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| 1 | 食用植物油中动物源性成分PCR检测方法的建立显示文摘本文建立了应用PCR技术快速鉴别食用植物油中动物源性成分的方法。以食用植物油中掺入的动物源性基因为靶标,自行设计16S rRNA基因通用引物,同时选用动物物种特异性引物进行PCR扩增,分别得到相应的目的片段。通过三对16S rRNA基因通用引物,建立了从食用植物油中快速检测是否含有动物源性成分的方法;利用所选的动物物种特异性引物,进一步建立了从食用植物油中鉴定猪、牛、羊、鸡、鱼5种动物源性成分的方法,此方法能检测出含有0.1%(m/m)动物源性成分的植物油。 | 赵琳娜 王丹 胡凤月 吴鹏 韩月贝 杨红莲 | 2012 | 现代食品科技2012，28，5： | 14 |
| 2 | 3种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立显示文摘应用靶序列富集多重聚合酶链式反应(t arget-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR)技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌fem A基因、沙门氏菌inv A基因和志贺氏菌ipa H基因为靶基因,设计3对特异性引物,并与通用引物连接组成Tem-PCR引物,通过反应条件优化,建立了Tem-PCR检测方法。结果显示,建立的Tem-PCR方法特异性强,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的检测灵敏度分别为1.1×10^3、2×10^3 CFU/m L和1.2×10^3 CFU/m L。Tem-PCR检测方法有效地解决了传统多重PCR引物扩增效率不均衡的问题。 | 刘忠梅 徐义刚 曲敏 莫春生 刘新亮 李苏龙 | 2016 | 食品科学2016，37，4： | 14 |
| 3 | 食品中Escherichia coli O157:H7微滴数字PCR绝对定量检测方法的建立显示文摘为建立食品中Escherichia coli O157:H7的微滴数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)快速定量检测方法,针对E.coli O157:H7的特异性单拷贝基因hlyA设计引物探针,并进行特异性、灵敏度和重复性实验,同时通过人工污染三文鱼样品的检测,比较平板计数法、real-time PCR和ddPCR方法的测定值效果。结果表明,所建立的E.coli O157:H7 ddPCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。细菌纯培养液中定量限为105 CFU/mL,检出限为25 CFU/mL,人工污染三文鱼样品中检出限为110 CFU/g。对不同人工污染水平的三文鱼样品,ddPCR与平板计数的测定值结果无显著性差异(P>0.05),比real-time PCR方法的测定值结果更加稳定、准确。因此,本研究建立的ddPCR方法能够更加快速、准确、灵敏、特异地绝对定量检测食品中E.coli O157:H7。 | 魏咏新 马丹 李丹 徐蕾蕊 魏海燕 张西萌 刘莉 曾静 | 2020 | 食品科学2020，41，16： | 14 |
| 4 | 大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制显示文摘目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条。结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果。制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157:H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL。试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应。结论:大肠杆菌O157:H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段。 | 解泉源 赖卫华 刘春梅 孙吉昌 邓省亮 刘成伟 魏华 游兴勇 熊勇华 | 2013 | 食品科学2013，34，16： | 14 |
| 5 | 应用DPO-PCR技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7显示文摘利用双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO)聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7。根据DPO引物设计原则,以肠出血性大肠杆菌O157∶H7 rfbE基因为靶基因设计一对DPO引物,经过反应体系的优化,建立了肠出血性大肠杆菌O157∶H7 DPO-PCR检测方法,其检测灵敏度约为94 CFU/mL。与常规PCR方法相比,所建立的DPO-PCR方法对退火温度不敏感,在引物设计和实验过程中不需要对引物及其退火温度反复优化,同时基于DPO引物的特殊结构又增强了其特异性。DPO-PCR方法设计简易、特异性强,为致病性微生物的快速准确检测提供了新途径。 | 徐义刚 李丹丹 崔丽春 刘忠梅 李苏龙 | 2014 | 食品科学2014，35，8： | 11 |
| 6 | 数字PCR在食源性致病微生物检测中的应用研究进展显示文摘大多数食源性疾病由食源性致病微生物引发,研究和建立食源性致病微生物的快速有效检测方法对于食品安全风险监控及保障人们的身体健康具有重要意义。相对于传统PCR,数字PCR具有较好的准确度和重现性,可实现绝对定量分析,为快速准确地进行食品安全检测提供了一种崭新的技术平台。本文主要介绍了数字PCR中微滴式数字PCR和芯片式数字PCR的基本原理、种类、应用及其研究进展,深入探讨了数字PCR技术在沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、单核细胞增生李斯特氏菌、阴沟杆菌和金黄色葡萄球菌等食源性致病微生物检测中的应用。数字PCR技术目前在转基因成分和动物源性成分定量检测中都得到了较好的应用,在食源性致病微生物中的应用技术还有待更好的发展。 | 杨纯佳 张娟 周臣清 霍丽斯 崔海萍 王力清 | 2016 | 食品安全质量检测学报2016，7，12： | 11 |
| 7 | 噬菌体控制主要食源性致病菌的研究进展显示文摘食源性细菌疾病是当今世界上最广泛的公共卫生问题之一。由抗生素滥用导致的耐药菌株出现,以及抗生素禁用,使得人们对食源性细菌疾病的控制更加困难。噬菌体是细菌的天敌,具有感染并裂解细菌的功能,与抗生素相比,噬菌体制剂具有特异性强、自我增殖快、抗菌能力强、研发时间短等优点,因此近年来有关噬菌体作为抗菌制剂的研究受到普遍关注。本文就噬菌体在食源性病原微生物控制方面的应用研究进展作一综述,以期为噬菌体及其制剂在保障动物性食品安全领域的深入研究提供一定的参考。 | 曹振辉 金礼吉 徐永平 李淑英 张建城 马永生 李化强 曹放 杨扬 | 2013 | 食品科学2013，34，5： | 9 |
| 8 | 纳米金标记抗体增强SPR检测大肠杆菌O157∶H7显示文摘将金纳米粒子(AuNPs)标记的大肠杆菌O157∶H7(E.coli O157∶H7)的多克隆抗体(PAb)作为二抗,采用氨基偶联法将PAb固定在传感器表面作为一抗,通过三明治方法用双通道表面等离子体子共振(SPR)传感器对E.coli O157∶H7进行检测,并与SPR直接法检测进行了比较.结果表明,直接法的检出限为103cfu/mL,线性范围为103~109cfu/mL;AuNPs增强三明治法的检出限为10 cfu/mL,线性范围为10~1010cfu/mL,灵敏度比直接法提高了100倍,且具有更宽的检测范围.本方法不仅检测时间短,而且具有良好的选择性和重现性. | 刘霞 李蓉卓 李蕾 李文进 周春娇 | 2013 | 高等学校化学学报2013，34，6： | 8 |
| 9 | 大肠杆菌O157:H7量子点免疫层析试纸条的研制显示文摘研制一种大肠杆菌O157:H7量子点免疫层析试纸。利用自制水溶性量子点静电偶联大肠杆菌O157:H7单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7单克隆抗体和羊抗兔二抗划线于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,制备双抗体夹心法检测大肠杆菌O157:H7的量子点免疫层析试纸。该试纸条能在5min内完成检测,检测限制为1×104 CFU/mL,对常见的8种食源菌无交叉反应。基于量子点的大肠杆菌O157:H7免疫层析试纸操作简便,灵敏度和特异性较好,可用于食品快速检测。 | 袁列江 李萌立 王书源 杨梦昕 李忠海 | 2015 | 食品与机械2015，31，4： | 8 |
| 10 | 聚合酶链式反应技术快速检测化妆品中大肠杆菌的研究显示文摘利用聚合酶链式反应(PCR)技术建立了一种快速检测化妆品中大肠杆菌的方法。根据大肠杆菌的ITS保守序列设计特异性引物,确定引物的特异性;比较3种不同提取大肠杆菌DNA的方法,确定煮沸法为最优方法;模拟染菌的化妆品样品,对其进行增菌,并作为模板进行PCR扩增。结果表明,此方法可以在原样品活菌浓度约8×100 cfu/mL时通过12 h增菌后检测出来,总的检测时间可以控制在24 h内。 | 牛玉倩 高路 宋丽雅 何聪芬 | 2011 | 日用化学工业2011，41，5： | 6 |
| 11 | 量子点标记荧光免疫试纸条可视化检测肉品中志贺氏菌研究显示文摘志贺氏菌是一类具有强传染性和危害严重的革兰阴性食源性致病菌。该文利用自制的CdTe量子点偶联志贺氏菌单克隆抗体,将志贺氏菌单克隆抗体和羊抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维素膜,并分别作为试纸条检测线和质控线,研制一种可视化检测志贺氏菌的量子点免疫荧光试纸条。该试纸条对肉类实际样品的检测限为1×104 CFU/mL,单个样品检测时间只需15 min,对常见的5种食源性致病菌均无交叉反应性。该方法构建的基于量子点免疫荧光试纸条满足快速、可视化、高灵敏检测志贺氏菌需求,可用于肉类食品的快速检测。 | 朱芳茜 何扩 张秀媛 魏东 王硕 李育峰 陈一 赵瑞平 | 2021 | 食品研究与开发2021，42，3： | 6 |
| 12 | 牛源大肠杆菌O157∶H7的分离鉴定及其生物学特性研究显示文摘目的为了解郑州地区牛携带大肠杆菌O157∶H7的情况。方法应用本实验室已建立的大肠杆菌O157∶H7多重PCR方法对其进行了检测,并对临床分离的动物源大肠杆菌O157∶H7的生物学特性及携带的毒力基因情况进行了分析。结果所采集的样品中共分离鉴定出2株大肠杆菌O157∶H7,分别命名为L1和L2,其检出率为1.4%;临床分离菌株的生化试验结果均符合大肠杆菌的常规生化特性;L1和L2菌株的生长曲线一致,均比标准株的迟缓期短,较早进入对数生长期;L1菌株在48h可形成成熟完整的生物被膜,L2菌株在36h形成成熟完整的生物被膜;L1和L2菌株均携带有hlyA和eaeA毒力基因,同时L1还携带Stx2毒力基因。结论该结果为大肠杆菌O157∶H7流行病学调查提供了相关数据,对郑州地区大肠杆菌O157∶H7有效的监测奠定了基础。 | 程慧芳 寇亚楠 陈雅君 刘中原 张龙现 王亚宾 陈丽颖 胡慧 | 2014 | 中国人兽共患病学报2014，30，10： | 5 |
| 13 | 食源性致病菌分子生物学检测技术研究进展显示文摘随着分子生物学的不断进步,对食源性致病菌的检测已经发展到了研究生物大分子的阶段.综观目前出现的一些检测食源性致病菌的新型技术,发现DNA探针技术、PCR技术等检测技术,具有敏感、特异和快速的特点,已经成为食源性致病菌检测的重要工具.未来食源性致病菌的检测将向着高敏感性、高特异性、操作便捷的方向发展,这就依赖于目前已有技术的改进创新、多种检测技术的联合使用及一些新技术和新方法的出现. | 景建洲 李红利 孙新城 胡金强 耿尧 高辉 张华 | 2015 | 郑州轻工业学院学报(自然科学版)2015，30，5： | 4 |
| 14 | 靶序列富集多重PCR结合DHPLC同时检测5种食源性致病菌显示文摘目的建立同时检测沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌5种食源性致病菌的简便、灵敏的高通量方法。方法根据GenBank公布的5种致病菌的特异性靶基因序列,设计5对特异性引物,与通用引物连接构成复合引物。经过反应条件的优化,建立了5种致病菌的靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem-PCR)扩增方法,扩增产物采用变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技术进行检测。结果采用Tem-PCR-DHPLC方法,检测48株试验菌株,未发现非特异性结果。对5种致病菌检测灵敏度,除金黄色葡萄球菌为620 cfu/mL外,其余都小于100 cfu/mL。对4种样品的检测结果与国家标准方法相符合。结论 Tem-PCR-DHPLC检测方法,相比传统多重PCR方法,能有效地解决引物扩增效率不均衡的问题,不需优化引物浓度,方法特异性强,灵敏度高,具有较好的实用性。 | 刘忠梅 曾繁华 罗佳 徐义刚 曲敏 莫春生 刘新亮 李苏龙 | 2015 | 食品安全质量检测学报2015，6，6： | 4 |
| 15 | 橙汁中的条件致病酵母菌及其控制策略显示文摘橙汁中普遍存在酵母菌,其中部分对人体是无害的。但是近年来的研究发现,一些酵母菌的存在不但会引起橙汁腐败,还会导致人体感染患病。酵母菌是橙汁中最常见的条件致病菌之一,随着人们对橙汁饮用安全和人体健康潜在威胁的深入认识,条件致病酵母菌日趋受到重视。对致病酵母菌的研究也成为生命科学研究的热点。目前已知的橙汁酵母致病菌有14种:近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)、星形假丝酵母(C.stellata)、热带假丝酵母(C.tropicalis)、无名假丝酵母(C.famata)、小丘假丝酵母(C.colliculosa)、涎沫假丝酵母(C.zeylanoides)、葡萄牙棒孢酵母(Clavispora lusitaniae)、新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)、汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)、葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)、异常汉逊酵母(Pichia anomala)、粘质红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、阿萨希丝孢酵母(Trichosporon asahii)。本文对这些橙汁中条件致病酵母菌的种类、鉴定方法及其控制策略进行了系统地的综述与评述,为橙汁生产、储藏、销售和消费提供参考。 | 曹敏 段倩倩 刘家艳 黄茜 杨晓红 | 2014 | 食品安全质量检测学报2014，5，7： | 3 |
| 16 | EMA与PCR结合检测大肠杆菌O157方法的研究显示文摘为了建立1种快速检测样品中大肠杆菌O157并能区分死细菌与活细菌的检测方法,将叠氮溴化乙锭(EMA)与PCR结合,以O157特有的抗原基因rfbE为靶基因,以O157的纯培养物为模板扩增,进行灵敏度、特异性、曝光时间及最佳EMA浓度筛选实验。结果显示:该检测方法的灵敏度为1.2×102CFU/mL,最佳曝光时间为1 min。终浓度≥1μg/mL的EMA,能有效抑制O157死菌的扩增,而当EMA终浓度≤16μg/mL时对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制作用。EMA-PCR能有效减少O157活菌检测过程中假阳性结果的出现。 | 高延玲 狄元冉 李金磊 董鹏 班付国 张发旺 | 2014 | 畜牧与饲料科学2014，35，10： | 3 |
| 17 | 三重PCR(聚合酶链式反应)检测鸡肉中常见病原菌的研究显示文摘建立鸡肉中常见3种致病菌即小肠耶尔森氏菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌的多重PCR(聚合酶链式反应)检测方法。方法:分别选择小肠耶尔森氏菌、沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7基因组中高特异性的ail基因、inv A基因和ECs3032,设计并筛选具有高特异性的引物用于PCR(聚合酶链式反应)扩增。建立一种此3种致病菌的三重PCR检测方法,并通过人工污染实验对该法进行验证。结果:3对引物能特异地扩增出251、347、469 bp的目的条带;灵敏度:对这3种致病菌的单菌培养物检测灵敏度均为101CFU/m L。同时检测3种菌的灵敏度为103 CFU/m L。结论:该检测方法高效、精确、特异性强、灵敏度高,6 h^8 h内可同时快速检测多种致病菌,节省了大量时间。在实际检测中具有很好的实用价值和开发前景,可在食品检测和临床检验等领域大力推广。 | 潘彤媛 张伟 | 2016 | 食品研究与开发2016，37，14： | 2 |
| 18 | PCR-核酸试纸条法快速检测鸽子源性成分显示文摘[目的]提高动物源性成分检测效率,建立PCR-核酸试纸条快速检测技术体系。[方法]针对物种特异性DNA序列,设计并标记引物;建立并优化PCR反应体系;利用通用核酸试纸条进行结果判读。[结果]试验表明,PCR-核酸试纸条特异性高;绝对灵敏度为0.001 3 ng/μL,混合样品,实际灵敏度为0.01%;加工处理样品,实际灵敏度为0.1%;最低检测限检出率为100%,稳定性良好。[结论]综上,PCR-核酸试纸条方法是一种既有PCR反应的高灵敏度,又具有免疫学检测的特异性好的特点,同时操作简便的快速检测方法。 | 田卓 曹际娟 崔妍 赵良娟 李宗梦 | 2016 | 安徽农业科学2016，44，20： | 2 |
| 19 | 应用Tem-PCR技术同时检测3种致病菌的研究显示文摘应用靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem-PCR)技术建立同时检测沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157三种致病菌的高通量简易检测方法.实验分别以沙门氏菌的inv A基因、单核细胞增生李斯特氏菌的hly基因、大肠埃希氏菌O157 rfb E基因为靶基因,设计3对特异性引物,并与通用引物连接组成Tem-PCR引物,通过反应条件优化,建立了TemPCR检测方法.结果表明,建立的Tem-PCR方法特异性强,其检测灵敏度分别为沙门氏菌1.1×103CFU/m L、单核细胞增生李斯特氏菌5.6×102CFU/m L、大肠埃希氏菌O157 2.3×103CFU/m L.方法不需要优化调整各引物对的浓度,易于使用,有效地解决了传统多重PCR方法扩增效率不均衡的问题. | 曲敏 莫春生 刘佳 刘忠梅 徐义刚 李苏龙 | 2016 | 哈尔滨商业大学学报(自然科学版)2016，32，1： | 1 |
| 20 | 基于噬菌体特异性的新型荧光酶联方法检测食品中大肠埃希菌O157∶H7显示文摘目的对一种基于噬菌体特异性的检测食品中大肠埃希菌O157∶H7的新型荧光酶联方法(VIDASECPT)进行了评价。方法利用VIDASECPT、VIDASECO、BAXO157三种快速方法检测不同浓度大肠埃希菌O157∶H7标准菌株的生理盐水悬浮液,并对VIDASECPT和常规培养法检测食品中大肠埃希菌O157∶H7进行了比对。结果 VIDASECPT检测大肠埃希菌O157∶H7的检出限为104 CFU/ml,并且不受大肠埃希菌背景菌的干扰,其他两种快速方法的检出限均为105 CFU/ml,其中VIDASECO易受到背景菌的干扰;检测不同食品基质中大肠埃希菌O157∶H7,当大肠埃希菌O157∶H7的浓度为104 CFU/ml时,VIDASECPT与常规培养法无统计学差异。结论 VIDASECPT方法检测大肠埃希菌O157∶H7具有快速、灵敏、抗干扰性强的特点。 | 吕敬章 刘慧玲 黄李华 赵芳 马淑棉 洪小柳 | 2012 | 中国食品卫生杂志2012，24，3： | 1 |
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