治肿瘤的研究亦属罕见。归纳总结了近5年来,细胞角蛋白18(cytokeratin18,CK18,KRT18)在人肝细胞癌中的表达以及其对肝癌细胞恶性增殖的作用及意义。并对其中存在的问题及今后的研究前景进行了思考与展望。 | 张翠英 方肇勤 梁超 | 2012 | 辽宁中医杂志2012，39，3： | 1 |
| 19 | 银杏叶提取物对AFB1所致大鼠肝癌基因P16Ink4a mRNA及蛋白表达的影响显示文摘目的:动态观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,EGb761)在抑制黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发大鼠肝癌过程中对肝组织相关基因P161nk4a mRNA表达水平的影响,进一步从分子生物学水平揭示银杏叶提取物抗癌的机制及其效果。方法:将70只4周龄Wistar雄性大鼠随机分为3组:AFB1组(25只),AFB1+EGb761组(25只)及对照组(20只)。在诱发肝癌过程中,分别于第13、33及53周对大鼠进行肝组织活检;至第73周处死全部动物取肝组织。应用实时荧光定量PCR和Westernblot技术动态检测肝组织中P16Ink4a mRNA及相应蛋白的表达情况。结果:AFB1组原发性肝癌发生率为58.8%(10/17);AFB1+EGb761组为29.4%(5/17);对照组为0(0/16) AFB1+EGb761组肝癌发生率显著低于AFB1组(P<0.05)。AFB1+EGb761组的肝组织P16Ink4amRNA及相应蛋白表达水平在第53周及第73周时均明显高于AFB1组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:银杏叶提取物(EGb761)具有抑制AFB1致大鼠肝癌的作用。其机制可能与调控肝细胞抑癌基因P16Ink4a | 郑海平 欧超 曹骥 李瑗 唐艳萍 李黄弈 苏建家 李国坚 | 2012 | 中国肿瘤临床2012，29，15： | 1 |
| 20 | 3种不同中医治法对大鼠肝脏癌细胞半乳糖凝集素表达的影响显示文摘目的观察3种不同中医治法对大鼠肝癌半乳糖凝集素(GAL-3)表达的调控差异以及GAL-3在人肝癌细胞增殖中的作用,以探讨肝癌治疗的新靶点。方法将72只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、喃氟啶组(喃氟啶8.33mg/100g)、清热解毒组(清热解毒方1.5g/100g)、活血化瘀组(活血化瘀方1.27g/100g)、健脾理气组(健脾理气方1.75g/100g),每组12只,除正常组外,其余各组大鼠采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,各组均给药6周,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)GAL-3的表达。根据人GAL-3基因编码区设计2个siRNA靶点,并构建重组质粒转染SMMC-7721人肝癌细胞株,分为空白组、阴性组、GAL-3RNAi组,实时定量PCR检测各组GAL-3mRNA的表达,MTT法检测各组转染后24h、72h、144h细胞增殖。结果模型组GAL-3基因表达显著增加,健脾理气组能下调其表达;转染72h后GAL-3RNAi组GAL-3mRNA表达量明显降低;转染144h后,GAL-3RNAi组肝癌细胞的生长增殖得到了明显的抑制(P<0.01)。结论 GAL-3基因在肝癌组织中高表达,健脾理气方能显著下调该基因表达。 | 胡卫 方肇勤 梁超 管冬元 吴中华 | 2013 | 中医杂志2013，54，16： | 0 |
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