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| 1 | 梓醇对AGEs刺激巨噬细胞介导肾系膜细胞损伤的影响显示文摘目的探讨梓醇对晚期糖基化终末产物(AGEs)刺激巨噬细胞(RAW264.7)介导肾系膜细胞(MMCs)损伤的影响。方法将MMCs接种于Transwell小室,RAW264.7接种于下层孔板共培养,设置空白对照组、模型组、梓醇组(0.1、1.0、10.0μmol·L-1),设置氨基胍组(10.0μmol·L-1)作为阳性对照。各组加入药物孵育1 h后,用AGEs(100 mg·L-1)刺激RAW264.7,继续孵育23 h。采用MTT法检测MMCs增殖;免疫荧光法检测MMCs中COL-Ⅳ的表达;Western blot法检测MMCs中FN、COL-Ⅳ、TGF-β的表达;ELISA法检测RAW264.7上清液中IL-6、IL-12、TNF-α水平。结果梓醇可抑制AGEs刺激巨噬细胞介导系膜细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),下调系膜细胞FN、COL-Ⅳ、TGF-β蛋白表达(P<0.05,P<0.01),降低巨噬细胞上清中IL-6、IL-12、TNF-α水平(P<0.05,P<0.01)。结论梓醇对AGEs刺激巨噬细胞介导系膜细胞损伤有明显的的保护作用,下调系膜细胞FN、COL-Ⅳ、TGF-β蛋白表达,抑制巨噬细胞炎症因子分泌,减轻炎症反应,从而缓解糖尿病肾病炎性损伤。 | 王威 富莹雪 陈璟 甘啸阳 许惠琴 喻斌 吕高虹 卢金福 | 2020 | 中国药理学通报2020,36,1: | 6 |
| 2 | 晚期糖基化终末产物对成骨细胞自噬能力的影响显示文摘目的:糖尿病患者体内晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)的过量生成会影响成骨细胞的正常功能,而这一过程可能与成骨细胞的自噬有关。本实验研究AGEs对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化过程中自噬能力的影响。方法:将大鼠BMSCs体外分离与培养,并用不同质量浓度(0、50、100、200及400 mg/L)的AGEs处理不同时间(3、6、12、24、48及72 h),检测各组细胞增殖活性,采用透射电镜观察各组细胞内自噬体形成,real-time PCR检测各组细胞Beclin1和LC3的m RNA表达水平,蛋白质印迹法检测各组细胞Beclin1和LC3的蛋白质表达水平。随后加入自噬促进剂或抑制剂,观察成骨相关基因的表达。结果:与0 mg/L组比较,50和100 mg/L AGEs组BMSCs增殖活性均升高(均P<0.01),自噬体形成的数量增多,自噬相关基因LC3、Beclin1的mRNA和蛋白质表达均增加(均P<0.01)。200和400 mg/L AGEs组BMSCs增殖活性降低,自噬体形成数量减少,自噬相关基因LC3、Beclin1的mRNA和蛋白质表达减少。100 mg/L AGEs组碱性磷酸酶染色深于0 mg/LAGEs组,成骨相关基因的mRNA表达增加(P<0.01),加入自噬抑制剂后结果得到逆转;200 mg/L AGEs组碱性磷酸酶染色浅于0 mg/L AGEs组,成骨相关基因的mRNA表达减少(P<0.01),加入自噬促进剂后结果得到逆转。结论:低浓度的AGEs通过促进自噬增强BMSCs的增殖活性,促进其成骨分化;高浓度的AGEs通过抑制自噬降低BMSCs的增殖活性,抑制其成骨分化。不同浓度的AGEs,对BMSCs成骨分化过程中自噬能力的影响不同。 | 罗丹 胡赟 唐宇 丁晓倩 李彩玉 郑雷蕾 | 2021 | 中南大学学报(医学版)2021,46,4: | 2 |
| 3 | 晚期糖基化终末产物(AGEs)对人软骨细胞自噬活性的影响研究显示文摘目的探究晚期糖基化终末产物(AGEs)对人软骨细胞自噬活性的影响。方法 (1)人软骨胞采用不同度的AGEs处理不同时间,采用CCK-8法检测细胞的活性。(2)AGEs浓度为100 mg/L处理人软骨细胞0 h,3 h,6 h,12 h,24 h,48 h后采用WB方法检测细胞LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的表达。(3)不同浓度的AGEs(50 mg/L,100mg/L,200 mg/L)处理软骨细胞24 h后,采用WB方法检测细胞LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的表达。结果 (1)CCK-8结果显示:在一定浓度范围内,AGEs处理人软骨胞的活性在短时间内(24 h之内)随时间的变化升高(与对照组比较P<0.05);在一定时间范围内,低浓度AGEs(100 mg/L)使人软骨胞的活性升高,高浓度AGEs(200 mg/L)使人软骨胞的活性降低(与对照组比较P<0.05)。(2)AGEs浓度为100 mg/L处理人软骨细胞LC3-Ⅱ的表达随时间的变化明显增加,与对照组比较在24 h后更为明显(P<0.05)。(3)不同AGEs浓度处理人软骨细胞24 h后,LC3-Ⅱ的表达明显高于对照组(P<0.05)。结论低浓度的AGEs在短时间内可能通过调节软骨细胞自噬增强细胞活性。长期的或者高浓度的AGEs使人软骨细胞自噬降低影响细胞的活性。 | 王朝俊 陈铖 张莹 张海斌 梁建厦 黄浩 | 2018 | 航空航天医学杂志2018,29,1: | 2 |
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