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| 1 | CRISPR/Cas9系统在基因组DNA片段编辑中的应用显示文摘源于细菌和古菌的Ⅱ型成簇规律间隔短回文重复系统[Clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated nuclease 9(Cas9),CRISPR/Cas9]近年被改造成为基因组定点编辑的新技术。由于它具有设计简单、操作方便、费用低廉等巨大优势,给遗传操作领域带来了一场革命性的改变。本文重点介绍了CRISPR/Cas9系统在基因组DNA片段靶向编辑方面的研究和应用,主要包括DNA片段的删除、反转、重复、插入和易位,这一有效的DNA片段编辑方法为研究基因功能、调控元件、组织发育和疾病发生发展提供了有力手段。本文最后展望了Ⅱ型CRISPR/Cas9系统的应用前景和其他类型CRISPR系统的应用潜力,为开展利用基因组DNA片段靶向编辑进行基因调控和功能研究提供参考。 | 李金环 寿佳 吴强 | 2015 | 遗传2015，37，10： | 16 |
| 2 | 糖尿病研究中的动物模型进展显示文摘虽然糖尿病的研究不断有新的进展,诊断方法和治疗手段不断更新,但其危害并没有明显降低,反而呈现逐年加重的趋势。为了更深入、全面地揭示糖尿病机制,研发更有效、可靠、无低血糖风险的药物必须清楚了解相应的疾病模型。该文就糖尿病动物模型的种类,建模方法,优缺点,适用范围等进行综合评述,旨在为研究者选择合适的动物模型提供参考。 | 宋丹 冉丽媛 姜如娇 吴英杰 | 2016 | 中国比较医学杂志2016，26，9： | 16 |
| 3 | 生育力与生殖健康:生殖医学的挑战与对策——第170期“双清论坛”学术综述显示文摘生殖健康是人口与健康领域的重要议题之一,对世界人口与经济社会发展具有深远的影响,受到国际社会的普遍关注。当前,全球生育年龄普遍增高,环境污染、社会压力、生活方式改变等问题凸显,严重影响了人类的生育力和生殖健康.在我国,'全面二孩'政策的实施也给生殖健康领域带来新的挑战.为了应对挑战,2016年12月1日至2日国家自然科学基金委医学科学部、信息科学部、化学科学部、生命科学部和政策局联合举办了主题为'生育力与生殖健康'的第170期双清论坛,来自全国生殖生物学、生殖医学、生殖工程、遗传学、妇产科学、儿科学、化学、影像学、流行病学等学科领域的40余位专家学者应邀参加.通过充分而深入的研讨,与会专家围绕'生殖工程与干细胞'、'生殖细胞发育与成熟'、'胚胎着床与妊娠维持'、'胎儿发育与子代健康'、'生殖医学新技术'这五大议题,凝练了该领域的重要研究方向和关键科学问题.本文将对相关的研讨内容和科学问题进行综述,以期对相关领域的发展起到推动作用. | 吕群燕 王雁玲 田婵 张弘 程京 乔杰 沙家豪 张学 周琪 董尔丹 | 2017 | 中国科学:生命科学2017，47，7： | 13 |
| 4 | CRISPR/Cas9的原理及其在疾病治疗中的研究进展显示文摘规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及其相关Cas9蛋白介导的新一代基因编辑技术具有操作容易、成本低廉的优势,可实现精确高效的基因编辑功能,包括定点插入、定点敲除及定点突变等,已广泛用于多种动植物的基因编辑。 | 王亮 赵同标 | 2017 | 发育医学电子杂志2017，5，1： | 11 |
| 5 | CRISPR/Cas9基因组编辑技术在癌症研究中的应用显示文摘CRISPR/cas9基因组编辑技术因其设计简单以及操作容易,使其在基因编辑的研究中越来越受到欢迎。利用该技术,科研人员可以实现在碱基的水平对基因组进行定点修饰。CRISPR系统现已经被广泛地应用到多个物种的基因组编辑以及癌症的相关研究中。本文在最新研究进展的基础上,结合对癌症研究及基因组编辑技术的理解,对CRISPR/Cas9技术在癌症研究中的应用进行了综述。 | 王大勇 马宁 惠洋 高旭 | 2016 | 遗传2016，38，1： | 10 |
| 6 | Genome editing in large animals: current status and future prospects显示文摘Large animals(non-human primates,livestock and dogs)are playing important roles in biomedical research,and large livestock animals serve as important sources of meat and milk.The recently developed programmable DNA nucleases have revolutionized the generation of gene-modified large animals that are used for biological and biomedical research.In this review,we briefly introduce the recent advances in nuclease-meditated gene editing tools,and we outline these editing tools’applications in human disease modeling,regenerative medicine and agriculture.Additionally,we provide perspectives regarding the challenges and prospects of the new genome editing technology. | Jianguo Zhao Liangxue Lai Weizhi Ji Qi Zhou | 2019 | National Science Review2019，6，3： | 10 |
| 7 | 我国生物安全科技工作成就与展望显示文摘生物安全是国家安全的重要组成部分,科技是国家生物安全的重要战略支撑。针对我国当前面临的重大生物安全威胁,科技部进行了一系列项目部署,不断加强生物安全科技支撑能力建设。本文重点总结了自“十二五”以来我国生物安全科技工作在重大新发突发传染病防控、外来物种入侵甄别与防控、实验室生物安全、生物安全特种资源库建设、基因合成与编辑技术等方面取得的主要成就,展望了前沿生物技术发展与学科交叉融合所带来的新型生物安全风险与防控机遇,并对我国生物安全科技发展提出建议。 | 田金强 何蕊 陈洁君 潘子奇 | 2019 | 生物安全学报2019，28，2： | 7 |
| 8 | 2015年中国动物遗传学研究领域若干重要进展显示文摘2015年中国科学家在动物遗传学领域的研究成果斐然。据不完全统计,2015年围绕线虫(Caenorhabditis elegans)、果蝇(Drosophila melanogaster)、斑马鱼(Danio rerio)、爪蛙(Xenopus)和小鼠(Mus musculus)等5个模式动物发表的论文中涉及中国的论文数约占总论文数的1/5,众多具有原创性的研究成果在国际高影响力的期刊上发表。例如:首次鉴定出潜在的磁受体Mag R,为磁感应遗传与分子机制的研究带来了重大突破;揭示了褐飞虱(Nilaparvata lugens)翅多型性的遗传基础;首次证明在果蝇基因组中存在腺嘌呤的N6-甲基化;揭示了哺乳动物树突棘修剪与成熟的新的分子机制;发现CRTC2介导的信号通路调控肝脏脂代谢;发现神经递质多巴胺能够调节炎症反应;发现Gasdermin蛋白家族具有诱导细胞焦亡的功能;发现小清蛋白阳性的兴奋性视觉通路能够触发小鼠的恐惧反应等。2015年中国科学家在TALEN和CRISPR/Cas基因组靶向编辑技术领域同样做出了重要贡献。据不完全统计,其中涉及中国的论文占比多于1/5,覆盖了从线虫到灵长类的多种动物、多种基因组修饰方法,并且在世界上首次成功编辑了人类早期胚胎。中国在基因组序列测定与分析研究领域一如既往地保持世界领先,2015年中国科学家在动物基因组方面绘制了家鹅(Anser cygnoides)、壁虎(Gekko japonicus)、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)和大黄鱼(Larimichthys crocea)的基因组序列图谱,完成了69头中国地方猪(Sus scrofa)的基因组重测序,分别分析了这些动物所独有的生理病理特征以及环境适应能力的遗传基础。本文首次尝试对以中国本土科研团队为主的动物遗传学领域若干重要科研进展进行年度回顾,并选取若干重点论文进行简要介绍,以彰显中国科学家在动物遗传学领域的科研实力和重要贡献。 | 张博 陈晓芳 黄勋 杨晓 | 2016 | 遗传2016，38，6： | 7 |
| 9 | CRISPR/Cas9系统——靶向基因组编辑的新策略显示文摘CRISPR/Cas系统是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。Ⅱ型CRISPR/Cas系统经人工改造为由Cas9核酸酶和特异的sgRNA构成的新型靶向基因组编辑技术,即CRISPR/Cas9系统。与锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活子样效应因子核酸酶(TALENs)相比,CRISPR/Cas9系统操作简单,花费低,编辑功能更强。本文综述了CRISPR/Cas9系统的基本结构、作用机制和应用进展,并对其应用前景进行了展望。 | 赵海卫 吕欣 尹文 | 2015 | 中国病原生物学杂志2015，10，3： | 7 |
| 10 | CRISPR-Cas9基因编辑技术在构建实验动物肿瘤模型中的应用进展显示文摘CRISPR-Cas9是一种以细菌和古细菌抵御外源核酸入侵的免疫机制为基础开发出来的新型基因编辑技术。与传统的锌指核酸酶(ZFN)、胚胎干细胞(ES细胞)打靶和转录激活因子样效应因子核酸酶(TALEN)技术相比,该基因编辑技术具有操作简单、更加高效、更容易获得纯合子突变体、细胞毒性小、无物种限制等优势,但也存在脱靶效应等缺点。目前,CRISPR-Cas9技术已被广泛用于肿瘤相关研究中,尤其在构建实验动物肿瘤模型中取得许多重要成果。我们主要对CRISPR-Cas9基因编辑技术在构建实验动物肝癌模型、结直肠癌模型、肺癌模型、宫颈癌模型、白血病模型、脑瘤模型中的研究现状及应用进展做简要综述。 | 熊伟 杨勇琴 自加吉 孙美涛 梅雯 左绍远 张晓娟 | 2017 | 生物技术通讯2017，28，4： | 5 |
| 11 | Application of the genome editing tool CRISPR/Cas9 in non-human primates显示文摘In the past three years, RNA-guided Cas9 nuclease from the microbial clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR) adaptive immune system has been used to facilitate efficient genome editing in many model and non-model animals. However, its application in nonhuman primates is still at the early stage, though in view of the similarities in anatomy, physiology, behavior and genetics, closely related nonhuman primates serve as optimal models for human biology and disease studies. In this review, we summarize the current proceedings of gene editing using CRISPR/Cas9 in nonhuman primates. | Xin LUO Min LI Bing SU | 2016 | Zoological Research2016，37，4： | 4 |
| 12 | Local transgene expression and whole-body transgenesis to model brain diseases in nonhuman primate显示文摘Animal model is an essential tool in the life sciences research, notably in understanding the pathogenesis of the diseases and for further therapeutic intervention success. Rodents have been the most frequently used animals to model human disease since the establishment of gene manipulation technique. However, they remain inadequate to fully mimic the pathophysiology of human brain disease, partially due to huge differences between rodents and humans in terms of anatomy, brain function, and social behaviors. Nonhuman primates are more suitable in translational perspective. Thus, genetically modified animals have been generated to investigate neurologic and psychiatric disorders. The classical transgenesis technique is not efficient in that model; so, viral vector-mediated transgene delivery and the new genome-editing technologies have been promoted. In this review, we summarize some of the technical progress in the generation of an ad hoc animal model of brain diseases by gene delivery and real transgenic nonhuman primate. | Lucie Chansel-Debordeaux Erwan Bezard | 2019 | Animal Models and Experimental Medicine2019，2，1： | 3 |
| 13 | 限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠显示文摘CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠'丢失'该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。 | 高旭 马宁 王大勇 张赫 张艳芬 徐亚 贺军 徐书会 霍亚丽 杜智敏 | 2016 | 中国生物化学与分子生物学报2016，32，4： | 3 |
| 14 | 利用CRISPR/Cas9系统构建FGF21基因敲除小鼠模型显示文摘成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors,FGFs)是细胞间的多功能信号分子,调节生物体的多种生理功能。FGF21作为一种重要的调控因子,对毛囊发育及生长周期具有重要作用。为研究FGF21基因对毛囊发育及生长周期的影响及作用机制,本研究通过构建靶向敲除FGF21基因的载体,体外将Cas9 m RNA和g RNA显微注射到FVB小鼠受精卵中,在小鼠FGF21基因的第1外显子上造成移码突变,从而获得FGF21基因敲除(knock out,KO)小鼠。通过测序鉴定F0代小鼠基因型,共获得3只FGF21等位基因敲除小鼠(Fgf21^(-/-));q RT-PCR和Western blotting结果表明,在Fgf21^(-/-)小鼠中未检测到FGF21 m RNA表达和FGF21蛋白表达;经脱毛再生及皮肤组织H&E染色发现,与野生型(wild type,WT)小鼠相比,Fgf21^(-/-)小鼠体重降低、器官组织未出现异常变化、毛发生长速度减慢、毛囊的直径和毛发的密度均减小。本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Fgf21^(-/-)小鼠模型,为后续研究FGF21基因在毛囊发育及生长周期中的功能提供了更好的动物模型。 | 刘旭 张平 张晓枫 李兴 白宇 贾克荣 郭晓东 张豪 马晓燕 仓明 刘东军 郭旭东 谷峰 | 2018 | 遗传2018，40，1： | 3 |
| 15 | Paving the road for biomedicine: genome editing and stem cells in primates显示文摘Non-human primates(NHPs) are similar with humans in their anatomy, physiology, genetics and neural functions, and in their cognition, emotions and social behavior. The NHP model has played an important role in the biomedical research, development of vaccines and drugs and new therapies for many diseases.Recent advances in genome editing have generated NHP models for human diseases. Genome editing integrated with derivation of NHP pluripotent stem cells now provides an optimal resource to regenerate medicine. | Yuyu Niu Tianqing Li Weizhi Ji | 2017 | National Science Review2017，4，4： | 3 |
| 16 | 干细胞与再生医学显示文摘多能干细胞(PSCs)具有发育的多潜能性,可以分化为机体各种细胞类型,是再生医学领域进行细胞替代治疗以及组织/器官再生的基础.如何由终末分化的体细胞重编程获得病人特异的PSCs,是再生医学领域的核心问题之一,目前主要采取两种重编程策略:借助核移植技术由早期胚胎体外建系获得,或通过诱导重编程技术获得.本文将综述不同多能性等级PSCs的获得方法以及其在多能性机制研究中的应用,并讨论PSCs通过异种嵌合实现组织/器官再造的潜在应用价值.PSCs的研究不仅推动了基础生物学研究的发展,同时也为再生医学走向临床开辟了道路. | 王加强 周琪 | 2016 | 中国科学:生命科学2016，46，7： | 3 |
| 17 | 非人灵长类动物基因编辑技术的应用及挑战显示文摘建立有效的动物模型是研究人类疾病演进、开发新型治疗手段的重要方法。非人灵长类动物在进化发育、生理生化及病理方面和人类最接近,是研究人类疾病的理想动物模型。随着基因编辑技术的发展,研究者已经成功建立了多种模仿人类疾病的非人灵长类动物模型。但是CRISPR/Cas9的脱靶效应、嵌合突变以及基因敲入效率较低等突出问题也逐渐引起重视。本文综述了基因编辑技术在建立非人灵长类动物模型中的应用现状,提出了目前亟需解决的难点和应对策略,以期为高效、准确构建非人灵长类动物模型提供借鉴与参考。 | 毕延震 肖红卫 张立苹 任红艳 华再东 华文君 王正 牛敏杰 林郑云 任习东 孙理华 郑新民 | 2018 | 生物技术通报2018，34，5： | 2 |
| 18 | CRISPR/Cas9基因编辑技术应用于绿僵菌显示文摘近年来的研究显示,CRISPR/Cas9系统是强有力的基因编辑新技术。以蝗绿僵菌为试验对象,以同源重组敲除系统为对照,研究CRISPR/Cas9系统敲除蝗绿僵菌的基因isp4核苷酸序列。阐明了CRISPR/Cas9载体构建的方法,比较了CRISPR/Cas9和Recombinase敲除技术的异同,最后通过PCR和突变菌株的表型验证了CRISPR/Cas9系统能够应用于绿僵菌。结果表明,CRISPR/Cas9在昆虫病原真菌绿僵菌中是有效的基因编辑技术。 | 张二豪 张杰 | 2021 | 江苏农业科学2021，49，11： | 2 |
| 19 | 原位敲除猕猴视网膜RHO基因构建非人灵长类视网膜色素变性模型显示文摘遗传视网膜退行性疾病是全球范围内最主要的致盲疾病.该疾病主要的特征是视网膜感光细胞退化导致了不可逆的视觉能力丧失.视网膜色素变性(Retinitis pigmentosa,RP)便是其中的一大亚类,目前临床上尚无有效的治疗手段.本研究首次利用腺相关病毒(Adeno Associated Virus,AAV)介导的CRISPR/SaCa9技术,成功实现原位敲除目的基因RHO,建立了非人灵长类RP模型.研究结果发现,RHO敲除的猕猴视网膜表现出典型的RP感光细胞变性,视杆和视锥细胞渐行性死亡.在分子水平上,RHO基因成功地被敲除.RHO蛋白表达量也大幅度下降.免疫组化和电镜结果揭示了突变视杆细胞外段缺失或者变短,再现了RP最典型的特征.生理功能检测发现,RHO敲除视网膜的视网膜电流图(Electroretinogram,ERG)反应大幅度下降,证明了其视觉能力的受损.该动物模型为研究人类RP的发病机理以及制定相应治疗策略提供了重要的类人模型. | 李守振 胡英周 李云琴 胡敏 王文超 马玉乾 才源 卫敏 姚艺川 王云 董凯 顾永昊 赵欢 鲍进 仇子龙 章梅 胡新天 薛天 | 2021 | Science Bulletin2021，66，4： | 2 |
| 20 | Embryo-Engineered Nonhuman Primate Models:Progress and Gap to Translational Medicine显示文摘Animal models of human diseases are vital in better understanding the mechanism of pathogenesis and essential for evaluating and validating potential therapeutic interventions.As close relatives of humans,nonhuman primates(NHPs)play an increasingly indispensable role in advancing translational medicine research.In this review,we summarized the progress of NHP models generated by embryo engineering,analyzed their unique advantages in mimicking clinical patients,and discussed the remaining gap between basic research of NHP models to translational medicine. | Mei Huang Jiao Yang Peng Li Yongchang Chen | 2021 | Research2021，，1： | 2 |
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