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| 1 | 干细胞与再生医学研究进展显示文摘干细胞具有分化成为体内所有类型细胞的能力,因此,其在再生医学治疗、体外疾病模拟、药物筛选等方面具有广阔的应用前景。干细胞技术在近些年取得了突飞猛进的发展,特别是诱导多能性干细胞的出现使干细胞领域经历了一场巨大的变革。我国干细胞研究在这场干细胞技术变革中取得了多项重大成果,逐渐成为了世界干细胞研究领域中的重要力量。本综述着重介绍近几年来,主要是诱导多能性干细胞技术出现之后,我国在干细胞和再生医学领域取得的重要进展,主要涵盖诱导多能性干细胞、转分化、单倍体干细胞以及基因修饰动物模型和基因治疗等方面。 | 王立宾 祝贺 郝捷 周琪 | 2015 | 生物工程学报2015，31，6： | 20 |
| 2 | CRISPR-Cas9技术在干细胞中的应用显示文摘成簇规律间隔短回文重复序列系统(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,associated RNA guided endonuclease Cas9(CRISPR-Cas9)是细菌或古细菌在长期演化过程中形成的抵御外来遗传物质的一种获得性免疫防御机制,其中II型CRISPR-Cas系统依赖Cas9核酸内切酶靶向剪切外源DNA。Cas9内切酶在向导RNA的指导下靶向性地剪切特定基因位点,已被广泛应用在不同种属的基因编辑研究中。利用CRISPR-Cas9基因编辑系统的优势,结合现有干细胞研究技术,在小鼠、大鼠,甚至灵长类动物的功能基因组研究中,可以大幅提高各种基因修饰动物的获得效率,缩短获得的时间,从而快捷有效地研究基因功能;同时,可以建立包括灵长类疾病模型在内的多种动物疾病模型,促进生物医学的发展,造福人类。 | 梁丹 吴宇轩 李劲松 | 2015 | 生命科学2015，27，1： | 5 |
| 3 | Local transgene expression and whole-body transgenesis to model brain diseases in nonhuman primate显示文摘Animal model is an essential tool in the life sciences research, notably in understanding the pathogenesis of the diseases and for further therapeutic intervention success. Rodents have been the most frequently used animals to model human disease since the establishment of gene manipulation technique. However, they remain inadequate to fully mimic the pathophysiology of human brain disease, partially due to huge differences between rodents and humans in terms of anatomy, brain function, and social behaviors. Nonhuman primates are more suitable in translational perspective. Thus, genetically modified animals have been generated to investigate neurologic and psychiatric disorders. The classical transgenesis technique is not efficient in that model; so, viral vector-mediated transgene delivery and the new genome-editing technologies have been promoted. In this review, we summarize some of the technical progress in the generation of an ad hoc animal model of brain diseases by gene delivery and real transgenic nonhuman primate. | Lucie Chansel-Debordeaux Erwan Bezard | 2019 | Animal Models and Experimental Medicine2019，2，1： | 3 |
| 4 | 胚胎干细胞与雌性生殖细胞互相转化的研究进展显示文摘胚胎干细胞是全能性的干细胞,可以向3个胚层的细胞转化;雌性生殖细胞也被认为是一种'干细胞',因为其将遗传信息从一代传至下一代。两者具有相同和不同的特殊标志物,并且可以通过不同的方法互相转化,为'胚胎干细胞-卵母细胞环路'提出设想。 | 赵婷婷 钱方波 熊芳 沈晔 郭凌岑 钱莉 董动丽 李晓燕 | 2015 | 生殖与避孕2015，35，2： | 3 |
| 5 | Derivation of Haploid Neurons from Mouse Androgenetic Haploid Embryonic Stem Cells显示文摘Dear Editor,Haploid embryonic stem cells(ha ESCs)hold great potential for genetic screening and the analysis of recessive phenotypes.Several studies have recently reported the generation of mammalian ha ESCs through gamete manipulation,and evaluated the benefits of using them for studying functional genomics in different mammals[1–4].These ha ESCs have been shown to give rise to three | He Xu Chunmei Yue Ting Zhang Yuanyuan Li Ao Guo Jiaoyang Liao Gang Pei Jinsong Li Naihe Jing | 2017 | Neuroscience Bulletin2017，33，3： | 3 |
| 6 | 哺乳动物单倍体胚胎干细胞的建立与应用显示文摘哺乳动物胚胎干细胞通常为二倍体,限制了其在后基因组时代功能基因研究上的应用.近年来,随着不同物种单倍体胚胎干细胞的建立,科学家获得了一种可用于高通量正反向遗传筛选的细胞工具.单倍体胚胎干细胞具有类似于二倍体胚胎干细胞的无限增殖能力、基因表达模式、分化潜能等特点,可以在细胞水平开展遗传筛选研究;通过不同物种单倍体干细胞的融合形成异源二倍体细胞可以用于研究基因的演化.另外,小鼠单倍体胚胎干细胞可代替配子用于产生动物,这为研究基因印记在胚胎发育过程中的作用、快速构建携带复杂基因修饰的模式动物、进行个体水平遗传筛选等提供了一个新的遗传学工具.最近,单倍体胚胎干细胞的基因组标签计划的提出,以构建所有编码蛋白质基因的标签小鼠资源平台为目的,将促进蛋白质研究的标准化,并为揭开胚胎发育复杂而有序的蛋白质调控网络提供工具. | 丁一夫 李劲松 周琪 | 2019 | 中国科学:生命科学2019，49，12： | 3 |
| 7 | 干细胞与再生医学显示文摘多能干细胞(PSCs)具有发育的多潜能性,可以分化为机体各种细胞类型,是再生医学领域进行细胞替代治疗以及组织/器官再生的基础.如何由终末分化的体细胞重编程获得病人特异的PSCs,是再生医学领域的核心问题之一,目前主要采取两种重编程策略:借助核移植技术由早期胚胎体外建系获得,或通过诱导重编程技术获得.本文将综述不同多能性等级PSCs的获得方法以及其在多能性机制研究中的应用,并讨论PSCs通过异种嵌合实现组织/器官再造的潜在应用价值.PSCs的研究不仅推动了基础生物学研究的发展,同时也为再生医学走向临床开辟了道路. | 王加强 周琪 | 2016 | 中国科学:生命科学2016，46，7： | 3 |
| 8 | In vitro expansion of human sperm through nuclear transfer显示文摘Dear Editor,Mammalian haploid embryonic stem cells(haESCs)represent an ideal tool for genetic analysis due to the presence of only one set of genetic materials.HaESCs fall into two readily distinguishable groups based on their genome origins:parthenogenetic haESCs(PG-haESCs)that are derived from oocyte-originated parthenogenetic embryos and androgenetic haESCs(AG-haESCs)that are produced through sperm nuclear transfer.Both PG-and AGhaESCs are feasible for delineating genome function at cellular level in vitro.Importantly,AG-haESCs can be used as a sperm replacement and applied to deciphering gene function at organismal level when combined with CRISPR-Cas9 technology.1 However,while PG-haESCs have been generated from both rodent and primates,2-5 AG-haESCs can only be obtained in rodent to date. | Xiaoyu Merlin Zhang Keliang Wu Yuxuan Zheng Han Zhao Junpeng Gao Zhenzhen Hou Meiling Zhang Jiaoyang Liao Jingye Zhang Yuan Gao Yuanyuan Li Lin Li Fuchou Tang Zi-Jiang Chen Jinsong Li | 2020 | Cell Research2020，30，4： | 3 |
| 9 | 小鼠孤雌胚胎及孤雌胚胎干细胞中印记基因的表达显示文摘小鼠孤雌胚胎体内发育最多不能超过10.5d,发育失败的主要原因是胚外组织发育缺陷和印记基因表达的异常。随着小鼠孤雌二倍体和单倍体胚胎干细胞的建系成功,不仅能作为研究印记基因的理想模型,还能够作为种子细胞应用于细胞治疗,拓宽了小鼠孤雌生殖的研究领域和再生医学应用范围。孤雌胚胎聚合作为一种简便易行的技术手段,能够显著提高孤雌胚胎干细胞的建系效率,还能促使异质胚胎间的印记基因相互补偿从而更加趋近于正常受精的胚胎干细胞。我们在文中主要阐释了小鼠孤雌胚胎、孤雌聚合胚胎、孤雌二倍体胚胎干细胞、孤雌单倍体胚胎、孤雌聚合胚胎干细胞中印记基因的表达。 | 宋司航 张梓卉 廖辰 雷蕾 | 2015 | 解剖学报2015，46，5： | 2 |
| 10 | “人造精子”介导基因编辑技术的建立与应用显示文摘'人造精子',即小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞,是一种可在体外长期培养扩增和进行遗传操作的细胞,因其具备胚胎干细胞自我更新和多向分化的特性,并拥有代替精子使卵母细胞'受精',产生半克隆小鼠的能力,而被广泛应用于生命科学研究的各个领域。与CRISPR-Cas9技术相结合,'人造精子'能够同时实现细胞水平和动物水平的复杂基因编辑,因此可作为一个有力的研究工具。本文就'人造精子'技术的建立与改进、在基因编辑方面的应用,以及全基因组标签计划的提出与进展展开综述。 | 张麟 李劲松 | 2019 | 生命的化学2019，39，1： | 1 |
| 11 | “人造精子”介导半克隆技术的建立与应用显示文摘'人造精子',也即单倍体胚胎干细胞,为正向遗传学和反向遗传学的研究提供了巨大的帮助,使得研究对象从细胞层面,扩展到更为可信的动物层面。作为胚胎干细胞的一种,'人造精子'拥有着胚胎干细胞可以无限扩增,且保持着很高的多能性的优势;同时,它具备精子的特性,携带有稳定的单倍体基因组遗传信息,能够与卵细胞融合为合子,并发育成健康的半克隆个体。'人造精子'的技术不仅推动了基础研究的速度,而且对医学遗传病的研究和治疗提供了革命性的工具。文章主要讲述了'人造精子'的起源、半克隆技术的实现,以及'人造精子'目前最新的应用研究。 | 晏萌 李劲松 | 2018 | 自然杂志2018，40，4： | 1 |
| 12 | 单倍体胚胎干细胞研究概述显示文摘单倍体胚胎干细胞的研究发展迅速,为发育生物学和生物医学的应用奠定了基础。结合基因筛选技术,单倍体人类胚胎干细胞可以用于癌症、再生医学和疾病建模研究。本文概述哺乳动物单倍体胚胎干细胞的最新研究进展。 | 黄宇航 陈伶莉 胡雪峰 | 2019 | 生物学教学2019，44，1： | 0 |
| 13 | 单倍体干细胞研究进展显示文摘单倍体干细胞是一种全新的人工建立的细胞类型。在中国科学院'干细胞与再生医学研究'战略性科技先导专项的支持下,我国科学家在哺乳动物单倍体干细胞的建立和应用上取得了一系列重要进展,极大地丰富了单倍体干细胞类型,建立了多种新的基于单倍体干细胞的遗传修饰和辅助生殖技术,展示了单倍体干细胞可能为生殖生物学、发育生物学、遗传学和进化生物学带来的重要应用前景。主要对我国科学家在单倍体干细胞领域取得的进展进行介绍。 | 李伟 李劲松 周琪 | 2016 | 生命科学2016，28，8： | 0 |
| 14 | 哺乳动物单倍体细胞:遗传学研究中的利剑显示文摘单倍体细胞是只含有一套同源染色体的细胞,一般存在于酵母等低等生物[1]。而哺乳动物体细胞往往以二倍体形式存在,在其体内只有配子是单倍体细胞。配子在体外不能扩增且难以进行基因操作,而很难应用于遗传学筛选研究。单倍体胚胎干细胞是一类含有一套染色体,并且具有无限增殖能力和体外分化潜能的人造细胞系。 | 耿孟洋 张文豪 帅领 | 2020 | 发育医学电子杂志2020，8，4： | 0 |
| 15 | 哺乳动物单倍体胚胎干细胞的研究进展及应用潜力显示文摘单倍体胚胎干细胞(haploid embryonic stem cells,haESCs)是指只含有一套染色体,拥有类似于正常胚胎干细胞的特性,可以在体外无限增殖,并可以形成多种功能细胞、组织和器官的细胞类群。对于哺乳动物细胞基因功能的研究而言,haESC具有单倍性特征而使其成为研究隐形基因功能理想的细胞模型,是遗传学研究的新手段,具有巨大的应用潜力。近期,科学家已经成功建立了haESCs细胞系,此研究成果不仅为研究动物基因功能提供了工具,也为研究动物遗传修饰、改造打开了新渠道。本文综述了哺乳动物haESC的获得方法、研究进展、存在的主要问题以及应用前景。 | 王燕 赵永聚 | 2014 | 中国畜牧杂志2014，50，19： | 0 |
| 16 | 类精子干细胞介导的遗传改造显示文摘在基因编辑领域,以CRISPR-Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated protein 9)为代表的技术的广泛应用,使得科学家能快速、高效、精确地对靶基因序列进行遗传改造。但是,由于包括人类在内的真核细胞二倍性的特点,要获得纯合编辑的细胞系和模式动物仍需大量的时间和人力成本。类精子干细胞(DKO-AG-haESCs)系统的建立及其与CRISPR-Cas9技术的结合则可以快速地在基因、染色体等水平上进行任意遗传操作并转化为动物个体,实现疾病模拟。本文将对类精子干细胞介导的遗传改造进行总结和讨论。 | 杨振华 李劲松 | 2022 | 生命科学2022，34，10： | 0 |
| 17 | 复杂疾病小鼠模型构建新策略:类精子单倍体胚胎干细胞介导的半克隆技术显示文摘类精子单倍体胚胎干细胞是源自小鼠孤雄囊胚中的一种新型单倍体胚胎干细胞,仅含有父源遗传物质,性染色体为X染色体,能在体外长期自我更新、增殖或诱导分化,并可以利用CRISPR系统进行单基因或多基因的编辑,能替代精子使卵母细胞受精。区别于原核注射、卵胞质内注射获得嵌合体或利用四倍体补偿技术等传统构建基因修饰小鼠模型的方法,通过将基因编辑后的类精子单倍体胚胎干细胞注射到卵母细胞中,可以高效稳定地一步获得基因型确定的半克隆小鼠,不会存在嵌合现象,原代小鼠即可用于研究。基于类精子单倍体胚胎干细胞获得的多基因精准编辑的复杂疾病小鼠模型,可以在生物个体水平上阐述多个基因协同互作的效应,从而更充分地模拟复杂的、可能受多个基因影响的人类疾病的各种病理特征,以挖掘新的诊断和治疗方法。 | 赖梭梅 丁一夫 李劲松 | 2021 | 实验动物与比较医学2021，41，5： | 0 |
| 18 | Rho相关激酶抑制剂thiazovivin对人角膜内皮细胞形态和功能影响的研究显示文摘目的:探讨N-芐基-2-(嘧啶-4-基氨基)(Thiazovivin)对人角膜内皮细胞(HCEC)形态和功能的影响。方法实验研究。培养原代HCEC,采用光镜观察细胞形态及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫荧光实验进行鉴定。以N-钙黏着蛋白(N-cadherin)和钠钾泵(Na+/K+-ATPase)为指标,通过免疫荧光实验考察添加不同浓度(0、2、4、6μmol/L)Thiazovivin作用不同时间(24及48 h)对原代HCEC形态和离子泵功能的影响,以期筛选出改善HCEC形态和离子泵功能效果最佳的Thiazovivin的浓度及作用时间。最后通过免疫荧光实验和免疫印迹实验考察Thiazovivin对Rho相关激酶(ROCK)表达的影响。结果培养的原代HCEC的NSE染色均匀,荧光强度明显,细胞呈六边形紧密排列。原代HCEC在0、2、4、6μmol/L的Thiazovivin分别作用24 h后,Na+/K+-ATPase抗体染色后的平均吸光度(A)值分别为1.27±0.08、3.72±0.17、21.07±4.67、3.69±0.34,4μmol/L的Thiazovivin的Na+/K+-ATPase免疫荧光表达最强,其A值最大;通过N-cadherin免疫荧光染色,发现HCEC在4μmol/L Thiazovivin作用24 h后,细胞轮廓清晰,细胞结构完整。而4μmol/L的Thiazovivin作用时间延长至48 h,通过N-cadherin和Na+/K+-ATPase免疫荧光染色,发现与其作用24 h相比,荧光强度无明显变化,但细胞排列比24 h时略整齐。此外,Thiazovivin能减弱ROCK免疫荧光染色的荧光强度及下调ROCK蛋白表达。结论 Thiazovivin对原代HCEC的形态、连接和离子泵功能具有保护作用,4μmol/L Thiazovivin作用24 h对细胞形态、连接及离子泵功能的改善效果最佳,且Thiazovivin可显著抑制ROCK蛋白表达。(中华眼科杂志,2016,52:686-692) | 吴倩妮 凌云志 欧阳晨 谢礼婕 黄挺 | 2016 | 中华眼科杂志2016，52，9： | 0 |
| 19 | 单倍体胚胎干细胞的研究进展及应用前景显示文摘单倍体胚胎干细胞(haESCs)是只包含一组从精子或卵子遗传而来的基因组的干细胞,被称为孤雄单倍体胚胎干细胞(AG-haESCs)或孤雌单倍体胚胎干细胞(PG-haESCs)。近年来人们对haESCs的研究从脊椎动物、哺乳动物、非人灵长类动物到人类,不断取得突破性进展,建立起了各种动物的孤雄和孤雌单倍体干细胞系。haESCs既有与二倍体胚胎干细胞相似的多能性又有类似于配子的特性,故可用于产生半克隆小鼠,配合基因编辑技术与基因筛选系统,为个体水平研究基因功能和表观遗传修饰提供了强有力的工具,具有广泛的应用前景。本文综述了haESCs的特性及其应用进展,提出了haESCs研究过程中尚未完全解决的关键问题以及它们在基因筛选方面的潜在应用。 | 徐希桥 徐家伟 王海松 孙莹璞 | 2020 | 生殖医学杂志2020，29，9： | 0 |
| 20 | 小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞增殖的研究显示文摘孤雄单倍体胚胎干细胞(androgenetic haploid embryonic stem cells,AG-ha ESCs)是来源于只具有一套精子染色体组的单倍体胚胎。小鼠AG-ha ESCs在培养中呈现克隆较小、生长缓慢的现象。该研究比较了小鼠AG-ha ESCs与正常二倍体胚胎干细胞(R1细胞)、二倍化后的AGha ESCs(DAG-ha ESCs)的生物学特征并探索其中的机制。结果表明,尽管小鼠AG-ha ESCs与R1细胞一样成集落样生长、边缘光滑清晰,但细胞大小与增殖速率均显著小于R1细胞;DAG-ha ESCs的增殖速率略高于AG-ha ESCs,但仍然显著低于R1。更为重要的是,通过RT-q PCR检测分析表明,AGha ESCs和DAG-ha ESCs细胞周期调控网络有异常,因此,单倍体基因组转录调控的异常是小鼠AGha ESCs增殖缓慢的关键因素,而不是克隆大小和二倍化。该研究为今后AG-ha ESCs细胞周期调控方面的进一步研究提供了良好的平台。 | 熊泽宇 何文腾 陈嘉瑜 韩之明 孙筱放 高绍荣 | 2016 | 中国细胞生物学学报2016，38，8： | 0 |
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